绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis，PMOP)是由雌激素缺乏引起，是以进行性骨丢失、骨小梁退行性变、骨质脆性增加和易发生骨折为特征的全身性疾病，是原发性骨质疏松中最常见的一种^[1]。本研究以去卵巢大鼠为实验对象，观察雌激素对去卵巢大鼠生长发育、血液生化指标、骨代谢及子宫的影响，为雌激素应用于绝经后骨质疏松的治疗提供科学依据。

SPF级SD种雌性健康大白鼠30只(第一军医大学实验动物中心)，体重(275.0±14.7) g；颗粒饲料(第一军医大学实验动物中心)喂饲；动物实验室为SPF级，室温(22±2) ℃，湿度60%～80%。

参照AIN93饲料配方配制成半成品饲料，用适当的物质替换来源于大豆成分饲料，以避免大豆异黄酮等植物雌激素对实验结果的干扰。基础饲料配方如下：酪蛋白23%，DL-蛋氨酸0.3%，玉米淀粉32%，蔗糖30%，纤维5%，玉米油5%，混合矿物盐3.5%,混合维生素1%，二酒石酸胆碱0.2%^[2]。按每100g体重大鼠每日摄入8g饲料计，雌激素组每公斤基础饲料中加入β-雌二醇2.5mg。

30只大鼠在实验室条件下检疫1周后，根据体重随机分成3组：雌激素组、去卵巢对照组和假手术组。所有大鼠均腹腔注射戊巴比妥钠溶液麻醉30mg/(kg·bw)，假手术组为单纯开腹组，其他2组在无菌条件下切除双侧卵巢，分别是去卵巢对照组和雌激素组，每组10只动物，分笼饲养。假手术组和去卵巢对照组每日给予基础饲料，雌激素组每日给予含β-雌二醇(美国Alfa Aesar公司)饲料。保证大鼠有充足饮水，连续7周。

(1) 体重和饲料摄入量：每周称量1次体重，记录2次食物摄入量。(2) 股骨重量测定：实验结束动物处死后剥离右侧股骨，于105℃烤箱中烤至恒重，称量骨干重。(3) 股骨骨密度测定：用双能X光骨密度仪测量左侧股骨中点及远心端的骨密度。(4) 骨钙含量测定：实验结束后处死动物剥离右侧股骨，于105℃烤箱中烤至恒重，称量骨干重，移入坩埚内，置电炉上炭化至无烟为止。移入马弗炉，升温至500℃，恒温30min，再升温至700℃，恒温60min。样品灰化后，加入20%的盐酸完全溶解，移入50ml容量瓶中，用去离子水定容至刻度采用原子吸收法测定，仪器为SPECTRAA 220Z原子吸收光谱仪(澳大利亚VARIAN公司)。(5) 生化指标：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、白蛋白/球蛋白、总胆固醇、甘油三酯、肌酐和尿素氮。上述指标均用日立7600全自动生化仪检测。(6) 子宫病理学检查：动物处死后取出子宫，置10%甲醛中固定，常规制片，显微镜下观察。

采用SPSS 10.0软件进行方差分析。

实验期间，各组大鼠存活情况良好，术后伤口愈合情况较好，无感染。实验结束时，雌激素组和假手术组大鼠体重明显低于去卵巢对照组(P＜0.01) 。

表 1

表 1 雌激素对大鼠体重的影响(x ± s)

表 1 雌激素对大鼠体重的影响(x ± s)

雌激素组和假手术组大鼠体重增重和食物利用率明显低于去卵巢对照组(P＜0.01) 。摄食量各组间差异无统计学意义(P＞0.05) 。

表 2

表 2 雌激素对大鼠体重增重、摄食量和食物利用率的影响(x ± s)

表 2 雌激素对大鼠体重增重、摄食量和食物利用率的影响(x ± s)

雌激素组碱性磷酸酶(AKP)值低于去卵巢对照组，但差异无统计学意义(P＞0.05) ；其他血清生化指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、白蛋白/球蛋白(A/G)、肌酐和尿素氮，各组之间差异无统计学意义(P＞0.05) 。

假手术组大鼠股骨中点和远心点骨密度显著高于去卵巢对照组，表示造成大鼠骨密度低下模型；雌激素组大鼠股骨中点和远心点骨密度均显著高于去卵巢对照组(P＜0.05) ；假手术组和雌激素组骨钙含量均高于去卵巢对照组，但差异无统计学意义(P＞0.05) 。

表 3

表 3 雌激素对大鼠股骨重量、骨密度和骨钙含量的影响(x ± s)

表 3 雌激素对大鼠股骨重量、骨密度和骨钙含量的影响(x ± s)

去卵巢对照组大鼠子宫可见萎缩改变，肉眼见体积缩小，镜下子宫内膜上皮由立方变扁平，子宫腺体减少，问质透明变性，子宫肌层变薄。假手术组和雌激素组大鼠子宫未见明显萎缩，与去卵巢对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05) 。

目前激素补充治疗(Hormone replacement therapy,HRT)是临床防治绝经后骨质疏松的首选方案，但长期大剂量使用雌激素引发的乳腺癌、子宫内膜癌及子宫出血等副作用难以克服。本研究可见，雌激素组大鼠体重从实验开始就呈明显下降趋势，且一直保持到实验结束。本研究还发现，雌激素对大鼠子宫有明显增生作用，与文献报道一致^{[3, 4]}。由此可见，在动物实验中，雌激素可以显著降低受试动物的体重，所需剂量小、作用明显，且对子宫具有显著刺激作用，使用不当易引起副作用。本研究可见，各组动物摄食量相近，但假手术组和雌激素组食物利用率明显低于去卵巢对照组，因此，各组动物体重不同，与摄食量无关，原因是由于体内激素水平不同所致。

本研究显示，雌激素能明显有效地减少骨量丢失，增强骨密度；对骨钙含量也有增加趋势。表明雌激素有利于维持骨吸收和骨形成的动态平衡，对预防和治疗绝经后骨质疏松具有明确的作用，与文献报道相符^[5]。血清碱性磷酸酶(AKP)是反映骨形成的生化指标，一般认为绝经后血清碱性磷酸酶升高是由于骨吸收的亢进而出现的代偿性骨形成增加所致^[6]。本研究雌激素组血清碱性磷酸酶值低于去卵巢对照组，但差异无统计学意义，表明雌激素具有抑制骨吸收趋势。