钩端螺旋体病(钩体病)疫苗免疫效果评价主要采用显微镜凝集试验(MAT)^[1]，该试验要求培养15群15型钩体标准株活菌，操作繁锁，目前大多只能在省级疾病预防控制中心进行，基层防疫机构一般不具备开展该项检测的条件。TR/Patoc 1抗原玻片凝集试验(SAT)已被用于钩体病早期快速诊断，具有敏感性高，特异性强，无需特殊设备，操作简便安全等优点［2］。本文应用试验观察钩体疫苗免疫效果，探讨适用于基层防病机构开展此项目的方法。结果报告如下。

(1)疫苗：“福建新丙五价”钩体疫苗，其中包括黄疸出血群、犬群、秋季热群、流感伤寒群和七日热群(上海生物制品研究所)，批号分别为2003030502和2004030302，疫苗接种严格按照说明书进行。基础免疫接种2次，1年后加强免疫1次。(2)免疫人群：选择非钩体病流行区13～15岁中学生100名为观察对象。

(1)血清抗体测定：分别于钩体疫苗免疫前，基础免疫后20，90，180和360 d及1年后加强免疫20d后，分离血清，进行抗体检测。(2)钩体MAT试验：血清标本从1：5开始连续倍比稀释到1：1 280，以培养5～7d的国内15群15型标准钩体活菌液，按常规方法进行，测定其最终滴度。血清抗体≥1：10++判为阳性。(3)钩体SAT试验：钩体TR/Patoc 1抗原(中国药品生物制品检定所，批号0512)。参照所提供方法操作：取25 μl待测血清和等量TR/Patoc 1抗原在玻片上混合，缓慢旋转，在间接光线下观察反应结果，观察时间不超过4 min，以出现环状凝集程度为判定指标，“++”为阳性(滴度1：2)。阳性血清作进一步对倍稀释，测定其最高滴度。

表 1

表 1 健康人群钩体菌苗免疫效果观察

表 1 健康人群钩体菌苗免疫效果观察

表 1可见，100名学生钩体MAT抗体于基础免疫后20d全部阳转，1年后测定尚达83.3%，当给于加强免疫后，阳性率迅速恢复到100%。SAT抗体于基础免疫后20d有95名学生出现阳性。然后迅速降低，1年后检测53人，仅7.6%保持阳性，当给予加强免疫后，阳转率回升到90.6%。

表 2

表 2 健康人群构体菌苗疫后抗体滴度测定

表 2 健康人群构体菌苗疫后抗体滴度测定

以与15群15型钩体任一型出现++凝集的最高稀释度为MAT抗体的最终滴度，基础免疫后20 d MAT抗体几何均数达1：116.81，随后抗体滴度逐渐下降。但1年内仍保持在1：20以上。当给予加强免疫，20 d后MAT抗体又迅速大幅度上升至1：249.52，为基础免疫的2倍以上。钩体SAT试验，基础免疫后20 d，SAT抗体滴度又升至1：3.65，较基础免疫后为低。

本文结果表明，采用SAT测定钩体疫苗的免疫效果，基础免疫后20 d，95%的免疫对象出现SAT抗体，与MAT法比较无明显差别，但90～360d检测，SAT阳性率大幅度降低，仅35.1%～7.6%，明显低于MAT的阳性率，表明SAT检测的抗体是早期的抗体，且维持时间较短。当进行加强免疫，20 d后接种对象血清SAT抗体阳性率又恢复到90.6%，与MAT抗体测定无明显差别，表明采用SAT法监测钩体疫苗免疫效果，不管是基础免疫，还是加强免疫，20 d后虽然阳性率低于MAT法但差异无统计学意义。结果提示，SAT作为观察钩体疫苗的近期免疫效果为有效方法，但由于该方法不能判定钩体型别，又对远期既往感染的抗体无法检测，因此，不适用于钩体感染的流行病学调查。