孕妇孕期使用乙肝免疫球蛋白(Hepatitis B immunoglobulin，HBIG)是阻断乙型肝炎病毒(Hepatitis Bvirus，HBV)宫内传播的主要方法之一。有研究认为,HBIG能降低孕妇体内HBV病毒载量，从而达到预防HBV宫内传播的效果^{[1, 2]}。然而其保护作用及预防机制都存有争议^[3]。本研究对HBIG的保护作用及其对孕妇体内HBV病毒载量、HBsAg滴度的影响机制进行探讨，为HBIG的应用提供进一步证据。

选取2002年10月～2004年10月在陕西省妇幼保健院待产、HBsAg阳性孕妇及其所产新生儿210名为干预组，孕妇平均年龄(27.2±2.3)岁；选取1993～1997年HBsAg阳性孕妇402例及其所产新生儿为对照组，孕妇平均年龄(24.4±3.6)岁。干预组于孕晚期使用HBIG，每月1次(200U/次)，使用3～5次；具体剂量依据检测HBeAg状态、孕妇主观要求而定；对照组孕妇孕期不采取任何干预措施。

产前采集孕妇肘静脉血；采集新生儿出生24h内，未接受主、被动联合免疫前的股静脉血，1500r/min离心分离血清，-20℃保存备用。

孕妇血清HBsAg、HBeAg采用酶联免疫试剂盒(ELISA)检测(上海科华生物工程股份有限公司)，采用倍比稀释方法检测孕妇HBsAg滴度，然后用ELISA方法进行检测。采用PCR方法检测孕妇血清HBV DNA，引物、PCR反应条件见参考文献[4]；PCR阳性标本再行荧光定量PCR检测(上海轩吴科技发展有限公司)。HBVDNA滴度>10³拷贝/ml判为阳性，否则判为阴性;判为阳性者进一步量化。

干预组孕妇所产婴儿股静脉血HBsAg检测采用HBsAg诊断试剂(美国雅培公司)，检测程序及结果判读由Abbott System自动完成，以信噪比(Signal/Noiseratio，S/N)≥5为宫内感染诊断标准。对照组宫内感染病例的诊断标准以Western杂交方法检测新生儿外周血HBsAg(美国雅培公司)。

采用SPSS 10.0软件进行分析。

干预组210例孕妇中，HBeAg阳性47例，HBVDNA阳性40例；10例新生儿发生宫内感染。HBeAg阳性孕妇平均使用HBIG(3.85±1.25)次，HBeAg阴性孕妇平均注射(3.13±0.83)次。对照组HBsAg阳性孕妇402例中，HBeAg阳性133例；15例新生儿发生宫内感染。对照组和干预组孕妇HBeAg状态经χ²检验差异有统计学意义(χ²=7.98,P＜0.01)。对孕妇HBeAg状态进行分层分析，分层后2组宫内感染率差异均无统计学意义，合并OR=1.06，说明孕期使用HBIG的保护作用有限。

表 1

表 1 HBIG干预组与历史对照组宫内感染率比较

表 1 HBIG干预组与历史对照组宫内感染率比较

受血清标本量影响，本次共检测干预组孕妇血清HBsAg滴度179例，其中孕妇HBeAg状态、孕期HBIG注射剂量、宫内感染率等方面经统计学检验，与其余31例比较，差异均无统计学意义。46例孕妇血清HBsAg滴度＜1:2000；26例为1:4000，51例为1:8000，26例为1:16000，18例为1:32000，8例为1:64000，2例孕妇滴度为l：1280000，2例孕妇滴度为1:2560000。HBIG注射剂量与HBsAg滴度相关系数：r=0.012(P=0.866)。

210例HBsAg阳性孕妇经过PCR检测，HBVDNA阳性40例；定量分析显示6例孕妇HBVDNA拷贝数为10⁹个，有1例为10⁸个，有10例为10⁷个，有14例为10⁶个，有2例为10⁴个，10³个0例，＜10³个3例。HBIG使用剂量与孕妇HBVDNA拷贝数相关系数r=0.039(P=0.836)。

孕期使用HBIG是目前预防HBV宫内感染的常用措施，其主要依据是HBIG能中和病毒，降低孕妇体内的病毒载量，从而达到预防目的。然而HBIG的作用机制、预防效果都存有争议。高结坤等对HBsAg阳性孕妇使用HBIG，发现孕妇使用HBIG后新生儿血清HBsAg和HBVDNA检出率明显低于对照组，新生儿抗HBs阳性率显著高于对照组，其结论为孕期使用HBIG可预防宫内感染^[4]。然而，Yuan等对HBsAg母亲及其新生儿进行长期随访，并持续监测孩子的外周血乙肝标志物，并没有发现HBIG保护作用^[3]。本次研究未发现HBV DNA拷贝数、HBsAg滴度与孕期使用HBIG剂量的相关性，也未发现孕期使用HBIG对宫内传播具有保护作用。尽管没有收集到使用HBIG前HBVDNA拷贝数、HBsAg滴度等基线资料，但如此低的相关系数(接近于0)，说明孕期使用HBIG对孕妇体内的病毒载量无影响。

预防HBV宫内感染，干预措施必须满足以下条件：(1)干预时机一定要在宫内传播发生时或之前，而目前关于宫内感染的时机还不确定^{[5, 6]}。(2)HBIG对外周血HBV中和达到10⁰％，而目前孕期使用剂量还远达不到^[6]。本次研究发现，HBIG干预后宫内感染发生率为4.7％，与对照组比较差异无统计学意义，提示孕期使用HBIG不具保护作用。本次调查结果表明，孕期使用HBIG对HBV宫内传播保护作用有限；孕期使用HBIG对孕妇HBsAg滴度、HBVDNA含量无影响。