药学学报  2015, Vol. 50 Issue (6): 746-748   PDF    
引用本文
SHEN Sheng-nan, XIA Fang-bo, LI He, LIU Ya-min, PAN Rui-le. A new cyclic diarylheptanoid from the bark of Myrica rubra[J]. Acta Pharm Sin, 2015, 50(6): 746-748.  
沈胜楠, 夏方博, 李鹤, 刘亚旻, 潘瑞乐. 杨梅树皮中一个新的二苯基庚烷类化合物[J]. 药学学报, 2015, 50(6): 746-748.  
杨梅树皮中一个新的二苯基庚烷类化合物
沈胜楠, 夏方博, 李鹤, 刘亚旻, 潘瑞乐     
中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所, 北京 100193
收稿日期: 2015-01-04;修回日期: 2015-01-29.
基金项目：国家重大新药创制项目资助项目 (2012ZX09101, 2012ZX09301002-001)
* 通讯作者：rlpan@implad.ac.cn
摘要：采用正相硅胶、Sephadex LH-20和制备液相等多种色谱方法从杨梅树皮甲醇提取物中得到14个化合物, 并通过化合物的理化性质和UV、IR、NMR、MS等波谱数据进行结构鉴定, 得到二苯基庚烷类化合物4个、黄酮类化合物3个、三萜及甾醇类化合物7个, 它们分别是: 3, 5-二甲氧基-4-羟基杨梅醇 (1)、杨梅醇 (2)、杨梅酮 (3)、myricanol 11-sulfate (4)、杨梅苷 (5)、槲皮素 (6)、槲皮苷 (7)、柽柳醇 (8)、熊果醇 (9)、熊果酸 (10)、蒲公英赛醇 (11)、杨梅萜二醇 (12)、β-谷甾醇 (13) 和β-胡萝卜苷 (14).其中1为新化合物, 化合物8和9为首次从该属植物中分离得到.
关键词： 杨梅     化学成分     二苯基庚烷     3, 5-二甲氧基-4-羟基杨梅醇    
A new cyclic diarylheptanoid from the bark of Myrica rubra
SHEN Sheng-nan, XIA Fang-bo, LI He, LIU Ya-min, PAN Rui-le     
Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100193, China
Abstract: To study the chemical constituents from the bark of Myrica rubra, fourteen compounds were isolated from the methanolic extract using various chromatographic techniques, including silica gel, Sephadex LH-20 and preparative HPLC. Their structures were identified on the basis of chemical properties and spectroscopic data, as 3, 5-dimethoxy-4-hydroxymyricanol (1), myricanol (2), myricanone (3), myricanol 11- sulfate (4), myricitrin (5), quercetin (6), quercetin-3-rhamnoside (7), tamarixol (8), uvaol (9), ursolic acid (10), taraxerol (11), myricadiol (12), β-sitosterol (13) and β-daucosterol (14). Among them, compound 1 is a new compound, named as 3, 5-dimethoxy-4-hydroxymyricanol, compounds 8, 9 were isolated from the genus Myrica for the first time.
Key words: Myrica rubra     chemical constituent     diarylheptanoid     3, 5-dimethoxy-4-hydroxymyricanol    

杨梅 (Myrica ruba (Lour.) Sieb.et Zucc.) 系杨梅科杨梅属植物,常绿乔木,主产于江苏、浙江、台湾、江西、湖南、贵州、四川、广西和广东等省,日本、朝鲜和菲律宾也有分布[1]。树皮味苦、性温,具有散瘀止痛、止血的功效,在我国民间常用作收敛剂,治疗烧烫伤及皮肤病等,在日本传统医药中被用作解毒剂和止泻药物[2]。现代研究表明杨梅树皮提取物具有抗氧化[3]、心血管保护[4]、抗肿瘤[5, 6]、神经细胞保护[7]等多种活性。杨梅树皮主要含有黄酮[6,7,8]、二苯基庚烷[6, 7, 9]以及三萜类[6, 7]成分,为了进一步阐明杨梅树皮具有各种生物活性的物质基础,本文采用多种色谱技术从杨梅树皮甲醇提取物中得到14个化合物,并通过化合物的理化性质和NMR、MS等波 谱数据进行结构鉴定,其中二苯基庚烷类化合物4个、黄酮类化合物3个、三萜及甾醇类化合物7个,分别为: 3,5-二甲氧基-4-羟基杨梅醇 (1)、杨梅醇 (2)[6]、杨梅酮 (3)[6]、myricanol11-sulfate (4)[9]、杨梅苷 (5)[10]、槲皮素 (6)、槲皮苷 (7)[8]、柽柳醇 (8)[11]、熊果醇 (9)[12]、熊果酸 (10)[13]、蒲公英赛醇 (11)[14]、杨梅萜二醇 (12)[14]、β-谷甾醇 (13) 和β-胡萝卜苷 (14)。其中化合物1为新化合物,化合物8、9为首次从该属植物中分离得到。

结果与讨论

化合物1白色无定形粉末,易溶于甲醇。10% 硫酸乙醇溶液显紫色,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性,提示结构中存在酚羟基。HR-ESI-MS给出其准分子离子峰 [M+Na]+ 峰m/z: 381.166 7,确定其分子式为C21H26O5。红外光谱中νmax 3 350、2 934、1 614、1 587、1 505 cm-1处有强吸收,提示结构中可能存在一个羟基化的芳香环系统; 紫外光谱中在214 (logε 4.1)、259、297 nm有最大吸收,提示为联苯型二苯基庚烷类化合物[6]。1H NMR (600 MHz,CD3OD) (表 1) 显示分子中有两个甲氧基质子信号: δH 3.89 (3H,s)、3.85 (3H,s); 4个芳基质子信号δH 7.15 (1H,d,J = 1.8 Hz)、7.02 (1H,dd,J = 1.8,8.4 Hz)、6.83 (1H,s)、6.79 (1H,d,J = 8.4 Hz),其中苯环B上有一组ABX自旋系统质子信号: δH7.15 (1H,d, J = 1.8 Hz,H-18)、7.02 (1H,dd,J = 1.8,8.4 Hz,H-15)、6.79 (1H,d, J = 8.4 Hz,H-16),苯环A上有一组单芳香氢信号: δH6.83 (1H,s,H-19); 13C NMR(150 MHz,CD3OD) 谱显示结构中存在21个碳信号,包括两个甲氧基信号δC 61.9、61.7; 12个芳香碳信号δC152.9 (C-17)、150.5(C-4)、148.6 (C-5)、141.2 (C-3)、134.8 (C-18)、132.1 (C-14)、130.8,130.6 (C15,19)、126.8 (C-1)、124.6 (C-2)、124.2 (C-6)、117.5 (C-16) 和一个7碳脂肪链δC 69.4 (C-11)、40.7 (C-10)、35.8 (C-12)、28.2 (C-13)、27.2 (C-7)、26.8 (C-8)、24.3 (C-9),且其波谱数据与杨梅醇 (化合物2) 非常相似[6],根据HR-ESI-MS结果m/z 381.166 7 [M+Na]+ 推断其分子式为C21H26O5与杨梅醇 (化合物2) 相同,不同之处仅在于化合物1和2的结构在苯环A上的取代基顺序不同。比较化合物1与化合物2的13C NMR谱数据,δC (C-3、C-4、C-5) 向低场移动 (+δC 4.8)。HMBC谱显示 (图 1),δH 6.83(1H,s,H-19) 与δC 148.6 (C-5)、141.2(C-3) 存在相关,δH 2.53 (1H,m,H-7) 与δC 148.6 (C-5) 存在相关,δH 3.89(3H,s,5-OCH3) 与δC148.6 (C-5) 存在相关; δH3.85 (3H,s,3-OCH3) 与δC 141.2 (C-3) 存在相关,提示化合物1的C-4位为羟基取代,C-5为甲氧基取代。进一步分析HMBC谱发现,提示该结构的B环为ABX系统,且C-17位存在羟基取代。另根据化合物1的比旋光度[α]20 D = -89.2 (c2.65,CHCl3) 与杨梅醇 (化合物2) [α]20 D = -65.6 (3.0,CHCl3)[9]相似,可确定化合物1中C-11的绝对构型为R。综合以上信息,最终确定化合物1的结构为3,5-二甲氧基-4-羟基杨梅醇,该化合物为一新化合物。

Table 1 NMR spectral data ofcompound 1 in CD3OD (600 MHz for 1H and 150 MHz for 13C)

Figure 1 Structure and key HMBCcorrelations of compound 1
实验部分

Bruker AM-600型核磁共振仪 (德国Bruker公司); LTQ-Obitrap XL质谱仪 (美国Thermo公司); 正相色谱用硅胶、薄层色谱硅胶板GF254(青岛海洋化工厂); SephadexLH-20凝胶 (美国GE公司); 中压液相色谱仪 (美国Waters公司); 分析纯试剂均购买自北京化工厂,色谱纯试剂均购买自Karl Fischer。

药材杨梅树皮于2012年9月购于宁波德康生物制品有限公司,经中国医学科学院药用植物研究所张本刚教授鉴定为杨梅科杨梅属植物杨梅 (Myrica ruba (Lour.) Sieb. et Zucc.) 的干燥树皮。

1 提取分离

干燥的杨梅树皮6 kg经甲醇提取后,浓缩得到总浸膏400 g,得率为6.67%,将其与100～200目硅胶拌样,依次用二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱,收集洗脱液,60 ℃以下减压浓缩得到3个部分,对其中2个部分进行系统分离。二氯甲烷部分(47.7 g) 经正相硅胶色谱柱分离,石油醚-乙酸乙酯 (50∶1→0∶1) 梯度洗脱,以TLC硅胶G板检查,合并相同流分,得到6个组分 (Fr.1～6)。Fr.1 (6.7 g) 经正相硅胶色谱柱分离,石油醚-乙酸乙酯 (50∶1→10∶1) 不同比例洗脱,经石油醚-乙酸乙酯重结晶,得化合物11 (565 mg)、13 (20 mg)。Fr. 2 (5.2 g) 经正相硅胶色谱柱分离,石油醚-乙酸乙酯 (50∶1→0∶1)洗脱,再经多次硅胶柱分离,得到化合物8 (11 mg)、9 (24 mg)、12 (823 mg)、10 (32 mg)。Fr. 4 (30.6 g) 经正相硅胶色谱柱分离,石油醚-乙酸乙酯 (15∶1→0∶1)洗脱,再经多次硅胶柱分离,Sephadex LH-20凝胶、制备色谱分离纯化得到化合物1 (24 mg)、2 (543 mg)、3 (375 mg)。Fr.6 (3.0 g) 经正相硅胶色谱柱分离,石油醚-乙酸乙酯 (10∶1→2∶1)不同比例洗脱,得到化合物4 (234 mg)、14 (20 mg)。乙酸乙酯部分 (128.8 g) 经正相硅胶色谱柱分离,乙酸乙酯-甲醇 (50∶1→ 2∶1)(含1% 乙酸) 梯度洗脱以TLC硅胶G板检查,合并相同流分,得到4个组分 (Fr. 7～10)。Fr.7 (3.2 g) 经正相硅胶色谱柱分离,不同比例二氯甲烷-甲醇 (20∶1→0∶1)洗脱,再经Sephadex LH-20凝胶、制备色谱分离纯化得到化合物7 (68 mg)。Fr.8 (46.4 g) 经聚酰胺柱色谱,不同比例水-甲醇 (10∶1→0∶1)梯度洗脱,再经Sephadex LH-20凝胶、制备色谱分离纯化得到化合物5 (36.8 g)、6 (3.2 g)。

2 结构鉴定

化合物1 白色无定形粉末 (甲醇),[α]20 D = -89.2(c 2.65,CHCl3); UV (MeOH) λmaxnm (logε)214 (4.1); IR (KBr) νmax 3 350、2 934、1 614、1 587、1 505、1 495、1 456、1 408、1 231 cm-1。HR-ESI-MS m/z 381.166 7 [M+Na]+,确定化合物1的分子式为C21H26O5。1H NMR (600 MHz,CD3OD) 和13C NMR (150 MHz,CD3OD) 数据见表 1。

参考文献
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