外周血淋巴细胞微核分析在电离辐射领域得到广泛应用, 微核测定方法简单、快速, 是评价放射工作人员受照效应的一种简单实用的遗传学指标^[1]。为掌握放射工作人员健康状况, 2016年我们对廊坊市放射工作人员进行了职业健康体检, 对全市放射工作人员外周血淋巴细胞微核率进行了检测。现对放射工作人员微核检测结果进行整理统计, 分析长期小剂量射线对放射工作人员的遗传损害, 为进一步改进我市放射防护工作提供技术依据。

1 对象与方法 1.1 调查对象

2016年对廊坊市辖区1365名职业性接触X射线, γ射线及α、β射线的放射工作人员进行职业健康体检, 其中上岗前体检98人, 离岗体检9人, 在岗期间体检1259人; 男946人, 女419人; 年龄18~76岁, 平均年龄37.0岁; 工龄4月~51年, 平均工龄14.2年。其中从事医学诊断1042人、牙科治疗89人、介入治疗148人、同位素应用40人、工业探伤46人。

1.2 材料及试剂

材料主要有一次性注射器、试管、吸管, 恒温培养箱, 离心机, 校准显微镜及计数器等; 试剂有500个单位/ml的肝素, 0.5%的甲基纤维素, 瑞氏染液包括甲液和乙液, 甲液由碱性美蓝、酸性伊红和甲醇组成, 乙液为pH值在6.4±0.3的缓冲液。

1.3 方法

采用甲基纤维素浓集细胞法^[2]。用7号针头取2滴肝素滴入塑料试管, 用注射器抽取1 ml外周静脉血, 加入装有肝素的塑料试管并混匀; 向血样中加0.5 ml甲基纤维素试剂, 充分混匀后放入恒温培养箱, 37℃培养40 min; 取出后用吸管吸取上清液再放入另一个试管, 2000转/min离心10 min, 去上清液, 只留底部沉淀物和少量液体, 震荡混匀后吸取一滴均匀涂在玻璃片上, 晾干后用瑞氏染液染色; 首先用甲液均匀滴于标本上, 1 min后滴加稍多的乙液, 用洗耳球吹匀, 染色15 min后用清水清洗染液, 将标本置于滤纸上自然风干。

1.4 微核阅片及计数

微核呈圆形或卵圆形, 边缘光滑, 嗜色性与主核相同或略浅; 游离于胞质中与主核完全分开, 如与主核相切应见到各自的核膜; 存在于完整胞质中, 大小应小于主核的1/3^[3], 发现可疑的微核需两个观察者共同确认。用校准显微镜在油镜下观察细胞, 选择细胞完整、染色形态清晰及铺展良好的细胞进行计数, 每个标本计数细胞1000个, 计算微核率、微核阳性率、超标率。

1.5 统计分析

采用软件SPSS 13.0进行统计分析, 率的比较采用χ²检验, P＜0.05为有统计意义。

2 结果 2.1 不同工龄的放射工作人员淋巴细胞微核检出结果

1365位放射工作人员, 检出微核621个, 检出率为0.45‰; 391人有微核检出, 阳性率28.6%;有57人微核检出超过3‰, 超标率4.2%。不同工龄的放射工作人员淋巴细胞微核检出情况详见表 1。随工龄增长, 放射工作人员微核检出率、阳性率、超标率均有上升趋势, 趋势性卡方检验显示, 差异有统计学意义(χ²=59.874、10.045、15.017, P＜0.01), 提示随着累积接触剂量增加, 射线对放射工作人员造成的遗传性损害在逐渐增大。

2.2 不同单位放射工作人员淋巴细胞微核检出结果

乡镇卫生院及其它医疗单位、从事工业探伤企业、县级医院、市级医院的放射工作人员在淋巴细胞微核检出率、阳性率、超标率上均不同, 结果详见表 2。卡方检验显示, 差异均有统计学意义(χ²=41.385、43.448、11.857, P＜0.01), 提示不同单位的放射工作人员接触射线剂量不同, 对放射工作人员造成的遗传性损害也存在差异。

2.3 不同工种放射工作人员淋巴细胞微核检出结果

从事医学诊断、牙科治疗、介入治疗、同位素应用、工业探伤工作的放射工作人员在淋巴细胞微核检出率、阳性率、超标率上均不同, 结果详见表 3。卡方检验显示, 不同工种放射工作人员在淋巴细胞微核检出率、阳性率上的差异均有统计学意义(χ²=19.928、23.539, P＜0.01), 但Fisher确切概率法检验显示, 不同工种放射工作人员在淋巴细胞微核超标率的差异没有统计学意义(P=0.483, P＞0.05), 提示不同工种的放射工作人员接触射线剂量可能不同, 对放射工作人员造成的遗传性损害也可能存在差异。

3 讨论

当射线作用细胞分裂间期的染色体时, 可导致染色体损伤、断裂, 产生断片, 在细胞分裂末期形成子细胞时, 这些断片可滞留于胞质中形成微核, 微核率的高低可以反映机体的吸收剂量^[4], 直观表示辐射损伤程度。微核检测既可用于生物剂量估算, 还可进行辐射流行病学调查和辐射远期效应的观察^[5]。微核率≥3‰的放射工作人员, 身体有可能受到放射线损害^[6]。

调查显示, 廊坊市放射工作人员外周血淋巴细胞微核率为0.45‰, 超出我国成人微核均值0.1~0.3‰^[7], 说明放射工作人员在长期小剂量照射条件下, 其吸收剂量要远超出常人在正常生活状态下的受照吸收剂量, 提示做好放射防护工作对于保护放射工作人员健康的重要性。4.2%的放射工作人员淋巴细胞微核率≥3‰, 表明这部分放射工作人员在长期小剂量射线照射下身体已经可能受到损害, 说明这些放射工作人员所在单位的射线装置的防护设施、个人防护还存在不足或漏洞, 各项防护措施在落实上可能还不完全到位, 个人防护意识还有待提高。

放射工作人员微核检出率、阳性率、超标率随工龄增长均有上升趋势, 说明随着累积剂量增加, 放射工作人员的遗传性损害逐渐增大, 这与国内相关研究结果基本一致^[8-10], 进一步证明了放射工作人员在遭受长期小剂量电离辐射照射会对健康产生损伤, 同时也提示对放射工作人员微核状况进行长期动态监测是必要的。乡镇卫生院及其它除市、县级医院外的其它医疗单位及工业探伤企业在微核检出率、阳性率和超标率上明显高于市、县级医院, 考虑到当前市、县级医院射线装置性能先进, 防护设施配备完善、防护条件好, 几乎全为遥控或隔室操作, 而基层单位设备相对陈旧、防护状况较差, 这可能是造成差别的主要原因, 同时这些单位可能在个人防护意识和习惯、防护措施落实方面与后者差距较大, 今后应将这些单位做为防控重点单位。工业探伤放射工作人员在微核检出率、阳性率、超标率上明显高于其它放射工作人员, 提示尽管从事工业探伤的人员总数少, 但这个行业的辐射危害却不低, 应引起高度重视, 加强对这类企业放射工作人员的防护也应作为今后防控工作的一个重要方面。

总之, 调查表明长期接触小剂量照射对放射工作人员的健康危害不容忽视, 廊坊市部分放射工作人员已表现出一定的损害效应。今后应以乡镇卫生院及其它除市、县级医院外的其它医疗单位及工业探伤企业为防控重点, 全面加强防控工作, 一要加强从业人员辐射防护知识培训, 强化其防护意识和良好防护习惯; 二要严格执行医用X射线机影像质量控制检测, 加强淘汰陈旧且性能不合格机型; 三是加快改造和完善不合格辐射防护设施; 四是要加强监督执法, 促使相关单位严格落实各项防护措施, 以保护放射工作人员健康。