人白介素-2(NIL-2)是调节免疫功能参与造血调控的淋巴因子, 它能促进T细胞生长、增殖、分化、促进诱导其它淋巴因子(IFNr、TNF、GSF等)提高NK细胞活性^{[1, 2]}。是目前比较理想的免疫调节剂。临床用于抗肿瘤治疗时, 发现对免疫功能低下病人的淋巴细胞转化率和EPFC百分率有不同程度提高。

机体受射线照射后, 免疫及造血系统受到不同程度的破坏, 人白介素-2抗辐射的造血调控未见报道, 本文就NIL-2对照射小鼠造血损伤的作用做了初步观察。

1 材料与方法 1.1 小白鼠

实验用7~8周龄的昆明种健康小鼠, 体重20~ 40克, 雄性, 实验前3~5天从繁殖场购进实验室, 制式塑料盒饲养, 每盒5~6只食混合饲料, 饮自来水。

1.2 照射

江苏农科院原子能所⁶⁰Co γ射线照射源与动物中心距离100cm, 剂量率0.46Gy/分, 照射剂量7~8Gy

1.3

人白介素-2(NIL-2)注射液, 系本所研制。预防组照前72、48、24小时, 治疗组照后6、24、48、72小时给药, 防治组照前后均给药, 每次小鼠腹腔注射0.3毫升, 内含NIL-2 150u, 对照组给等体积注射用水。

1.4

脾脏称重及脾造血灶(CFU-S)观察用14~16g幼鼠, 照后第九天活杀, 取出脾脏剔去表面附着组织, 称湿重, 固定于Bouin氏液24小时后, 用18 ×解剖显微镜观察脾脏表面的造血结节数。

1.5 外周血白细胞计数

照后6、9天从小鼠眼底静脉丛取血, 计数白细胞。

1.6 骨髓有核细胞计数

照后第9天活杀小鼠, 取出右侧股骨剪取中段0.7cm, 用白细胞稀释液冲出全部骨髓, 打碎、混匀镜下观察有核细胞数。

2 结果 2.1 NIL-2对照射小鼠活存率的影响

治疗组活存率高于对照组, 但预防组与防治组动物活存率与对照组相同, 动物平均活存天数各组无明显不同。治疗组可提高活存率36.4%, 经统计学处理, 差别非常显著(P＜0.01)(见表 1)

2.2 NIL-2对照射小鼠脾脏重量和脾造血灶(CFU-S)的影响

照后第9天治疗组、防治组脾重略高于对照组, 而脾造血灶集落数3个给药组高于对照组2~3倍, 差别非常显著(P＜0.01), 初步表明NIL-2对促进造血干细胞增殖、分化的能力, 有促进造血组织恢复作用(见表 2)。

2.3 NIL-2对照射小鼠外周血白细胞数的影响

治疗组、防治组照后第6、9天与对照组比较, 白细胞总数差别非常显著(P＜0.01)(见表 3)

2.4 NIL-2对照射小鼠骨髓有核细胞保护作用

照后第9天骨髓有核细胞计数给药3个组均高于对照组, 尤其治疗组、防治组增高比较明显, 差别显著及非常显著(P＜0.05、P＜0.01)(表 4)

3 讨论

NIL-2是一种糖蛋白、分子由133个氨基酸组成, 蛋白部分的分子量为15500, 在NIL-2的一级结构中有3个Cys, 分别位于58、105、125位其中Cys58、Cys105位之间, 形成二硫键, 此S-S键对NIL-2的活性有很大影响。

NIL-2的发现并确定为淋巴激素^[2]。能促进T淋巴细胞增殖, 是B细胞生长成熟的必要因子, 能诱导机体产生LAK细胞、细胞T细胞, 增强NK细胞活性和增加IFN-r的产生, 提高机体免疫能力及参与造血调控^[1]。

在NIL-2作用下, T细胞从G₁期进入S期从分裂增殖, 至于NIL-2与T细胞上NIL-2R结合后是如何将增殖信号传至胞核最终使T细胞从G₁期进入S期的具体机理, 目前虽研究颇多, 但仍不十分清楚。

实验结果表明NIL-2对照射小鼠造血损伤有一定的修复作用。表现在小鼠脾造血集落、外周血白细胞数、骨髓有核细胞计数的3个给药组均高于对照组, 差别显著或非常显著。治疗组提高小鼠活存率36.4%, 动物平均活存天数各组无明显不同。肿瘤临床表明, 在放疗同时应用NIL-2时, 可使病人白细胞、血小板有不同程度的升高^[3], 这与本实验一致。对免疫功能低下的病人, 可使其淋巴细胞转化率和EPFC的百分率提高^[4]。由于本次实验动物数量较少, 有些结论有待进一步验证和深入研究。