硒是人体所必须的微量元素之一, 在海产品中含量较高, 尤其是在海参中。本文采用微波消解处理样品, 氢化物发生原子荧光法测定海参中的硒, 避免了由于常压敞开湿法消解样品造成的元素损失, 试剂用量少, 减少了试剂引入的沾污, 提高了灵敏度、操作简单、快速, 结果可靠。现报道如下。

材料与方法

(1)仪器与试剂:AFS-230型双道原子荧光光度计、硒特制空心阴极灯(北京海光仪器公司)。MDS-2003F型空压密闭微波快速消解系统(上海新仪微波化学科技有限公司)。氩气(99.9%)、硝酸、盐酸、氢氧化钾均为优级纯, 硼氢化钾(进口分装)、铁氢化钾(分析纯)、硒标准溶液(国家标准物质研究中心); GBW (E)080215(100 μg/ml), 使用时稀释成1 μg/ml的标准使用液。(2)方法:按食品卫生检验方法理化部分[GB/T50091 93-2003]^〔1〕。(3)仪器条件:光电倍增管负高压290 V, 空心阴极灯灯电流70 mA; 原子化器高度8 mm; 原子化器温度200℃; 载气流量400 ml/min; 屏蔽气流量1 000 ml/min; 测量方式:标准曲线法; 读数方式:峰面积; 延迟时间:1.0 s; 读数时间:10 s。(4)样品处理:将干海参粉碎后, 准确称取样品0.5 g, 加5.0 ml硝酸, 置预处理炉预消解120℃10 min, 依消解炉操作规程, 设定初始压力0.5, 1.0, 1.5 MPa, 共8 min冷却后开罐, 消化液无色透明, 取消解内罐, 置预处理炉内赶尽余酸, 再加入1.0 ml盐酸, 消化5 min, 最后用3.0 mol/L盐酸转移并定容至50 ml容量瓶中备用。同时作空白及回收实验。

结果与讨论

(1)消化方式的选择:湿法消化所用试剂为盐酸、硝酸、高氯酸, 消化时间为60 min, 结果为1.55 μg/g, 回收率94.2%。微波消解所用试剂为盐酸、硝酸, 消化时间为16 min, 结果为1.63 μg/g, 回收率99.3%。实验结果显示, 微波消解法具有试剂用量小, 消化时间短, 灵敏度高等优点。(2)仪器参数选择:负高压增大, 仪器灵敏度也增高, 但负高压过高, 结果的重现性差; 灯电流越大, 激发强度越大, 灵敏度越高, 但灯电流过大会降低灯的使用寿命。本文选择负高压290 V、灯电流70 mA。(3)介质和酸度:市售硫酸中大多含有硒, 硝酸会使硒的荧光值下降, 盐酸可以完全将硒(Ⅵ)还原成硒(Ⅳ)。并且碱金属不会干扰实验, 故本法选用盐酸作为介质。氢化物反应要求有适宜的酸度, 盐酸浓度为1.5~5.0 mol/L, 硒的灵敏度不受影响, 酸度低于1.5 mol/L时, 结果偏低。本试验选用3.0 mol/L的盐酸作为介质。(4)硼氢化钾浓度的选择:分别配制6.0, 8.0, 10.0, 12.0, 15.0 g/L硼氢化钾溶液, 在选定的条件进行试验(样中硒标的加入量均为5 ng/ml), 荧光强度为359.28, 448.96, 417.51, 390.78, 274.26 (减空白的荧光强度)。从结果可见, 硼氢化钾浓度为6~12 mol/L时, 信号强度基本差别不大, 而当硼氢化钾浓度为15 mol/L时, 荧光强度下降。这是由于高浓度的硼氢化钾不稳定, 易产生大量的氢气。因此, 本法选用8.0 mol/L硼氢化钾溶液。(5)铁氰化钾浓度的选择:铁氰化钾可消除干扰元素的影响, 提高灵敏度, 加入量越多, 荧光强度越大, 但考虑到仪器的灵敏度和稳定性, 选择10%的铁氰化钾。(6)共存元素的影响:本法对常见的几种元素的干扰情况分别进行试验, 采用盐酸作为介质, 碱土金属K⁺、Na⁺、Mg²⁺、Al³⁺等离子不干扰测定, 而加入10%铁氢化钾, 主要是消除Cu²⁺(100 mg/L)、Ag⁺(0.1 mg/L)、I^-(100 mg/L)、Ni²⁺(400 mg/L)等离子的干扰。(7)标准曲线:用硒标准溶液分别配制成含0.0, 1.0, 5.0, 10.0, 20.0, 30.0, 40.0, 80.0 ng/ml的标准系列。回归方程为:If=87.1℃+5.056, 相关系数r=0.9999, 检出限为0.014(ng/ml)。试验表明, 在选定的条件下, 硒标准溶液在1~80 ng/ml的范围内均呈线形关系, 该曲线线形良好。(8)精密度试验:分别称取6份样品, 重复6次测定, 结果为1.63, 1.77, 1.56, 1.61, 1.65, 1.64 μg/g, 均值为1.63 μg/g, 标准偏差为0.07, 相对标准偏差为4.3%。采用加标法做回收试验, 加入量为2, 5, 10 μg/g, 结果为3.59, 6.80, 11.50 μg/g。回收率为97.7%~103.8%, 平均值在99.3%。

小结

由以上实验结果得出, 运用微波消解、氢化物发生原子荧光光谱法对海参中硒进行消化测定, 试剂用量小, 基体干扰少, 操作方便快速, 灵敏度高, 结果满意, 值得推广应用。