中国公共卫生  2007, Vol. 23 Issue (8): 980-980   PDF    
吸毒对淋巴细胞姐妹染色单体交换率影响
马志敏, 张励, 阿周存, 陈玲, 董晓东, 狄勇     
大理学院公共卫生学院(下关校区), 云南 大理 671000

当前,毒品滥用已经成为威胁人类健康的严峻问题之一,毒品对人体多系统的损害作用日益受到关注。本文从细胞遗传学角度,通过比较吸毒者外周血淋巴细胞姐妹染色单体交换(sister chromatid exchange,SCE)率的变化,探讨毒品对人体遗传物质的损伤水平。结果报告如下。

材料与方法

(1)对象:选择强制戒毒人员28人,其中男性14人,女性14人;年龄18~41岁,平均28.6岁;其中吸食海洛因17人,占61%,注射海洛因11人,占39%;吸毒史1~13年。选择健康成年人28名作为对照,其中男性13人,女性15人;年龄19~39岁,平均26.8岁。(2)外周血淋巴细胞培养:抽取人体静脉血0.2ml接种于含20%小牛血清、2%植物血凝素(PHA)、pH 7.2的RPMI1640的培养液中,37℃培养箱避光培养,24 h后,加5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),使其终浓度为10~30 µg/ml,继续闭光培养48 h。终止培养前3h加入秋水仙素,使其终浓度为0.5 µg/ml。(3)SCE标本制作:常规收获细胞,气干法制备染色体标本。标本闭光置室温下老化3 d后,放于烤箱中80℃烤3 h,置于培养皿中,在玻片标本上盖1张比玻片稍大的擦镜纸,滴上适量柠檬酸钠缓冲液(SSC),置于60℃的水浴箱中温育,同时用20W紫外线灯垂直照射(灯管距玻片10 cm)30 min,冲洗。用3%~10%吉姆萨(Giemsa)染液染色20 min,蒸馏水冲洗去染液,室温下干燥,获得良好的SCE标本留待镜检。(4)观测指标:每例选择染色体数目正常、长度适中、染色体完整、分散良好、姐妹染色单体色差明显清晰的第2周期中期分裂相,镜检20个中期分裂相,油镜下进行SCE记数,凡交换发生在染色体末端或着丝粒部位的各记数1次,交换发生在染色体中间(双交换)的计为2次,计算每例(20个细胞)SCE平均值,再求每组SCE的…x±s。(5)统计分析:采用两样本均数t检验。

结果

(1)外周血淋巴细胞SCE率比较:吸毒组SCE数为(10.76±2.03)个/细胞,对照组SCE数为(6.60±1.29)个/细胞,2组比较平均SCE数差异有统计学意义(P<0.01)。(2)不同吸毒方式SCE数比较:吸食海洛因17人平均SCE数为(10.53±2.33)个/细胞,注射海洛因11人的平均SCE数为(11.12±1.50)个/细胞,差异无统计学意义。(3)不同性别SCE数比较:吸毒者中男性14人,平均SCE数为(10.59±1.97)个/细胞,女性14人,平均SCE数为(10.95±2.16)个/细胞,差异无统计学意义。(4)双交换发生频率:吸毒组发生双交换的频率为0.89/细胞,高于对照组的0.50/细胞。

讨论

研究表明,如果某个体的SCE率有明显增高,表明染色体受到环境中一定因素的影响,或受到遗传缺陷内在制约因素所致[1]。SCE率检测是目前最常用的检测致畸、致癌、致突变剂的重要方法和指标之一,在毒理、临床、环境等领域被广泛应用[2]

本文研究结果表明,吸毒组SCE率比正常人群明显增高,表明海洛因对人体细胞遗传物质具有损伤作用,可导致DNA损伤及修复功能障碍,由于这种损伤造成代谢紊乱,可能是依赖者持久存在戒断症状的原因之一[3]

参考文献
[1] 刘权章. 人类染色体方法学[M]. 北京: 人民卫生出版, 1992: 307.
[2] 王春梅, 韩连堂, 刘亨田. 异丙酚的细胞遗传毒性研究[J]. 中国公共卫生, 2002, 18(5) : 611.
[3] 司晓娥, 黄辰, 王小平, 等. 阿片对人遗传物质的损伤效应[J]. 中国药物依赖性杂志, 1999(2) : 227–230.