微量元素硒在医学领域有着十分重要的生物学意义，并与人体健康有密切关系，是人体必需的微量元素^[1]。贯众是中药常用品种，其根茎含有多种药用成份，具有抑菌、抗病毒、驱虫，收缩子宫平滑肌，止血，治热毒或食毒，治流脑和乙脑等温热病、抗肿瘤、抗早孕、堕胎、雌激素样作用及抗白血病等作用^[1]。本文用原子荧光光谱法^{[2, 3]}(AFS)对蹄盖蕨科植物，多龄蹄盖蕨(Lunathyrium acrostichoides ching)贯众中硒的含量进行了测定分析，旨在探讨硒与贯众药性的关系，为贯众的开发利用提供参考依据。

1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 药材

贯众采集于吉林省桦甸县(经吉林大学药学院王广树教授鉴定为蹄盖蕨科植物，多齿蹄盖蕨。根茎猴腿蹄盖蕨)。

1.1.2 仪器

AFS-230E原子荧光光度计(北京海光仪器公司)。

1.1.3 试剂

硝酸，30%过氧化氢，盐酸(均为优级醇)。20%硼氢化钾溶液，10%铁氰化钾溶液，1mg/ml硒标准储备液，1.00m/ml硒标准使用(由储备液稀释而得)。

1.2 仪器工作条件

光电倍增管负高压：300V；空心阴极灯电流：80mA；原子化器温度：800℃：原子化器高度：8mm；载气流速：400ml/min;屏蔽气流速：1000ml/min；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；延迟时间：1.0s；读数时间：10s；进样体积：0.5ml。

1.3 标准曲线的绘制

将0.00，0.50，1.00，2.00，4.00，8.00ml硒标准使用液置于100ml容量瓶中，加10%铁氰化钾溶液1ml，用10%盐酸溶液定容到刻度，此标准系列每ml含硒0.00，5.0，10.0，20.0，40.0，80.0ng。按所述仪器条件测定，绘制浓度(C)-荧光强度(IF)标准曲线，该标准曲线的线性回归方程为Y(If)=62.899×C+17.718，相关系数(r)=0.9991。

1.4 样品处理

准确称取约0.5g均匀的试样于聚四氟乙烯罐中，加入3ml硝酸，放置过夜，加2ml过氧化氢，放入外套中，置于烘箱中，于125℃加热消解4h。自然冷却后，取出溶样杯，定容至25ml于电热板上100℃加热至棕色烟冒尽。再加入2.0ml浓盐酸定容至刻度。若样品中硒的含量较少，可定容分取，直接加热赶酸测定硒的含量。

2 结果 2.1 消解试剂的选择

本文试验了硝酸，硝酸-硫酸(V/V，4：1)，硝酸-过氧化氢(V/V，3：2)对消解效果的影响。试验证明，使用硝酸不完全，消解液有混浊。硝酸-硫酸由于残余的硫酸和二氧化硫难以除去，干扰以后的测定。而硝酸-过氧化氢不仅消化时间短，效果好，而且带入的干扰也较少。本文选用硝酸-过氧化氢体系作为消解剂。

2.2 载流浓度对测定的影响

本文试验了载流浓度对硒测定信号的影响，结查表明，随着载流浓度的增加，硒的荧光信号呈上升趋势，当盐酸体积分数为5%时荧光强度达最大值，因此，载流浓度选择5%盐酸。

2.3 硼氢化钾浓度对测定影响

硒的测定与砷类似，对硼氢化钾浓度的要求较高，当硼氢化钾的浓度低于5g/L，时，荧光信号很低，当硼氢化钾的浓度>5g/L时，信号渐渐升高，至20g/L时荧光信号开始下降，实验中选择氢化钾的浓度为15g/L即可满足测定要求。

2.4 铁氧化钾浓度对测定的影响

铜干扰硒的测定，尤其是当铜的含量较高时，加入适当的铁氰化钾可掩蔽铜，其浓度对测定的影响不大，由于贯众中的铜含量不高，因此实验加入1ml 10%的铁氰化钾即可满足测定要求。

2.5 共存离子的干扰及消除

按照试验方法，控制相对误差±5%，固定硒浓度10ng/L，分别加入其他离子进行干扰试验。结果表明，样液中的碱金属不会产生干扰。可形成氢化物的汞、砷、铅、锡也不会产生干扰。当加入1ml 10%铁氰化钾溶液测定10ng/L，分别加入其他离子进行干扰试验。结果表明，样液中的碱金属不会产生干扰。可形成氢化物的汞、砷、铅，锡也不会产生干扰。当加入1ml 10%铁氰化钾溶液测定10ng/L硒时，允许下列元素存在(mg/L):K、Ca、Mg、Al、Cu(100),Fe(50),Co、Ni(10),As、Hg(0.5)。样品中所含量均小于上述所列。因此，样品在进行消解后可不考虑其他元素的干扰。

2.6 方法的线性范围与检出限

测定空白溶液11次，得出仪器的最低检出限为0.2g/L。本法的线性范围0～100mg/L,按取样量1.0g，本次贯众中硒的最低检出限为4.0×10-3mg/kg。

2.7 精密度试验

称取1.0g样品按上述实验方法消化处理重复测定5次，测量值为0.789，0.790，0.825，0.768，0.810mg/kg,平均值为0.796g/kg，其相对标准偏差(RSD)为2.2%。

2.8 回收率试验

采用加标法做回收率实验，结果表明，硒的平均回收率(n=5)为100.8%～115.3%，证明了方法的可行性。

3 结论

通过对消解试剂、干扰因素的选择和讨论，建立了原子荧光法测定贯众中硒含量的检测方法，本方法操作简单，结果稳定可靠。从实验结果可见，作为入药部位的贯众根中含有较多的硒，而不作为入药部位的贯众须中含硒较少，由此还不能得出贯众的药性跟其硒含量完全有关，但也不排除这种可能。