近年研究认为，高同型半胱氨酸血症(hyperhomecysteinemia，HHcy)是动脉硬化的一个独立危险因子。体内同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)来源于食物中的蛋氨酸，过量摄入蛋氨酸可诱发高同型半胱氨酸血症。本研究通过大鼠灌胃给予蛋氨酸复制高同型半胱氨酸血症动物模型，检测动脉粥样硬化的相关指标，同时对硫酸软骨素进行了药效学观察。现将结果报告如下。

1 材料与方法 1.1 实验材料

Wistar雌性大鼠，体重120～150 g(沈阳医学院实验动物中心)，SCXK(辽)2003-0016。实验室饲养1周后进行实验。繁殖鼠全价颗粒饲料(沈阳市于洪区前民饲料厂)，蛋氨酸粉剂(吉林农业大学)；硫酸软骨素注射液(西安博森生物制药有限责任公司)；Hcy(ELISA法)检测试剂盘(北京中山生物技术工程公司)；丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 实验方法

Wistar雌性大鼠21只，随机分为3组，模型对照组7只，每天灌胃给予蛋氨酸0.75g/(kg·bw)2次；硫酸软骨素干预组6只，每天灌胃给予蛋氨酸0.75g/(kg·hw)2次，同时灌胃给予硫酸软骨素7.5ml/(kg·bw)；空白对照组8只，每天灌胃给予等容积生理盐水，连续给药10周，于末次给药后4 h处死动物取血及胸主动脉。在平左心耳下缘水平取胸主动脉冰冻切片，光镜下(10×10)照相，测量动脉平滑肌相对厚度(mm)，除以体重计算出每100 g体重动脉平滑肌相对厚度指数。检测血浆Hcy、MDA含量和GSH-Px、SOD活性，按说明书进行。组间比较用t检验。

2 结果 2.1 大鼠高蛋氨酸负荷10周各组血浆Hcy浓度

空白对照组血浆Hcy浓度为(6.98±2.09)μmol/L，模型对照组血浆Hcy浓度为(115.04±10.97)μmol/L，模型对照组明显高于空白对照组(t=27.452，P<0.01);硫酸软骨素干预组血浆Hcy浓度为(119.17±11.06)μmol/L，高于空白对照组(P<0.01)；与模型对照组比较，差异无统计学意义(t=0.047,P>0.05)。

2.2 大鼠高蛋氨酸负荷10周各组动脉平滑肌厚度指数

空白对照组为(7．84±0.75)mm/(100g·bw),模型对照组为(10.83±1.02)mm/(100g·bw)，2组比较差异有统计学意义(t=6.519,P<0.01);硫酸软骨素干预组为(9.23±0.91)mm/(100g·bw)，与模型对照组比较，差异有统计学意义(t=2.954,P<0.05)，与空白对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3 大鼠高蛋氨酸负荷10周各组血浆MDA浓度和SOD、GSH-Px活性(表 1)

结果可见，模型对照组血浆MDA含量升高，与空白对照组比较，差异有统计学意义(t=15.604,P<0.01)；GSH-Px、SOD活性降低，与空白对照组比较，差异有统计学意义(t=17.448,P<0.01)；硫酸软骨素干预组MDA降低，与模型对照组比较，差异有统计学意义(t=1.932,P<0.05)；SOD活性升高，与模型对照组比较，差异有统计学意义(t=5.4,P<0.01)；GSH-Px与模型对照组比较，差异无统计学意义(t=1.594,P>0.05)。

3 讨论

实验研究证实，HHcy是诱发动脉硬化的一个独立危险因子^[1]。本实验结果表明，大鼠每天灌胃给予蛋氨酸1.5g/(kg·bw)，连续10周可诱发HHcy，并引起动脉平滑肌增生，Hcy可抑制GSH-Px、SOD活性，削弱了氧化保护机制，使氧化损害突现，引起链式脂质过氧化反应。另外，Hcy在体内可自身氧化成羟自由基、过氧化氢等氧自由基，与相关文献一致^{[2, 3]}。过氧化是血管内皮损伤的重要原因之一^{[4, 5]}，内皮功能紊乱可通过多种途径引发血管平滑肌细胞增殖这一动脉粥样硬化的中心环节^[6]。目前尚无一种检测血管平滑肌细胞增殖的量化指标。为比较各组大鼠动脉平滑肌增生程度，本实验应用周龄相同、同一性别，并通过体重校正的同一部位的动脉平滑肌相对厚度指数作为观测指标。是否可作为检测平滑肌增生程度的可靠指标有待进一步研究。

硫酸软骨素具有清除体内脂质、脂蛋白和胆固醇的作用。实验证实，其具有抑制HHcy所致的平滑肌增生作用，作用机制可能与提高SOD活性而降低体内MDA含量的抗过氧化作用相关。