人外周血淋巴细胞微核测试法在职业暴露人群遗传损害监测和现场生态环境检测方面, 得到了大量的应用, 在评价放射作业对健康的危害程度时, 微核试验以其经济、简单、快速等优点成为判断放射从业人员是否受到职业伤害的重要手段之一[1]。2004年我们配合扬州市防疫站对该地区从事放射工作的有关人员进行健康调查, 结果如下。
1 对象与方法 1.1 调查对象调查组从事放射工作者665名, 其中男性543名, 女性122名, 年龄在20~ 60岁之间。对照组取某大学在职职工体检时的健康者137名, 其中男性77名, 女性60名, 年龄在20~ 60岁之间。
1.2 检测方法根据调查组从业人员接触放射线强度及性质的不同将工种分为三类:放射诊断人员(主要在X光室、CT室工作的人员, 以接触X射线为主); 同位素室人员(以接触α、β射线为主的同位素室工作人员); X射线探伤人员(主要从事工业品探伤工作, 日常接触X射线及某些非电离射线如微波、红外线和紫外线等) [2]。
取受检者抗凝全血0.4 ml, 加入到离心管中, 加入预温至37℃的Tris-NH4Cl缓冲液(0.17 mol/L Tris 10 ml +0.16 mol/L NH4Cl 90 ml) 2ml, 混匀后置于37℃水浴中保温5 min, 使红细胞充分溶解; 加入固定液(冰醋酸:甲醇=1 : 3) 0.5 ml, 混匀后离心10 min(1 000 r/min), 弃上清液, 再加5 ml固定液固定10 min, 离心弃上清液, 取沉淀物涂片。风干后用Giemsa染色, 双盲法油镜下计数1 000个淋巴细胞中的微核数, 以千分率(‰)表示。
微核判断标准:微核为主核的1/20 ~ 1/3, 呈圆形或椭圆形, 边缘光滑整齐, 没有光的折射, 嗜色性和核质一致, 微核与主核有明显的界线。
1.3 统计学处理根据资料的分布特点分别选用t-检验或t'检验和方差分析进行比较, 统计软件选用SPSS10.0, 显著性水平(α)取0.05。
2 结果 2.1 临床调查根据放射工作人员的工作环境及性质分别做了眼科、内科和吸烟习惯调查。眼科检查放射工作人员以双眼晶状体浑浊检出率最高(晶状体先天性浑浊点不列入观察范围), 以赤道部及前后皮质部程度不同的浑浊多见, 检出率28. 2%, 干燥性结膜炎检出率8.8 %, 未检出白内障。
内科检查放射工作人员未发现有头痛、乏力、失眠健忘、记忆力衰退等症状, 但主诉易患上呼吸道感染, 口腔溃疡等检出率为18.3%。
吸烟习惯调查放射工作人员每日吸半包以上者检出率16 %。上述三项检查调查组与对照组相比检出率较高, 经统计学分析, 差异有显著性(P < 0.05)。
2.2 不同年龄淋巴细胞微核率本次检测发现, 淋巴细胞微核率与年龄有明显的关系, 淋巴细胞微核率随年龄的增长而升高, 两组所测结果近一致(图 1)
两组所测外周血淋巴细胞微核率女性均高于男性, 但经统计学分析, 差异无显著性(表 1)
经方差分析, F =1.937, P = 0.122, 按α=0.05检验水准, 可认为放射诊断人员、同位素室人员、X射线探伤人员与正常对照人群之间淋巴细胞微核率差异无显著性(P >0.05) (表 2)
本次检测中, 完全采用双盲法数片, 保证了检测结果的客观性。本次共检测放射工作人员665名, 平均年龄37.92岁, 其中男性平均年龄38.36岁, 女性平均年龄35.93岁; 正常对照137名, 平均年龄41.78岁, 其中男性平均年龄42.17岁, 女性平均年龄41.28岁, 两组男女平均年龄相近, 差异无显著性(P > 0.05)。男女外周血淋巴细胞微核率差异无显著性(表 1)。本次检测发现微核自发率与年龄成正相关性, 且随着供体的年龄升高, 微核自发率呈线性升高(图 1), 其微核率与年龄的关系与Huber[3]等的研究结果相同。进一步说明本次调查结果的可靠性。
本次调查发现放射诊断、同位素室、X射线探伤各作业工种间, 调查组与对照组之间淋巴细胞微核率差异无显著性, 说明我市使用的放射诊断、同位素、X线探伤设备及个人防护措施基本达到了防护要求, 也表明放射从业人员通过学习防护知识、防护规则, 提高了自身防护意识, 大大降低了受辐射剂量, 有效地防止了辐射损伤。
本次调查发现调查组淋巴细胞微核率为1.8‰, 对照组淋巴细胞微核率为1.38 ‰, 在正常范围0~ 3‰内[4]。调查组男性微核率最高为8‰, 阳性检出率为14.92%, 对照组男性微核率最高为5‰, 阳性检出率为3.9%(淋巴细胞微核率≥4‰为异常), 调查组女性微核率最高为9‰, 阳性检出率为17.2%, 对照组女性微核率最高为5‰, 阳性检出率为5%, 男女淋巴细胞微核阳性检出率调查组与对照组相比差异有显著性(P < 0.05)。一般来讲, 年龄与工龄成正比, 考虑到放射从业人员的工作性质及微核阳性检出率, 提示放射线对职业受照者的晶状体、皮肤等的轻微损害依然存在, 特别是40岁以下的微核率阳性检出者, 要注意放射卫生防护问题。
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曹佳, 林真, 余争平. 微核试验-原理、方法及其在人群监测和毒性评价中的应用[M]. 北京: 军事医学科学出版社, 2000: 1-9.
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李湘鸣, 孙蓉, 陈秀云, 等. 扬州地区705名放射工作人员外周血淋巴细胞微核分析[J]. 江苏临床医学杂志, 2002, 6(4): 367-368. DOI:10.3969/j.issn.1672-2353.2002.04.042 |
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Huber R, Braselmann H, Bauchinger M. Screening for interindividual differences in radiosensitivity by means of the micronucleus assay in human lymphocytes[J]. Radiat Environ Biophys, 1989, 28(2): 113-120. DOI:10.1007/BF01210295 |
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高梅兰, 侯殿俊, 乔建维, 等. 692例放射工作人员健康调查分析[J]. 中国辐射卫生, 1998, 7(3): 175-177. |