中国公共卫生  2008, Vol. 24 Issue (7): 836-837   PDF    
引用本文
封会茹, 计融, 李燕俊, 李业鹏, 江涛, 赵熙, 钟凯, 韩春卉, 李玉伟, 张靖, 陈庭君. 破壁蛋白核小球藻对小鼠免疫调节作用[J]. 中国公共卫生, 2008, 24(7): 836-837.
FENG Hui-ru, JI Rong, LI Yan-jun, et al. Study on immunoregulation of chlorella pyrenoidos with disintegrated cell wall on mice[J]. Chinese Journal of Public Health, 2008, 24(7): 836-837.
破壁蛋白核小球藻对小鼠免疫调节作用
封会茹1, 计融2, 李燕俊2, 李业鹏2, 江涛2, 赵熙2, 钟凯2, 韩春卉2, 李玉伟2, 张靖2, 陈庭君2     
1. 北京市丰台区疾病预防控制中心微生物检验科, 北京 100071;
2. 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所
收稿日期: 2007-10-18
基金项目: 卫生部法监司资助项目“保健食品功能学评价程序和检验方法研究”(2002-2003)
作者简介: 封会茹(1973- ),女,河北人,主管技师,硕士,主要从事微生物检验。
通讯作者: 计融
摘要: 目的 探讨破壁蛋白核小球藻对健康小鼠免疫系统的影响。 方法 选用BalB/c正常小鼠,随机分组,经口给予小鼠不同剂量的小球藻粉水溶液0,0.15,1.50,4.50g/(kg·bw)每日1次,30 d后测量体重增长值、胸腺体重比值、脾脏体重比值、迟发型变态反应、刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠淋巴细胞转化、抗体生成细胞数、半数溶血值、小鼠碳廓清能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、杀伤细胞(NK)活性。 结果 破壁蛋白核小球藻能促进小鼠体重增长,提高小鼠的脾脏体重比值,增强小鼠的迟发型变态反应能力,增强ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力,增强巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力,增强NK细胞活性,对胸腺体重比值、抗体生成细胞数、半数溶血值、单核-巨噬细胞碳廓清能力无显著影响。 结论 破壁蛋白核小球藻对健康小鼠具有免疫调节作用。
关键词： 小球藻     免疫调节     细胞免疫     体液免疫     单核-巨噬细胞     NK细胞活性    
Study on immunoregulation of chlorella pyrenoidos with disintegrated cell wall on mice
FENG Hui-ru, JI Rong, LI Yan-jun, et al     
Center for Disease Control and Prevention of Fengtai District, Beijing 100071, China
Abstract: Objective To study the influence of chlorella on the immune system of healthy mice. Methods 60 BALB/c mice were selected and divided randomly into four groups.Different doses of chlorella pyrenoidosa[0,0.15,1.50,4.50g/(kg·bw)]were administered to the mice orally for 30 days.A series of classical tests were adopted to evaluate the effects. Results The weight gain of the mice administered with chlorella pyrenoidosa was higher than that of the control,and the difference has statistical significance(P＜0.05).The ratio of spleen/body weight,delayed hypersensitivity response,the lymphocyte transformation of mice induced by conA,the phagocytotic ability of macrophages,NK cell activity were all higher than those of the control and had statistically significant differences(P＜0.05).The ratio of thymus gland/body weight,the number of antibody-producing cells,the amount of hemolytic antibody and the phagocytotic ability of macrophages for chicken erythrocytes were higher than those of the control,too.But there was no statistically significant difference(P＜0.05). Conclusion Chlorella pyrenoidosa with disintegrated cell wall can modulate the immune system of healthy mice.
Key words: chlorella pyrenoidosa     immunoregulation     cellular immunity     humoral immunity     monocytes-macrophages     NK cells    

小球藻是淡水产藻类的一种，种类繁多，其中以蛋白核小球藻蛋白质含量最高，达65%，其生物活性物质小球藻生长因子(Chlorella Growth Factor CGF)的含量也最丰富，在构造上它是核酸和氨基酸的复合体，是小球藻具有保健作用的原因之一。小球藻含有丰富的营养物质和一些生物活性代谢产物[1, 2]。近年研究表明，小球藻干粉或其提取物有广泛的药理和保健作用[3-6]，但有关小球藻对健康小鼠细胞免疫系统、体液免疫系统及单核-巨噬细胞、自然杀伤(MK)细胞等方面的研究报道较少。本文研究小球藻对健康小鼠免疫方面的综合影响。现报告如下。

1 材料与方法 1.1 样品

破壁蛋白核小球藻(日本国太阳绿藻株式会社)。

1.2 材料

RPMI1640培养液(美国Gibcobrl公司)；绵羊红细胞、鸡红细胞、YAC-1细胞株(卫生部营养与食品安全所)；小牛血清(浙江省金华市清湖犊牛利用研究所)；刀豆蛋白A(ConA)、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)(美国Sigma公司)；氧化型辅酶I(NADI)、补体、乳酸脱氢酶基质液、琼脂糖(北京市化学试剂公司)。

1.3 实验动物及分组

6～8周龄17～19 g的BalB/c(京动许字(2000) 第017号)健康雄性小鼠180只及分组(中国药品生物制品检定所实验动物中心)。由于受测试指标的限制，实验动物分3个免疫组，I组进行小鼠脏器体重比值测定、迟发型变态反应实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、半数溶血值的测定和抗体生成细胞数的测定；II组进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定；III组进行碳廓清实验。每个免疫组设1个阴性对照组及3个剂量组，即小球藻0，0.15，1.50，4.50 g/(kg·bw)。将受试物用匀质器粉碎后用无菌蒸馏水配制成所需浓度，对照组以无菌蒸馏水代替。受试动物随机分配到对照组及各剂量组，每组15只。

1.4 实验方法

实验动物饲养于中国医学科学院肿瘤研究所实验动物室二级动物房，温度20～25℃，相对湿度40%～50%，24 h人工昼夜(7～19时昼，19～7时夜)。每日给小鼠灌服1次，连续灌服30 d。各项指标测定按《保健食品功能学评价程序及检验方法》中免疫调节功能的评价方法[7]进行。

1.5 统计分析

采用Statal软件进行统计分析。

2 结果 2.1 小球藻对小鼠体重及脏器体重比值的影响(表 1)
表 1 小球藻对小鼠体重及脏器体重比值的影响(x ± s)

小鼠的初始体重在3个剂量组与阴性对照组间比较，差异均无统计学意义(P＞0.05) 。

由表 1可见，小鼠的体重增长值和脾脏体重比值试验组均高于阴性对照性，在0.15g/(kg·bw)与阴性对照组间比较，差异有统计学意义(P＜0.05) ；小鼠胸腺体重比值各剂量组与阴性对照组比较，差异均无统计学意义(P＞0.05) 。

2.2 小球藻对小鼠免疫功能的影响(表 2)
表 2 小球藻对小鼠各项免疫指标的影响(x ± s)

试验组所有测试指标均高于对照组，其中小鼠足跖肿胀度在4.50 g/(kg·bw)与阴性对照组间比较，差异有统计学意义(P＜0.01) ；小鼠淋巴细胞的增殖能力在0.15 g/(kg·bw)与阴性对照组间比较，差异有统计学意(P＜0.05) ；抗体生成细胞数及半数溶血值在各剂量组与对照组间比较，差异均无统计学意义(P＞0.05) ；碳廓清能力在各剂量组与对照组间比较，差异均无统计学意义(P＞0.05) ；吞噬鸡红细胞的吞噬指数在0.15，1.50 g/(kg·bw)与阴性对照组间比较，差异有统计学意义(P＜0.01，P＜0.05) ；在小球藻1.50 g/(kg·bw)时NK细胞活性与阴性对照组间比较，差异有统计学意义(P＜0.05) 。

3 讨论

本研究中，试验组小鼠体重增长值均高于对照组，尤其低剂量组，表明小球藻可增进小鼠体重增长。有研究报道，小球藻能使小牛体重日增长率明显高于对照组[8]。

Konishli F[9]发现，小球藻提取物(CVE)能使免疫低下小鼠脾脏的粒细胞-巨噬细胞生成单位数(CFU-GM)迅速大量增加。本研究中试验组的脾脏体重比值高于对照组，表明小鼠受免疫物刺激后，试验组脾脏中免疫反应比对照组活跃。今后应进一步研究脾脏中的组织学变化。

有研究表明，小球藻能增强免疫低下动物的细胞免疫功能[10, 11]，能增强携瘤小鼠巨噬细胞的吞噬功能[12, 13]，提高其抗肿瘤、抗感染的能力。本次研究表明，小球藻能增强健康小鼠细胞免疫能力、单核-巨噬细胞的吞噬作用及提高NK细胞的活性，因此，破壁蛋白核小球藻对健康小鼠具有免疫调节的作用，其作为保健品的应用前景可观。

参考文献
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