随着农药的种类和用量逐年增加，释放于环境中的农药不仅带来了环境污染和生态平衡问题，而且也对人类健康造成潜在危害。流行病学资料显示，肿瘤发生率的增长与使用农药的农产品密切相关^[1]。因此，研究农药的遗传毒性具有重要意义。粉唑醇具有内吸性，在植物体内传导，对病害有保护和治疗作用。可防治禾谷类作物白粉病、长蠕孢属、柄锈菌属、壳针菌属病原菌等，对谷物白粉病有特效。本文通过慧星试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验研究粉唑醇的遗传毒性，为评价粉唑醇对生态系统的影响及其合理安全使用提供科学依据。

粉唑醇，化学名称为α-(2-氟苯基)(4-氟苯基)-1氢-1，2，4-三唑-1-乙醇(兴农股份有限公司提供，纯度95%)。二甲基亚砜(DMSO)，二氨基芴(2-AF)，甲基磺酸甲酯(MMS)，TritonX-100, 溴化乙锭(EB)(美国Sigma公司)。环磷酰胺(CP)，丝裂霉素C (上海华联制药有限公司)。小牛血清(上海普飞生物有限公司)。

实验菌株为组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100和TA102菌株(沈阳国家新药安全评价中心遗传毒理实验室)，经鉴定各项遗传特性均符合实验要求，菌株增菌、基因型鉴定及各种试验用培养基均按标准操作^[2]。

健康ICR小鼠100只，雌、雄各半，体重(25±2) g (中国科学院上海实验动物中心)，常规喂养，观察1周后使用。

(1) Ames试验：采用标准平皿掺入法^[2]，依照文献[3]方法。(2) 小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE) 微核试验：依照文献[3]方法。取ICR小鼠5mg/kg 3个受试农药剂量组，1个阳性对照组(环磷酰胺，剂量为50 mg/kg)，1个阴性对照组(DMSO)。(3) 慧星试验：动物分组、染毒依照文献[3]方法。取材依照文献[4]方法。慧星试验依照文献[5]方法并略加改进^[4]。荧光显微镜下用515~560 nm的激发光观察，在200×下每只动物计数100个慧星图像，用CASP (Comet Assay Software Project) 图像分析软件测定尾长、尾部面积、尾部DNA含量、尾矩(TM)。

应用SPSS 11.5软件进行统计分析。

从表 1可见，粉唑醇Ames试验，各菌株在5 000 μg/皿剂量组出现抑菌，各剂量组无论是否代谢活化，细菌回变数小于阴性对照组细菌回变数的2倍。且无剂量-效应关系，皆为阴性试验结果。结果表明，在本试验条件下，粉唑醇无诱导微生物基因突变的能力。

表 1

表 1 粉唑醇对鼠伤寒沙门菌体外回复突变试验结果(x±s)

表 1 粉唑醇对鼠伤寒沙门菌体外回复突变试验结果(x±s)

粉唑醇小鼠嗜多染红细胞微核试验中，雄性小鼠80，40，20 mg/kg 3个受试农药剂量组诱导的微核发生率分别为(1.4±0.53) ‰，(1.6±0.88) ‰，(2.0±0.71) ‰，与阴性对照组诱导的微核发生率(1.4±0.54) ‰比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。阳性对照组的微核发生率为(14.8±3.10) ‰，与阴性对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。雌性小鼠80，40，20 mg/kg 3个受试农药剂量组诱导的微核发生率分别为(1.8±0.46) ‰，(1.8±0.83‰)，(1.6±0.88) ‰，与阴性对照组诱导的微核发生率(1.8±0.43) ‰比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。阳性对照组的微核发生率为(17.2±2.87) ‰，与阴性对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。同时各试验组PCE/正染红细胞(NCE) 的比值均在正常值范围内(正常比值范围：0.60~1.20)，试验结果为阴性。表明在本试验条件下，粉唑醇对ICR小鼠无诱发PCE微核率增高作用，即粉唑醇无诱导染色体损伤的能力。

从表 2可见，粉唑醇慧星试验，随着粉唑醇浓度的升高，小鼠骨髓细胞慧星尾长、尾部DNA含量、尾部面积和尾矩都呈现增加趋势，其中剂量80mg/(kg·bw) 时，尾部DNA含量与阳性对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，而其他评价指标与阳性对照组比较，差异无统计学意义。试验结果总的趋势是随着粉唑醇浓度的升高，细胞受损度增高，但无明显的阳性反应，得出粉唑醇在试验剂量范围内不能引起小鼠骨髓细胞的DNA损伤。使用台盼兰进行细胞存活率测定时，试验前细胞存活率均在95%以上，染毒后的细胞存活率也在90%以上，说明DNA损伤为受试物作用所致，而非细胞毒性。

表 2

表 2 粉唑醇慧星试验结果(x±s)

表 2 粉唑醇慧星试验结果(x±s)

农药注册要求对化合物潜在遗传毒性进行综合评价，但单一试验尚不能检测所有的遗传毒性化合物，因此，常用的方法是进行一组遗传毒性体外和体内试验，这些试验相互补充而不是代表不同的等级水平。在本次试验中，选用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、慧星试验这一组遗传毒理学试验，从不同的遗传学终点角度，对粉唑醇的遗传毒性进行分析。3项试验结果均为阴性，表明在本次实验条件下，该受试物未显示有遗传毒性作用，为该农药的遗传毒性评价提供了相关依据。但长期低剂量反复接触是否有蓄积作用及远期效应，需要进一步研究。