六珍双抗胶囊是由玉米花粉、钝顶螺旋藻、拟黑多刺蚂蚁、刺玫果、五味子、西洋参六种原料制成的一种保健品, 据有关报道^{[1 ~ 5]}, 花粉、钝顶螺旋藻、刺玫果、人参多糖、人参皂甙等均有不同程度的抗辐射功效, 为验证其合剂的抗辐射功效, 我们做了小鼠微核及睾丸染色体畸变实验。

1 材料和方法 1.1 样品

六珍双抗胶囊内容物为黑褐色粉末, 由济南凯丰食品有限公司提供, 生产批号为20001206。实验前将样品加入普通饲料原料中配成三种剂量规格的小鼠专用饲料。

1.2 实验动物

选用中国医学科学院实验动物研究所繁殖场提供的昆明种(北京市医动字01 -3001号)健康雄性小鼠, 体重25~30 g。将小鼠随机分为辐射对照组, 低、中、高剂量组, 每组11只。

1.3 六珍双抗胶囊剂量选择

该样品人体推荐量为每人每日1.80 g, 相当于每日0.03 g/kg体重。按小鼠的等效剂量为人体推荐量的10倍(即每日0.3 g/kg体重)作为中剂量, 30倍(即每日0.9 g/kg体重)作为高剂量, 5倍(0.15/kg体重)作为低剂量。

1.4 主要实验材料

Olympus显微镜, 离心机, 小牛血清, 载玻片, Giemsa染液, 甲醇, 氯化钾。

1.5 实验方法

辐射对照组喂普通饮食, 实验组分别饲喂含低、中、高剂量六珍双抗饲料; 各组自由进食, 饮自来水。连续喂养92 d。

1.5.1 小鼠骨髓细胞微核试验

照射总剂量为小鼠半数致死剂量7 Gy的1/2, 即3.5 Gy。每天照射一次, 连续92 d, 剂量率为38 mGy/d。实验结束时以脱臼法处死小鼠, 取胸骨骨髓涂片, 固定, 染色, 镜检。每只动物计数1 000个嗜多染红细胞中微核细胞数, 微核率以千分率表示。

1.5.2 小鼠睾丸染色体畸变实验

照射累计剂量和时间同微核试验。小鼠处死前6 h腹腔注射秋水仙素6 mg/kg体重。以脱臼法处死小鼠后取两侧睾丸, 在盛有0.4%氯化钾溶液的平皿中剪开被膜, 分离曲细精管, 室温下低渗20 min。加固定液固定20 min, 然后加2 m1 60 %冰醋酸软化, 软化后立即加入倍量固定液以1 000 r/min离心10 min, 弃去上清液制成细胞混悬液, 均匀滴以冰水玻片上, 空气干燥后用1:10 Giemsa液(pH6.8)染色20 min。计数染色体畸变的百分率。

1.6 实验数据统计

微核试验所得数据采用泊松分布进行统计; 睾丸染色体畸变实验用Kastenbaum和Bowman的方法进行处理。

2 结果与分析 2.1 预实验

为防止六珍双抗胶囊本身的毒性作用对本实验造成假阳性结果, 我们对本产品预先做了小鼠饲喂实验, 小鼠急性毒性试验以及三种遗传毒性试验。实验结果经统计学分析, 从体重、血生化等指标看小鼠生长发育良好, 急性毒性试验得出本品小鼠的LD₅₀>10 g/kg体重, 属实际无毒物, 遗传毒性试验结果均为阴性。

2.2 小鼠微核试验

按照上述方法进行实验结果见表 1。

由表 1可见, 经口给予小鼠不同剂量六珍双抗药物92 d, 中、高剂量组小鼠微核率比对照组低, 差异有显著性(P < 0.01), 可以认为六珍双抗胶囊对于辐射诱发小鼠骨髓细胞微核有一定的拮抗作用。

2.3 睾丸染色体实验

六珍双抗胶囊对辐射诱发小鼠睾丸染色体畸变实验的影响见表 2。

由表 2可见, 经口给予小鼠不同剂量六珍双抗药物92 d, 高剂量组小鼠睾丸染色体畸变率比对照组低, 差异有显著性。

3 讨论

花粉具有较高的营养价值, 而且花粉可以消除电离辐射造成的自由基、LPO等, 从而产生抗辐的功效^[1]。钝顶螺旋藻多糖及蛋白是钝顶螺旋藻抗辐射的主要功效物, 它可以促进受射线照射小鼠的造血功能的恢复^[2]。刺玫果中含有的黄酮类化合物、氨基酸等物质也有一定的抗辐射、抗衰老作用^[3]。人参多糖及人参皂甙可以调节受射线照射动物的免疫功能, 并可防止辐射对细胞膜的脂质过氧化作用, 从而达到抗辐射功效^{[4, 5]}。五味子及拟黑多刺蚂蚁的提取物中的黄酮及蛋白质类物质也有减少细胞中的脂质过氧化物、自由基等, 从而也具有一定的抗氧化作用^{[6, 7]}。

根据卫生部卫生监督司《保健食品功能学评价程序和检验方法》中规定的结果判定标准, 本产品的实验组与对照组比较, 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和睾丸染色体畸变率均显著降低, 因此可以认为六珍双抗胶囊具有抗辐射作用。