2. 海军青岛九七一医院，山东 青岛 266071;
3. 明月海藻集团有限公司海洋食品加工与安全控制全国重点实验室，山东 青岛 266400
2. PLA Navy NO.971 Hospital, Qingdao 266071 China;
3. State Key Laboratory of Marine Food Processing & Safety Control, Qingdao Brightmoon Seaweed Group Co., Ltd., Qingdao 266400 China
随着核工业的发展，放射性核素在各行业领域的应用日益增多，核辐射接触人员受到急性或慢性辐射损伤的概率也随之增加。多项研究表明，长期低剂量核辐射接触会引起机体损伤和相关指标变化[1-3]。为探讨长期低剂量核辐射接触对接触人员机体的影响，我们选取某单位长期低剂量核辐射接触人员作为研究对象，就其氧化损伤、免疫功能等相关指标进行了检测和对比分析，探讨机体相关指标变化，为长期低剂量核辐射接触人员做好自我职业防护提供参考。
1 对象和方法 1.1 对象采取整群抽样方法，选取80名从事2年以上接触核辐射作业的人员为接触组，年接触剂量均在行业限制范围内。另选30名非核辐射接触人员为对照组，2组均为男性，年龄20～30岁，生活作息基本一致。所有实验对象均经临床体检,对本次实验均知情同意。
1.2 方法 1.2.1 试剂与仪器实验所用T-AOC、MDA、GSH-Px、SOD检测试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，酶标仪为美国Beckman公司产品[4]，血细胞分析仪为日本希森美康产品。
1.2.2 实验分组与样品处理抽取2组人员空腹静脉血7 ml，其中3.0 ml分离血清备用，4 ml肝素抗凝处理后分离淋巴细胞并制成细胞密度为1 × 106/ml的细胞悬液备用。
1.2.3 检测指标①白细胞（WBC）与血小板计数（PLT）：用血细胞分析仪检测。②T-AOC、GSH-Px、SOD和MDA：采用试剂盒进行血清检测。菲啉比色法检测T-AOC，硫代巴比妥比色法检测MDA，黄嘌呤氧化酶法检测SOD，DTNB比色法检测GSH-Px[4]。③细胞增殖水平：用四甲基偶氮唑蓝（MTT）方法检测[5]。各组淋巴细胞增殖活性用平均OD值表示。④PCNA、Bax、Bcl-2：免疫细胞化学法测定。用光学显微镜观察各蛋白的表达水平，每例计数500个细胞，观察记录其淋巴细胞阳性表达数，计算其阳性表达率=阳性细胞数 /计数细胞数 × 100%[4]。⑤淋巴细胞转化率：采用MTT方法取细胞悬液进行转化试验[4]。⑥淋巴细胞微核率：釆用细胞培养微核试验。每例观察1000个淋巴细胞,记录其中的微核细胞数，计算微核细胞率 = 微核细胞数/计数细胞总数 × 1000‰[6]。
1.3 数据处理指标检测数值以
接触组 T-AOC、GSH-Px、SOD较对照组降低，而MDA则增高，差异均有统计学意义 （P < 0.05）。详见 表1。
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表 1 抗氧化指标检测结果（
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接触组细胞增殖活性、PCNA增殖指数与Bcl-2蛋白阳性表达率均较对照组明显降低，Bax蛋白阳性表达率较对照组明显升高，差异有统计学意义 （P < 0.05）。详见 表2。
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表 2 淋巴细胞增殖与凋亡水平检测结果（
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接触组白细胞计数、血小板计数、淋巴细胞转化率均明显降低，差异有统计学意义 （P < 0.05），淋巴细胞微核率较对照组升高，但无统计学意义（ P > 0.05）。详见 表3。
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表 3 白细胞计数、血小板计数与淋巴细胞转化率检测结果（
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T-AOC代表机体抗氧化的总体水平，与细胞抗氧化能力呈正相关；MDA是反映脂质过氧化程度和自由基损害程度的重要指标；SOD作为一种抗氧化酶，可有效清除氧自由基；GSH-Px是重要的催化过氧化氢分解的酶，可以防止细胞脂质超氧化反应[7]。本实验结果可见，接触组T-AOC、GSH-Px、SOD均较对照组明显降低，而MDA水平较对照组明显升高，说明长期低剂量核辐射接触对操作人员抗氧化机能有一定程度的影响。这与文献报道的长期低剂量电离辐射对从业人员机体的氧化与抗氧化平衡产生影响的结论[8]一致。
外周血淋巴细胞分析是评价慢性低剂量辐射所至机体损伤程度的可靠方法，淋巴细胞增殖与凋亡水平可以作为参考指标用于慢性低剂量辐射损伤的评价[9]。PCNA的表达合成与细胞的增殖周期有关，可作为检测细胞核增殖的相关抗原[10]。本次实验结果表明，接触组的淋巴细胞增殖活性与PCNA表达均较对照组明显降低，说明长期低剂量电离辐射对从业人员的细胞增殖水平有一定的影响。本次实验结果与Scovassi和Prosperi[11]报道实验结果相吻合。Bcl-2和Bax是一组重要的细胞凋亡调控因子，通常情况下Bax与Bcl-2基因比较稳定，当细胞受到辐射损伤时，Bax可表达增强，导致细胞凋亡，而Bcl-2可与Bax形成Bcl-2/ Bax，在一定程度上抑制细胞凋亡[12]。本实验结果显示，接触组Bcl-2表达水平较对照组显著性降低，而Bax则显著性升高，表明核辐射接触人员的淋巴细胞增殖与凋亡受到了一定的影响，这与耿芳等[13]报道的实验结果一致。
白细胞计数和淋巴细胞转化率是反映机体免疫状况的重要指标。本次实验结果可见，接触组白细胞计数和淋巴细胞转化率较对照组明显降低，说明长期低剂量核辐射接触人员的机体免疫功能受到一定的影响。这与以往的研究一致[13]。
研究表明造血细胞对辐射较敏感，长期低剂量辐射接触会造成从业人员血系统损伤[14]。本实验接触组血小板计数较对照组明显降低，说明核辐射接触人员的凝血功能受到了一定的影响，这与朱小红等[15]报道的一致。
淋巴细胞微核率已列入我国职业性放射病诊疗的重要依据之一，对辐射损伤具有较高的敏感性 [16]。本实验结果发现，接触组淋巴细胞微核率较对照组差异无统计学意义，可能与核辐射接触人员辐射损伤较轻，不足以引起染色体损伤和免疫球蛋白降低有关。
综上，接触组某些血生化指标、抗氧化指标、细胞增殖活性等与对照组比较有显著性差异，说明长期低剂量核辐射接触人员机体相关指标有一定变化。提示核接触人员在日常工作中应加强自身防护。
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