中国公共卫生  2008, Vol. 24 Issue (7): 800-801   PDF    
邻苯二甲醛和强化戊二醛杀灭细菌芽孢效果比较
胡国庆1, 徐燕2, 潘协商1, 陆烨1     
1. 浙江省疾病预防控制中心, 杭州 310051;
2. 江苏省疾病预防控制中心
摘要: 目的 比较邻苯二甲醛消毒剂与强化戊二醛消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭效果。 方法 采用载体定量杀菌试验对两者的杀灭效果和连续使用稳定性进行比较。 结果 0.53%邻苯二甲醛消毒液作用3 h对不锈钢片上枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值为3.21,作用10 h杀灭对数值>6.10;而2.18%强化戊二醛消毒液作用3 h杀灭对数值>6.10;0.53%邻苯二甲醛消毒液连续使用7、14 d后,仍保持对芽孢有良好的杀灭能力。 结论 邻苯二甲醛消毒剂杀灭细菌芽孢的效果不如强化戊二醛,但可具备用于内镜高水平消毒效果和使用稳定性。
关键词邻苯二甲醛     戊二醛     枯草杆菌黑色变种芽孢    
Comparison the germicidal efficacy between ortho-phthalaldehyde and potentiated glutaraldehyde in disinfection of spores
HU Guo-qing, XU Yan, PAN Xie-shang, et al     
Zhejiang Provincial Center for Diease Prevention and Control, Hangzhou 310051, China
Abstract: Objective To compare the germicidal efficacy between ortho-phthalaldehyde and potent iated glutaraldehyde in disinfection of spores of Bacillus subtilis var.niger. Methods Carrier quantitative disinfection test was used to make comparison of the two disinfectants in their gerimicidal efficacy and constinuous stability. Results The logarithm value of disinfection spores of Bacillus subtilis var.niger exposed to 0.53% ortho-phthalaldehyde for 3 h was 3.21 and that of 10 h was higher than 6.10.The same disinfection logarithm value of 2.18% potentiated glutaraldehyde for 3 h was higher than 6.10.In continuous stability test,the germicidal efficacy of 0.53% or tho-phthalaldehyde in disinfection of the spores was effective after 7 and 14 days of contionous use. Conclusion At the same concentration,the sporicidal efficacy of ortho-phthalaldehyde was weaker than that of potentiated glutaraldehyde,but or tho-phthalaldehyde still is of high germicidal efficacy and comtinuous stabinty for endoscopes.
Key words: or tho-phthalaldehyde     potentiated glutaraldehyde     spore of Bacillus subtilis var.niger    

邻苯二甲醛(OPA)通过美国食品与药品安全管理局(FDA)认证高水平消毒剂后,在国外已用于内镜的消毒[1],国内近年来对其十分关注[2, 3]。为了解邻苯二甲醛消毒剂杀灭芽孢的能力,我们选择了进口邻苯二甲醛消毒剂和国产强化戊二醛消毒剂进行比较,采用载体定量杀菌试验,对其实验室杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢效果和使用稳定性进行了观察。现将结果报告如下。

1 材料与方法 1.1 材料

进口邻苯二甲醛消毒剂(美国强生公司),邻苯二甲醛标示含量为0.50%~0.60%;强化戊二醛消毒剂为医院内镜消毒使用产品,戊二醛标示含量2.0%~2.2%,

1.2 理化指标检测

消毒剂有效成份含量测定参照《消毒技术规范》[4],邻苯二甲醛消毒剂采用高效液相色谱法测定产品中正-邻苯二甲醛的含量;强化戊二醛消毒剂采用硫酸滴定液测定产品中戊二醛含量;消毒剂pH值测定采用PHS-25精密数显酸度计。

1.3 载体制备

取枯草杆菌黑色变种(ATCC 9372) 芽孢悬液,用胰酪胨大豆(TSB)营养肉汤配制染菌用菌悬液。取试验菌悬液0.02 ml滴染于无菌不锈钢圆片上(直径15 mm,厚0.5 mm),置37 ℃温箱烘干,制成菌片备用。

1.4 中和剂鉴定试验

按《消毒技术规范》规定设计6组,以枯草杆菌黑色变种芽孢为试验菌,采用载体定量杀菌试验程度进行[5]

1.5 载体浸泡定量杀菌试验

将含每个菌片5 ml消毒液(阳性对照为磷酸盐缓冲液)的无菌平皿置于(20±1) ℃恒温水浴中,加入菌片作用至预定时间,取出菌片,放入含5 ml中和剂的试管内,用电动混合器震荡40 s,洗脱钢片上的菌,中和作用10 min;取洗脱液作活菌计数,计算杀灭对数值。所有试验重复3次。

1.6 连续使用稳定性试验

分别取双份2 000 ml的邻苯二甲醛、强化戊二醛消毒剂原液分别盛装于2个无菌带盖搪瓷盘中,各放入清洁的医用镊子、剪刀、止血钳等医疗器械达到满载要求,每日将器械取出,用清水洗涤,沥干,再浸泡到消毒液中。按每个载体10 ml取浸泡当日、7,14 d搪瓷盘中的消毒液至无菌平皿,置于(20±1) ℃恒温水浴5 min,将试验菌片浸没其中进行载体定量杀菌试验。

2 结果 2.1 理化指标测定

邻苯二甲醛消毒剂为单方制剂,经测定含正-邻苯二甲醛0.53%,pH值为7.45;强化戊二醛消毒剂是戊二醛和阳离子表面活性剂的复方制剂,经测定含戊二醛2.18%,活化前pH值2.55,活化后pH值7.74。

2.2 中和剂鉴定试验

用含3 g/L卵磷脂、3.0%吐温-80、10 g/L甘氨酸的磷酸盐缓冲液(PBS)作为中和剂,可有效中和邻苯二甲醛消毒剂原液和强化戊二醛消毒剂原液对试验菌残留作用,且中和剂溶液及其中和产物对枯草杆菌黑色变种芽孢的生长无明显影响。

2.3 对细菌芽胞的杀灭效果

邻苯二甲醛消毒剂原液作用3 h,对不锈钢片上枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值为3.21,作用10 h杀灭对数值>6.10;强化戊二醛消毒剂原液作用0.5 h,对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值达到3.43,作用3 h的杀灭对数值>6.10(表 1) 。

表 1 不同时间2种消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭效果比较

2.4 连续使用稳定性试验

邻苯二甲醛消毒剂原液连续浸泡医疗器械7、14 d后,作用3 h,对不锈钢片上枯草杆菌黑色变种芽孢的平均杀灭对数值均>3.00;强化戊二醛消毒剂原液连续浸泡医疗器械7、14 d后,作用3 h,对芽孢的杀灭对数值均>6.00(表 2) 。

表 2 2种消毒剂不同作用时间的平均杀灭对数值

3 讨论

本次试验结果表明,0.53%邻苯二甲醛消毒剂原液作用3 h可对芽孢达到消毒效果,但与强化戊二醛的杀芽孢效果有一定差距,与黄育红报道基本一致[6]。本次邻苯二甲醛消毒剂杀灭芽孢的结果明显不如许能锋等报道[3]的国内邻苯二甲醛消毒剂,可能与进口为单方制剂,而国内邻苯二甲醛消毒剂多与醇类、季铵盐类及乳化剂等复配,且pH值在8.0以上有关;许能锋等已证实,含表面活性剂的碱性邻苯二甲醛杀芽孢效果最好[3]

由于戊二醛在内镜消毒中逐渐暴露诸多问题,且使用前要活化、使用浓度相对高等缺陷,国内外学者均提出用邻苯二甲醛消毒剂替代戊二醛用于内镜消毒[2, 7]。本次研究证明,邻苯二甲醛消毒剂具备高水平消毒效果,且使用稳定性好,可连续使用14 d。

实验中发现邻苯二甲醛消毒液接触皮肤、衣物后会有灰色反应不易洗去;其产品说明中也标注“消毒后务必正确冲洗干净;可能引起过敏反应;与消毒液接触可能使裸露的皮肤或衣服染色;应避免与眼睛、皮肤或衣服接触”,使用中仍应引起注意。

参考文献
[1] Rutala WA, Weber DJ. New disinfection and sterilization methods[J]. Emerging Infectious Diseases, 2001, 7(2) : 348. DOI:10.3201/eid0702.010241
[2] 朱会英, 阮晓红. 邻苯二甲醛消毒剂对内窥镜消毒效果的试验研究[J]. 中国消毒学杂志, 2006, 23(2) : 171.
[3] 许能锋, 林立旺, 徐文体, 等. 邻苯二甲醛杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢效果及其影响因素的研究[J]. 中国消毒学杂志, 2005, 22(2) : 125.
[4] 卫生部卫生法制与监督司.消毒技术规范[S].北京:中华人民共和国卫生部,2002:114-118.
[5] 卫生部卫生法制与监督司.消毒技术规范[S].北京:中华人民共和国卫生部,2002:21-22.
[6] 黄育红, 陈路瑶, 徐文体, 等. 邻苯二甲醛与戊二醛杀菌效果的比较[J]. 中国消毒学杂志, 2005, 22(4) : 416.
[7] Gregory AW, Bruce phD, Jonathon D, et al. he mycobactericidal efficacy of orthophthalaldehyde and the comporative resistances of mycobacterium bovis.mycobactera terrae and mycobacterium chelonae[J]. Infect Control and Hospital Epidemic, 1999, 20 : 324. DOI:10.1086/iche.1999.20.issue-5