辐射对生物效应的影响, 主要与辐射剂量、机体敏感性以及环境因素有关, 本文探讨大鼠冷适应后照射对外周血和微核率的变化。

1 材料和方法 1.1 动物及分组

Wistar大鼠, 购自中国医科大学, 体重180~230g, 按体重随机分为4组, 每组10只: ①常温组, 在常温下饲养不照射; ②寒冷组, 动物在寒冷下适应14天后移至常温, 不照射; ③常温照射组, 在常温下饲养与④组同时照射相同量; ④寒冷照射组, 动物在寒冷条件下适应14天后照射4.5Gy, 并继续在寒冷下维持4h再移至常温饲养, 以上各组均观察30天。

1.2 方法 1.2.1 冷适应方法

用国产阪神冰柜, 温度调至-1 ~5℃。动物在实验室适应后分组, ①、③组置常温(20~28℃)下, ②、④组置于冰柜中。冰柜中动物笼每两天上下对换一次, 以求条件一致。以上各组动物均自由进食水。

1.2.2 照射

由本所钴源照射室完成, 剂量率为1.39Gy/min。

1.2.3 外周血指标测定

从照射组动物照射时记起。4组动物于照后当天、4、7、14、21、28天每组取5只由眼内眦动脉用内径0.5~1mm薄壁玻璃管引流0.5~1ml血抗凝作白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、淋巴细胞绝对值(LYa)和百分比(LYp)、血红蛋白(Hb)、红细胞比积(Hct)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)的测定。测定采用COULTER-T-540型(美国产)全自动血细胞计数仪。

1.2.4 外周血淋巴细胞微核(MN)测定

采用胞质分裂阻断微核法^[1]。取大鼠眼内眦动脉无菌抗凝血0.3ml加入细胞培养瓶中, 培养40h, 加G yt-B, 再培养至70h, 离心去上清液后加入0.75ml氯化钾低渗液, 低渗后离心, 沉淀物加固定液(甲醇:冰醋酸=3: 1), 制片, Gimsa染色, 镜检。用微核数除以双核CB细胞数得微核率, 以千分数表示。

2 结果 2.1 对WBC计数和L Ya的影响

4组大鼠照后WBC及LYa的变化见图 1、图 2。

图 1表明常温组和寒冷组动物外周血W BC在观察期间内一直稳定在正常值范围内。常温照射和寒冷照射组照后第4天WBC降到了最低值, 分别为(0.63 ±0.01)×10⁹/L、(0.66 ±0.27)×10⁹/L, 照后第7天均出现回升, 两组分别升到(1.70 ±0.61)× 10⁹/L、(3.05 ±0.49)×10⁹/L, 寒冷照射组升幅较大; 照后第28天两组分别达到(6.56 ±0.91)×10⁹/ L、(13.85±3.14)×10⁹/L, 寒冷照射组外周血WBC要比常温照射组高出1倍左右。图 2中这两组大鼠LYa也呈现了同样的结果。而LYp指标的结果在这几组中未见到相似的变化。

2.2 对RBC和PL T计数的影响

常温组外周血RBC一直保持在(601 ±59)×10¹²/L至(801 ±84) ×10¹²/L, 寒冷组在(628 ±53)×10¹²/L至(895 ± 66)×10¹²/L。照后第7、14天, 常温照射组分别降到(445 ±101)×10¹²/L、(434 ±17)×10¹²/L, 寒冷照射组在相同时间点上降到(690 ±30)×10¹²/L、(509 ±47)×10¹²/L, 这表明常温照射组比寒冷照射组照后的RBC降低较多。同样常温照射组和寒冷照射组外周血PL T也有相似的变化。

2.3 对Hb的影响

见图 3。

常温照射组Hb到照后第7天降到低值82.8 ± 18.4g/L, 照后第14到28天逐步回升; 寒冷照射组第7天降到117.4 ±14.4g/L, 第14天降到98.0 ± 8.7g/L, 第21到28天回升。寒冷照射组最低值出现时间比常温照射组推迟1周, 而且回升速度相对较快。

2.4 对Hct、M CV、M CH、M CHC的变化

常温照射组Hct照后开始减少, 第7天由照前的0.37 ±0.03降到0.21±0.04。寒冷照射组照后第14天降到最低值0.28±0.02, 21天回升, 第28天回升到原来的80%。

常温照射组和寒冷照射组照后第4天M CV略有降低, 而后又回升, 同前两组相比数值上没有显著的差别。

常温照射组和寒冷照射组与常温组和寒冷组相比也未观察到M CH、M CHC明显的变化。

2.5 对M N的影响

见附表

从不同组别和照后不同天数测定结果看, 常温组和寒冷组外周血MN稳定一致, 计数1000个双核细胞有7~9个微核细胞。常温照射组和寒冷照射组在照后14天内3次测定各1000个双核细胞中分别有34, 52, 55、30, 38, 44个微核细胞, 同前两组相比有明显差异(P < 0.01), 而这两组之间, 虽然寒冷照射组要比常温照射组MN个数少, 但统计学上无差异。

3 讨论

寒冷低温环境通常使机体放射敏感性降低, 称为温度效应或冰冻效应, 这可能是机体代谢变慢所致。黄岩等^[2]最近报告鼻腔疾病放疗时含冰块会使口腔疼痛发生耐受剂量提高, 但很少见到从血液指标来说明这一问题。本文观察到大鼠在-1~5℃下冷适应14天后再受照射要比常温饲养受照射后WBC、Hb等下降少恢复快的现象, 提示冷适应使机体对射线增强了抵抗力, 降低了敏感性。尹旭辉等^[3]报道冷适应过程中机体免疫系统的作用在受冷开始后1周内降低, 2~3周增高。本文结果, 或许对核辐射病人的救治和临床放疗有一定的提示意义。