中华芦荟多糖(AP)是中华芦荟中重要的生物活性成分, 具有免疫调节功能、促进血细胞生成、抗癌、抗真菌、抗病毒和抗辐射损伤等作用。但目前总体上对芦荟多糖的研究无论在化学结构还是药理活性方面均较少^〔1〕。四氯化碳(CCl₄)作为一种趋肝毒物, 经代谢产生CCl₄自由基, 作用于肝细胞并和膜上的不饱和脂质共价结合, 使脂质过氧化, 引起肝细胞坏死, 导致肝脏的急性损伤。本文利用CCl₄小鼠急性肝损伤模型, 研究中华芦荟多糖对急性肝损伤的保护作用及其机制。

提取中华芦荟多糖^〔2〕(批号:20040711, 经测定含量达99.32%); 四氯化碳(CCl₄)(进口分装, 湖北大学化工厂); 昆明种小鼠(广州九佛实验动物厂); 丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒(上海申能生物技术有限公司, 批号为050408)。天门冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒(上海申能生物技术有限公司, 批号为050814)。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(M DA)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

取昆明种小鼠72只, 雌雄各半, 称重, 随机分为正常对照组、模型(CCl₄)对照组、联苯双酯阳性对照组; 另按1.79, 3.58, 7.17 mg/(kg·bw)的给药剂量设AP高、中、低剂量组, 每组小鼠12只。第1~5 d, 联苯双酯阳性对照组、中华芦荟多糖高、中、低剂量组每日灌胃给药1次, 正常对照组与模型对照组灌胃给予等体积的饮用水。第5 d给药后1 h, 除正常对照组皮下注射等体积生理盐水外, 其他各组皮下注射0.5% CCl₄花生油, 10 ml/(kg·bw)皮下注射CCl₄后禁食24 h, 再给药或饮用水1次; 1 h后断头取血, 离心, 测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活力。采血后, 立即取出肝脏, 用滤纸吸干, 称重, 然后制备10%的匀浆液, 5 000 r/min离心25 min (0~4℃), 取上清液, 在1~4℃的冰箱保存, 以测SOD活性及MDA含量。

采用SPSS 10.0软件进行显著性t检验。

中华芦荟多糖对CCl₄诱导的急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST的影响, 见表 1。

表 1

表 1 AP对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤血清中ALT和AST的影响( x±s)

表 1 AP对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤血清中ALT和AST的影响( x±s)

小鼠皮下注射CCl₄诱导后24h, 模型对照组小鼠血清中ALT和AST水平明显高于正常对照组。中华芦荟多糖各剂量组与联苯双酯阳性对照组血清中ALT和AST活力明显低于模型对照组, 中华芦荟多糖可明显对抗CCl₄诱导ALT和AST的升高, 并呈现较好的量效关系。

中华芦荟多糖对CCl₄诱导的急性肝损伤小鼠肝脏中SOD和MDA的影响。小鼠皮下注射CCl₄诱导后24 h, 模型对照组小鼠肝脏中SOD活性明显低于正常对照组, MDA含量明显高于正常对照组水平。中华芦荟多糖各剂量组与联苯双酯阳性对照组可明显升高SOD活性, 并使肝脏中MDA水平明显低于模型对照组, 见表 2。

表 2

表 2 AP对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤肝脏SOD和MDA的影响( x±s)

表 2 AP对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤肝脏SOD和MDA的影响( x±s)

芦荟含有多种有效成分, 芦荟水溶液在体外能够清除超氧阴离子, 阻断自由基链式反应, 具有与SOD相同的效果^〔3〕。芦荟多糖作为芦荟的主要有效成分之一, 具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等作用。库拉索芦荟多糖的体外研究表明, 芦荟多糖具有较高的清除超氧阴离子自由基和H₂O₂的能力^〔4〕, 并且能够降低大鼠内毒素所诱导的高脂质过氧化水平, 且作用效果相当于公认的氧自由基清除剂维生素E^〔5〕。本实验结果表明, 中华芦荟多糖对CCl₄所致的小鼠血清ALT、AST活性升高有明显的降低作用, 并能使肝脏的SOD活性显著升高, 脂质过氧化产物MDA含量显著降低, 量效关系明显。提示中华芦荟多糖能够通过提高抗氧化酶活性, 清除自由基, 进而抑制细胞脂质过氧化、稳定肝细胞膜的结构, 达到对CCl₄所诱发的急性肝损伤的保护作用。