医院内念珠菌病感染已成为医院感染的主要病原菌〔1〕,据文献报道目前念珠菌属感染呈上升趋势〔2〕。本文对2005年1月~2006年6月2160例各类住院患者标本中分离念珠菌的种类及药物敏感性进行分析。结果报告如下。
对象与方法(1)对象:收集2005年1月~2006年6月各类住院患者标本2 160例, 从患者痰液、尿液、粪便、血液及各种分泌物中分离出念珠菌147株,其中,同一患者同样标本多次分离株按1株计算。(2)材料:①培养基:血琼脂基础(Blood Agar Base)、麦康凯琼脂(Maconkey Agar)(杭州天和微生物试剂有限公司);沙堡罗琼脂(Saburaud,s Agar)(北京奥博星生物技术责任有限公司)。②试剂与仪器:酵母菌ID32C鉴定测试卡及ATBFUNGUS2药物敏感测试卡(法国生物梅里埃公司); 该测试卡选用抗真菌药物4种,分别为两性霉素B(AMB)、5-氟胞嘧啶(5-FC)、氟康唑(FCA)、依曲康唑(ITR);ATB Expression细菌鉴定及药敏测试仪(法国生物梅里埃公司)。(3)念珠菌分离培养及鉴定:按《全国临床检验操作规程》〔3〕。将标本接种于血琼脂平板、麦康凯琼脂平板及沙堡罗琼脂培养基(管)。血琼脂平板、麦康凯琼脂平板置35℃培养24 h,沙堡罗琼脂培养管置25℃培养24~72 h;沙堡罗琼脂培养管生长的菌落使用ATB Expression细菌鉴定药敏测试仪进行鉴定。(4)药物敏感试验:将经25℃培养24~72 h后的念珠菌菌落用0.85%无菌NaCl溶液制成2.0麦氏单位的菌悬液,取20 μl移入ATBF2培养基内,混匀后接种于ATBFUNGUS2测试卡,置于35℃培养箱孵育24 h后,用ATB Expression细菌鉴定及药敏测试仪自动判读获取结果。质控菌株白色念珠菌ATCC 90028。
结果(1)不同标本中念珠菌分布:2160例患者标本中, 共分离出147株念珠菌,其中痰液标本分离94株(63.9%),尿液标本34株(23.1%),粪便标本8株(5.4%),血液标本2株(1.3%),其他分泌物标本9株(6.1%)。(2)不同念珠菌检出率:147株念珠菌中,白色念珠菌104株, 检出率70.7%;热带念珠菌25株, 检出率17.0%;光滑念珠菌9株, 检出率6.1%;近平滑念珠菌4株, 检出率2.7%;克柔念珠菌、葡萄牙念珠菌各2株,检出率分别为1.3%;季也蒙念珠菌1株, 检出率0.6%。(3)147株念珠菌对4种抗真菌药物敏感性测定结果:见表 1。
| 表 1 147株念珠菌对4种抗真菌药物敏感性测定结果(最低抑菌浓度) |
(4)147株念珠菌感染来源:调查结果显示,147例念珠菌感染的住院患者中年老体弱、免疫力低下者为67例, 占45.6%;大量及不合理使用抗生素31例,占21.1%;服用免疫抑制剂及各类激素者11例,占7.5%;肿瘤患者进行放疗、化疗者10例,占6.8%;放置导管者2例,占1.3%;其他各种原因引起的感染26例,占17.7%。
讨论本文结果显示,痰液标本的念珠菌检出率高达63.9%,居首位,这可能与其具有较强的黏附能力、菌丝形成快而多,不易被免疫细胞吞噬有关。过去深部真菌感染主要由白色念珠菌引起。本文结果表明, 念珠菌感染类型已发生变迁,热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌检出率均有检出,但白色念珠菌仍然是引起感染的重要病原菌〔4, 5〕。
抗真菌药物敏感性观察结果可见,白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌等3种主要念珠菌对两性霉素B、5-氟胞嘧啶的敏感性均较高,而对依曲康唑敏感性较低;氟康唑虽有较高敏感率,但耐药率有所增加, 可能与长期使用,使之获得性耐药性增加有关。因其他念珠菌标本量少,有待进一步研究。分析结果表明,目前念珠菌属院内感染呈上升趋势,与文献报道基本一致〔2〕,因此,应尽量避免深部真菌引起的二重感染;在合理应用抗生素的同时要密切注视念珠菌感染;慎重应用抗真菌药物。
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2007, Vol. 23
