小剂量电离辐射的免疫増强效应已为国内外学者所证实，但其对肿瘤影响的报道尚不多见。本文用小剂量(75mGy)X线全身照射小鼠24小时后观察其脾细胞在体内对肿瘤生长和转移的影响，并对其机制作了初步探讨，为小剂量电离辐射进一步研究及应用提供实验依据。

1 材料与方法 1.1 动物与肿瘤：

C₅₇BL/6小鼠，雌雄兼用6~8周龄，18~20克，本校实验动物中心提供。Lewis肺癌，购自上海药研所，用同系小鼠皮下传代保种。

1.2 照射条件：

Sikmes深部X线治疗机，200kV，10mA，0.5mmCu+ 1 mmAl照射距离245.5mm，剂量率为12.5 Gy/min，照射6分钟。

1.3 脾细胞体内抑瘤试验：

无菌条件下分别取照射组及未照射组(对照组)鼠脾脏，经200目尼龙网磨碎制成单细胞悬液，用D-Hank’s液离心(1500rpm × 5 min)洗3次，调成4 × 10⁸个/ml活细胞悬液备用，另取LLC瘤块，用消化液(0.25%胰酶+ 0.04%EDTA)消化经200目尼龙网过滤制成单细胞悬液，用D-Hank's液离心(同前)洗3次，调成8 × 10⁸个/ml活细胞悬液备用。分别取照射组及对照组鼠脾细胞与LLC细胞等体积混合，再分别注入两组C₅₇ BL/6小鼠足掌(照射鼠脾细胞+ LLC细胞为受照组，未照射鼠脾细胞+ LLC细胞为对照组)，按2×10⁷个脾细胞+ 4×10⁵个LLC细胞/0.1ml/鼠注射。每隔2天用测微仪侧足掌原发瘤长径(a表示)、短径(b表示)，按0.4ab²计算瘤体积，LCC注射后26天杀鼠取瘤测量并称重，另取肺用Bouin's液固定24小时，解剖显微镜下计数自发肺转移结节。

1.4 脾细胞对ConA刺激转化率测定：

用³H-TdR (7.4×10¹¹Bq，购自北京原子能研究院同位素研究所)掺入法^[1]。用cpm表示。

1.5 NK细胞活性检测：

用LOH释放法^[2]测定NK细胞对YAC-1 (购自上海细胞所)杀伤率来表示，效靶比为50: 1。

1.6 实验数据均用t检验。 2 结果 1.1 受照小鼠脾细胞对LLC生长的影响

实验发现脾、瘤细咆混合注射后20天与26天时受照组原发病的体积明显小于对照组，26天时原发瘤重量也明显低于对照组(P < 0.05)(见表 1)。

1.2 受照鼠脾细胞对LLC自发肺转移的影响

LLC注射后26天，受照组自发肺转移结节数明显低于对照组，但转移率无明显差异。(见表 2)。

1.3 低剂量X射线照射对小鼠脾细胞ConA刺激转化率及NK细胞活性的影响。

小鼠受照后24小时，其脾细胞对ConA刺激转化率明显高于对照组，NK细胞活性也明显增强(P < 0.01)(见表 3)。

3 讨论

人类生存不可避免地接受慢性小剂量电离辐射，其对人体的影响，尤其是与肿瘤的关系一直是人们重视的课题。早在1915年Murphy的实验就证实低剂觉全身照射小鼠对移植瘤表现出较大的抵抗力；Anderson^{[3, 4]}也有同样的实验结论，我国也发现广东高本底地区肿瘤标化死亡率明显低于对照地区，且肝、肺癌发生率也较低^[5]。

本室进行一系列研究发现低剂量X射线全身单次照射小鼠，对其移植瘤生长和转移有明显抑制作用(另行报道)。木研究表明小鼠接受75mGyX线照射后24小时，其脾细胞在同系小鼠体内明显抑制肿瘤生长和转移。进一步实验表明小鼠受照后其脾细胞内T细胞转化能力增强，NK细胞活性明显提高。由此，本实验中低剂量X线对小鼠脾细胞体内抑瘤功能的影响可能主要通过T细胞、NK细胞功能增强来实现的。

T淋巴细胞、NK细胞及单核巨噬细胞是机体抗肿瘤的主要细胞。国内外学者证实：小剂量电离辐射可明显提高小鼠细胞免疫功能^{[6, 7, 8]}。本文受照小鼠24小时后的脾细胞与Lewis肺癌细胞混合注入同系C₅₇BL/6小鼠足掌，可能脾细胞内功能増强的T细胞(尤其是溶细胞性T细胞对实体瘤杀伤能力更强^[9])及NK细胞杀伤大量LLC细胞表现出LLC原发瘤生长明显受抑。

LLC自发肺转移主要与机体NK细胞活性有关^[10]。本实验中两组荷瘤小鼠NK细胞活性应无明显差异，但混有受照鼠的脾细胞的LLC自发肺转移明显低于未受照鼠的脾细胞组。此可能由于受照鼠脾细胞LLC原发瘤生长较小，较少可能有很多LLC细胞通过淋巴道、血道在肺内形成自发肺转移^{[11, 12]}，表现为肺转移结节明显减少。转移率差异不显著，可能与样本量少有关，日本的坂本也证明0.1Gy照射的小鼠免疫功能有所提高，且有预防肿瘤转移的作用^[13]。

总之，低剂量照射使小鼠脾细胞内T细胞、NK细胞功能增强；使脾细体内对肿瘤抵抗作用增强，从而起抑制肿瘤的生长和转移的作用。