长期低剂量的电离辐射是从事放射工作人员接触的主要职业病危害因素,随着射线在不同领域的广泛应用,从事射线作业的工作人员逐渐增加,为其提供精确的风险评估也越来越重要[1]。外周血淋巴细胞微核率(以下简称微核率)作为灵敏而可靠的判断辐射损伤的指标[2],其大小可直接反映放射工作人员染色体的损伤程度,也能间接反映受电离辐射损伤的程度,且微核率的测定方法相对简单快速[3],对人体健康损伤的判定具有重要意义[4]。本研究通过对在岗放射工作人员进行微核率检测,结合岗前微核率检测结果进行统计学分析,以了解放射性工作人员的放射损伤状况,为做好放射防护和职业健康监护提供科学依据。
1 对象与方法 1.1 对象收集2019年1—12月在江苏省某职业健康检查机构进行职业健康检查90家用人单位504名在岗放射工作人员为放射组,根据其工作性质分为工业探伤、放射诊断、放射治疗、介入治疗、核医学5组工作人员,其中男性342名,年龄中位数(M)为33 (20~61)岁;女性162名,年龄中位数(M)为30 (20~60)岁。接害工龄中位数(M)为3 (0.1~43)年。以岗前职业健康检查拟从事放射工作,无射线和毒物接触史的105名健康成年人为对照组,其中男性 73名,年龄中位数(M)为30 (20~59)岁;女性 32名,年龄中位数(M)为 30.5 (21~72)岁。两组人员性别、年龄差异无统计学意义(P > 0.05)。放射工作单位分为省级医院、市级医院、区级及以下医院和企业。
1.2 方法 1.2.1 常规培养法在无菌条件下,将肝素抗凝的外周血0.4 ml接种于RPMI1640细胞培养基中混匀,于37℃恒温培养箱中静置培养72 h,培养结束后去上清液,加入低渗液(0.075 mol/L KCL)5 ml 并转移至离心管中,立即加入新鲜配制的固定液(甲醛∶冰醋酸 = 3∶1)2 ml 预固定,1 400 r/min离心10 min,后弃上清,再加入固定液 5 ml混匀,重复固定 2 次离心后取沉淀物直接涂片,空气自然中晾干;用10%Giemsa染液染色。
1.2.2 微核的判定标准微核是指游离于胞质中,与主核完全分开,呈椭圆形或圆形,着色与主核一致或略浅,不折光,大小为主核直径的1/16~1/3的小核。按照微核判定标准[5],每例计数1 000个有完整包浆的淋巴细胞,微核以千分率(‰)表示。
1.2.3 阅片分析采用双人盲法阅片,选择细胞分布均匀重叠率低染色良好的区域,10 × 100 倍油镜下计数1 000个有完整胞浆的转化淋巴细胞,计数微核数,以‰表示,≥ 8‰为异常[6]。微核率(‰) = 微核数/观察细胞数 × 1000‰
1.3 统计学处理采用EXCEL 2016 建立数据库,SPSS23.0软件进行分析,计量资料不服从正态分布者,采用【M(P25,P75)】或【M(P0~P100)】描述;微核率M的两两比较采用Mann-Whitney U检验,多组比较采用Kruskal-Wallis H检验;P < 0.05认为有统计学意义。
2 结 果 2.1 两组人员微核率的比较放射组有6例(1.20%)微核率超出正常参考值范围,对照组微核率均在参考值范围内。对照组的微核率明显低于放射组,差异有统计学意义(P < 0.001,表1)。
放射组女性放射工作人员微核率高于男性,差异有统计学意义(P < 0.01,表2)。
各个年龄阶段的微核率差异具有统计学意义(P < 0.05,表3),年龄41~50岁的微核率最高,大于21~30岁(Z= −2.801,P < 0.05)。
不同工龄段放射工作人员微核率差异有统计学意义(P < 0.05,表4),工龄21~30年的微核率最高,大于0~10年(Z = −3.029,P < 0.05)。
各工种之间微核率的差异有统计学意义(P < 0.01,表5),放射治疗的微核率最高,放射诊断的微核率最低。工业探伤(Z = 2.945,P < 0.05)、放射治疗( Z = −3.664,P < 0.01)比放射诊断的微核率高。
各级别放射工作单位之间微核率差异有统计学意义(P < 0.05,表6),其中企业(Z = −2.693,P < 0.05)与市级医院( Z = −3.759,P < 0.01)的微核率高于省级医院。
一定剂量的电离辐射可使机体的DNA损伤,从而导致染色体畸变[7]。微核来源于细胞内染色体断片或有丝分裂过程中丢失的整条染色体,在有丝分裂的后期因不能纳入子核而在胞质中形成的单个或多个小核。如果人体持续受到电离辐射,被辐射损伤的细胞不能得到及时修复,累计剂量持续增加,长期慢性小剂量辐射会导致人体淋巴细胞微核率不断增高[8]。微核数量的多少直接反映出染色体的损伤程度,间接显示受辐射损伤的状况[9],因此临床可将微核率作为电离辐射生物学的一个客观敏感指标。
本研究采用常规培养法分析了504例放射工作人员的微核率,按照GBZ 98—2020《放射工作人员健康要求及监护规范》,微核率应在本实验室的正常参考值范围[10],国内对于微核率异常的判断标准不同[6, 11, 12],本研究以微核率 ≥ 8‰作为异常,经检查,放射组共有6例放射工作人员(1.20%)异常,说明长时间的电离辐射对工作人员的身体健康造成影响。结果显示放射组微核率高于对照组(P < 0.001),表明工作人员的微核率会因接触职业性电离辐射有害因素而增加,其受辐射损伤的程度远高于未接触者。女性放射工作人员微核率高于男性( P < 0.01),与文献报道一致 [13-15]。有研究分析,产生男女性别间微核率差异的原因可能与X染色体丢失有关[6],也有相关文献认为,女性放射工作人员在妊娠期、哺乳期、月经期等自身免疫抵抗力低下,更易受电离辐射的影响[16],故女性在妊娠哺乳等时期要减少射线的接触。年龄41~50岁的微核率最高,51岁以上的的微核率反而减小,这与工龄21~30年的微核率最高,30年以上工龄微核率减少的结论一致。有文献[17]认为是由于高年龄与高工龄组直接接触射线的机会逐渐减少,而且长期暴露于电离辐射环境下,放射工作人员自身会产生适应性和抗性,以抵抗电离辐射带来的损害[18]。此外,有研究观察到双核和单核微核细胞的频率增加,累计有效剂量在10 mSv以上,随工作年限的增加均有统计学意义[19],进一步验证了辐射效应为累积效应,微核率的增长与受照剂量呈正相关反应关系[11]。放射治疗的微核率较高,但介入治疗和核医学的微核率并不高于其他工种,这与以往研究[13, 14, 19, 20]结论不同,原因可能在于本次研究的样本量过少;从事放射诊断的人员的工作方式为隔室操作,不直接接触辐射,故该工作人员微核率最低。不同级别单位中,市级医院的微核率最高,原因在于市级医院工作量较大而忽视了对其放射工作人员的防护工作;省级医院因其医疗环境较好且防护措施到位,故微核率最低。
综上所述,低剂量电离辐射可引起放射工作人员微核率的升高,市级医院的一线工作人员需加强辐射防护和健康知识培训。本研究因样本量过少,无法反映介入治疗与核医学工作人员普遍受辐射情况,在今后的研究中会着重收集此方面的资料,以完善放射工作人员的职业健康档案,以便更深入探究该岗位人群受电离辐射健康损伤情况。
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