维生素A (VA)、锌 (Zn) 缺乏对机体损伤的研究由来己久。近年相关文献报道，VA、Zn缺乏与补充己成为许多国家的一个重要的公共卫生问题，而补充过量VA、Zn会对机体产生不利影响^[1]。VA和Zn在转运、代谢和发挥生理功能等方面具有互作效应^[2]。它们常作为食品强化剂联合用于食品中，但是维生素的补充原则是缺多少补多少，而在实际补充过程中缺乏科学指导依据，往往采取模糊补充^[3]。本研究通过建立单独与联合过量摄入VA和/或Zn的实验大鼠模型来研究过量摄入VA、Zn对实验大鼠腺垂体细胞超微结构的影响，为VA、Zn的合理营养提供参考依据。

成年健康雌性SD大白鼠80只，体重180~200 g (甘肃中医学院科研实验中心)，动物合格证号：SCXK (甘)2004-007。单只单笼，连续阴道涂片10 d，观察动情周期，剔除动情周期异常的雌性大鼠后余72只，随机分6组，每组12只，即对照组 (A组：等容积去离子水)；Zn实验组[B组：补给ZnSO₄溶液，含Zn 40/mg (kg·bw)(约20倍于A组)]；VA实验组[C组：补给VA粉剂水溶液，含VA 20 000 U/(kg·bw)(约30倍于A组)]；联合实验I组[补给VA和ZnSO₄混合溶液，含VA 6 667 U/(kg·bw)(约10倍于A组)，含Zn 40 mg/(kg·bw)(约20倍于A组)]；联合实验Ⅱ组[补给VA和ZnSO₄混合溶液，含VA 20 000 U/(kg·bw)(约30倍于A组)，含Zn 40 mg (kg·bw)(约20倍于A组)]；联合实验ⅡI组[补给VA和ZnSO₄混合溶液，含VA 33 333 U/(kg·bw)(约50倍于A组)，含Zn 40 mg/(kg·bw)(约20倍于A组)]。

VA粉剂 (规格：32.5万U/g，北京嘉康源试剂有限公司)。硫酸锌 (分析纯，山东莱阳化工实验厂)。JEM-1 230型透射电子显微镜 (日本JEOL公司)。

每天定时定量等容积经口灌胃法补充相应受试物 (每只大鼠灌胃量为0.5 ml)，自由摄取饲料 (斯莱康) 及饮水 (双蒸水)；定时称体重 (每3 d称重一次)；每天观察动物的一般情况，定时称量动物剩余饲料，计算摄食量；连续30 d。

于实验第31 d，采血法处死大鼠，取垂体组织先经过戊二醛磷酸钠缓冲液固定，漂洗，四氧化锇固定，然后经过脱水，浸透，聚合，切片，捞片和染色等过程制备成透射电子显微镜超薄切片，镜检。

实验过程中B组大鼠出现烦躁，易激惹；C组、联合实验Ⅱ组和ⅡI组出现纳差，活动减少，喜睡眠；各实验组大鼠均不同程度出现胡须脱落，体毛干枯，腿部体毛脱落等现象，联合实验Ⅱ组相对较重；处死大鼠后解剖可见，VA、Zn单独及联合过量均可致不同程度胃肠粘膜损伤，B组相对较重。

各实验组共同表现有：腺垂体部分细胞固缩；细胞核体积固缩，核膜不规整，核边集；染色质边集；线粒体肿胀，呈空泡状，甚至有包含体，嵴模糊甚至消失；内质网扩张；分泌颗粒减少等征象。各实验组相比较具体主要特点为：B组线粒体肿胀明显，呈空泡状，甚至有包含体，嵴模糊甚至消失；C组内质网扩张明显，暗细胞增多；联合实验I组分泌颗粒减少明显；联合实验Ⅱ组细胞固缩明显；联合实验ⅡI组胞质有溶解，细胞器损伤明显，坏死细胞多，细胞间有空泡，细胞比较疏散。

图 1

A组：线粒体未见异常 图 1 正常组透射电子显微镜下腺垂体超微结构 (×15 000)

图 2

B组：线粒体空泡化 图 2 Zn实验组透射电子显微镜下腺垂体超微结构 (×12 000)

图 3

C组：内质网扩张，有凋亡小体 图 3 VA实验组透射电子显微镜下腺垂体超微结构 (×15 000)（略）

图 4

Ⅰ组：线粒体空泡化，分泌颗粒减少 图 4 联合实验I组透射电子显微镜下腺垂体超微桔构 (×12 000)

图 5

Ⅱ组：内质网扩张，核固缩染色质边集 图 5 联合实验Ⅱ组透射电子显微镜下腺垂体超微结构 (×12 000)

图 6

Ⅲ组：上：细胞器溶解；下：细胞界限不清，对周围有炎性，是坏死征象 图 6 联合实验Ⅲ组透射电子显微镜下腺垂体超微结构 (×8 000)

垂体作为机体的一个重要内分泌腺，其分泌的激素几乎调节机体的任何生理活动。雌性哺乳动物的下丘脑、垂体和卵巢分泌的激素在功能上相互作用，构成一个完整的神经内分泌生殖调节体系，即下丘脑 垂体 卵巢轴，它在生殖活动中起着主要的调节作用^{[4, 5]}。过量摄入VA和/或Zn对腺垂体细胞超微结构影响明显，腺垂体出现部分细胞固缩；细胞核体积固缩，核膜不规整，核边集；染色质边集；内质网扩张；分泌颗粒减少等征象；甚至发现有凋亡小体和炎性浸润，说明各实验组腺垂体部分细胞有凋亡和坏死征象。

线粒体是细胞内能量代谢的主要场所，线粒体与细胞内氧自由基的生成，细胞的凋亡与坏死以及许多人类疾病有关^[6]。各实验组腺垂体细胞有线粒体肿胀，空泡状这种共同征象；甚至出现包含体；嵴模糊甚至消失等。单独过量摄入VA、Zn主要是以细胞器损伤为主，而联合过量摄入VA、Zn则兼有细胞器损伤和细胞整体形态改变，而且联合高剂量组镜下可见坏死细胞。结果表明，过量摄入VA、Zn对雌性大鼠腺垂体有影响，且联合过量摄入对雌性大鼠腺垂体损伤更为严重，进一步提示过量摄入VA、Zn可能会对整个生殖系统产生影响。