中国公共卫生  2008, Vol. 24 Issue (1): 123-124   PDF    
引用本文
石卫武, 周美英, 干灵红, 李伯利. HBeAg阴性的HBV感染产妇与母婴传播关系[J]. 中国公共卫生, 2008, 24(1): 123-124.
SHI Wei-wu, ZHOU Mei-ying, GAN Ling-hong, et al. Relationship between HBeAg negative HBV infectious pregnant women and their mother-to-infant infection[J]. Chinese Journal of Public Health, 2008, 24(1): 123-124.
HBeAg阴性的HBV感染产妇与母婴传播关系
石卫武, 周美英, 干灵红, 李伯利     
浙江省临海市台州医院中心实验室, 317000
收稿日期: 2007-06-23
作者简介: 石卫武(1967-), 男, 浙江人, 主管医师, 硕士, 主要从事卫生检验工作。
摘要： 目的 探讨HBeAg检测阴性的乙型肝炎病毒(HBV)感染产妇及其存在的前C区1896位终止变异株与母婴传播的关系。 方法 采用实时荧光定量PCR方法测定产妇血中HBV-DNA载量, 对HBV-DNA阳性者及其感染的婴儿, 利用错配PCR限制性片段长度多态性分析, 测定HBV前C区1896位终止变异。 结果 HBeAg阴性产妇HBV的母婴传播率为5.75%, 而且母婴传播概率与产妇血中HBV载量密切相关, 高载量组(≥106拷贝/ml)的传播率为34.7%, 明显高于低载量组(104~106拷贝/ml)的17.1%和低于检测值组的0.46%(P < 0.01), 进一步对存在HBV前C区终止变异的产妇及其所感染的新生儿的HBV基因分析, 发现5例野生株占优势的HBV感染产妇, 所感染的婴儿均为野生株, 4例变异株占优势的产妇, 其感染的婴儿2例为变异株感染, 2例为野生株感染。 结论 HBeAg阴性的HBV感染产妇存在母婴传播的危险性与其体内的HBV-DNA载量密切相关, 对于存在前C区终止变异的HBV感染产妇, 在母婴传播过程中, 野生株比变异株更容易感染胎儿。
关键词： HBeAg阴性的HBV感染产妇     母婴传播     前C区1896位终止变异     实时荧光定量PCR    
Relationship between HBeAg negative HBV infectious pregnant women and their mother-to-infant infection
SHI Wei-wu, ZHOU Mei-ying, GAN Ling-hong, et al     
Central Laboratary of Taizhou Hospital Linhai 317000, China
Abstract: Objective To evaluate HBeAg negative HBV infectious pregnant women with or without pre-C 1896 "stop" mutation and their mother to infant infection. Methods HBV-DNA load in blood of pregnant women was detected by real time fluorescence quantitative PCR.HBV pre-C1896 "stop" mutation of the HBV positive mother and their HBV infected infants was analyzed by mismatched PCR restricted fragment length polymorphous assay. Results The rate of HBV mother to infant infection with HBeGg negative pregnant women was 5.57%.The higher infection rate was, the higher HBV was loaded in blood of pregnant women.The infection rate of HBV high load group (≥106 copies/ml) was 34.7%, which was higher than that of low load group (104~106 copies/ml, 17.1%)(P < 0.01).HBV gene of HBV infected pregnant women with "stop" mutate and their newly born babies was analyzed, and found that all of the five HBV infected infants delivered by wild strain advantage mothers were tested as wild strain HBV carriers.Among four mutant strain advantage HBV infected mothers, two of their infants were found to have mutant strain HBV infection, and the other two as wild strain infection. Conclusion The risk of mother to infant HBV infection with HBeAg negative mother is related to mother&s HBV load in the blood.For coinfected HBV pregnant women with "stop" mutant strain and wild strain, mother to infant infection of wild stain HBV occurred more easily than that of mutant strain.
Key words: HBeAg negative HBV infectious pregnant women     mother to infant infection     pre C1896 "stop" mutation     real time fluorescence quantitative PCR    

乙型肝炎病毒(HBV)可经胎盘传播至胎儿，造成胎儿宫内感染。以往研究认为，HBV母婴传播与孕妇感染HBV的不同状况密切相关[1]。由于存在HBV前C区1896位终止变异的乙肝患者，其HBeAg也往往阴性，本文对HBeAg检测阴性的HBV感染产妇与母婴传播的关系进行研究，并对感染HBV前C区1896位变异株的孕妇所感染的新生儿的HBV变异株进行分析。

1 对象与方法 1.1 对象

在浙江省台州医院2005年3月～11月入院分娩的HBsAg阳性产妇460例，其中HBeAg阴性278例。选取278例HBeAg阴性产妇及其新生儿作为研究对象。

1.2 标本采集

产妇入院后取静脉血3 ml，新生儿断脐后，取脐静脉血3 ml，分离血清-76℃保存、备用。

1.3 HBV-DNA载量测定

采用实时荧光定量PCR法测定血清中HBV-DNA。DNA载量测定仪器(台湾罗氏公司)、试剂(上海申友生物工程有限公司)、操作均按试剂盒说明书。

1.4 HBV前C区1896位变异测定

对HBV-DNA测定阳性的血清，进一步采用错配PCR限制性片段长度多态性(RFLP)分析HBV前C区1896位变异情况。利用错配PCR引物扩增HBV前C/C区部分片段，无水乙醇沉淀PCR产物。加入17 l ddH2O溶解沉淀，2 l10×酶切Buffer，0.2 l 100×白蛋白，1 l(12 U)限制性内切酶Bsu36I，总体积20 l，置37℃水溶酶切过夜后，经3%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭(EB)染色，在紫外灯下观察结果，PCR产物长度为102bp，酶切后，nt1896位变异株产生82bp DNA条带，102bp为野生株条带；102和82bp共存都为野生株和变异株混合感染，并依据出现82或102bp条带优势者分为变异株优势或野生株优势变异。

1.5 统计分析

采用SPSS 10.0软件进行分析，组间比较采用t检验。

2 结果 2.1 HBeAg阴性产妇HBV母婴传播率

检测278例HBeAg阴性产妇的新生儿脐静脉血中乙肝病毒标记，显示HBeAg阳性14例，其中HBV-DNA阳性13例，表明HBeAg阴性产妇，其HBV的母婴传播率为5.04%。

2.2 HBV母婴传播与产妇静脉血中病毒载量的关系(表 1)

结果表明，产妇血中病毒载量高低与HBV母婴传播密切相关(P<0.01)。

表 1 278例HBeAg阴性乙肝感染产妇母婴传播情况

2.3 HBV前C区1896位终止变异与母婴传播的关系

对64例HBV-DNA阳性母血进一步测定HBV前C区1896位变异，发现有35例存在终止变异，新生儿感染率为25.9%，无变异组新生儿感染率为20.6%，2组HBV母婴传播率差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.4 HBV前C区1896位终止变异与新生儿感染毒株关系

35例存在HBV前C区1896位终止变异产妇，按变异率的高低分为变异株优势组14例；野生株优势组21例。进一步对存在HBV前C区1896位终止变异产妇传染的9例新生儿分析其HBV前C区1896位终止变异情况，其中变异株优势组新生儿感染野生株2例，野生株优势组新生儿感染野生株5例。

3 讨论

以往研究表明，HBV母婴传播与孕妇感染HBV的不同状况密切相关。如果孕妇HBeAg阳性，母婴传播的可能性大；反之，如果HBeAg阴性，母婴传播的可能性小[3]。本组检测结果表明，HBV母婴传播率为5.75%。

近年来研究显示，HBV感染孕妇，不管其HBeAg阳性或阴性，母婴传播的概率与孕妇血中HBV病毒载量相关[4]。病毒载量越高，其婴儿感染HBV的可能性就越大，反之亦然。将278例HBeAg阴性HBV感染产妇，按血中病毒载量不同分为高载量组、低载量组和低于检测值组。结果显示，高载量组新生儿感染率(34.7%)远远大于低载量组(17.1%)和低于检测值组(0.46%)。说明阻断HBV母婴传播最有效的方法是降低母血中的HBV病毒量。

按目前的基因型分析，在亚洲尤其是我国，绝大部分患者感染的是B型或C型HBV[5]。由于HBV B型或C型的基因特点，其前C区1896位极易发生终止变异，此位点的核苷酸变异，使乙肝病毒HBeAg合成受阻，从而成为HBeAg阴性HBV感染。本组检测了64例HBeAg阴性而HBV-DNA阳性血清，其前C区1896位存在终止变异有35例，其中变异株占优势14例，野生株占优势21例。14例变异株占优势HBV感染产妇中有4例婴儿感染HBV，其中2例为野生株感染，2例为变异株感染。而21例野生株占优势HBV感染产妇中5例婴儿感染的HBV均为野生株感染。说明HBV母婴传播过程中，野生株比变异株更容易感染婴儿，至于野生株是更容易通过胎盘还是野生株在胎儿中更容易繁殖，有待于进一步研究。

参考文献
[1] 徐元勇, 门可, 邵中军, 等. 乙型肝炎病毒宫内感染对新生儿发育的影响[J]. 中国公共卫生, 2006, 22(4) : 411.
[2] 苏海霞, 闫永平, 徐德忠, 等. 宫内传播中乙型肝炎病毒前S/ S基因序列分析[J]. 中国公共卫生, 2003, 19(7) : 770.
[3] 归巧娣, 岳亚飞, 李淑红, 等. 乙型肝炎表面抗原与e抗原阴性孕妇乙型肝炎病毒宫内感染的研究[J]. 中华妇产科杂志, 2005, 40(2) : 99–102.
[4] 李铁钢, 王素萍, 李淑珍, 等. HBsAg阳性孕妇胎盘H BV感染状况及危险因素[J]. 中国公共卫生, 2005, 21(2) : 165.
[5] 王素萍, 孔宪毅, 薛淑莲, 等. HLA-PR抗原与HBV宫内感染关系研究[J]. 中国公共卫生, 2003, 19(7) : 772.