2015, Vol. 50
心血管疾病对人类健康的危害性已经显得越来越严重[1, 2]{,#3}。近年来,对心血管疾病的发病机制和防治措施的研究虽然有了很大的进展,但是仍然有许多问题未得到很好的解决[3]。例如,某些抗心律失常药虽能有效地消除室性心律失常,但长期使用这些药物并不能改善伴有室性心律失常的心肌梗死病人的预后,甚至使其恶化; 强心药虽能改善心力衰竭病人的心脏功能,但它既不能改善心力衰竭病人的预后,也不能降低死亡率[3, 4]。这些问题的存在,说明以往心血管疾病的治疗策略尚需要改进和更新,更重要的是需要研究者们提出新的防治策略。
心脏的正常生理功能是在交感神经和副交感神经的精密控制下完成的。心脏迷走神经通过刺激毒蕈碱型乙酰胆碱受体 (muscarinic acetylcholine receptor,mAchR,M受体) 调节心脏的收缩、兴奋和传导功能[3]。M受体存在于多种器官组织,目前已克隆出M1、M2、M3、M4和M5五个亚型[5]。M受体亚型的分布具有组织特异性,随着科学的发展进步,已经证实心肌存在多种M受体亚型,纠正了以往认为心肌组织只存在M2受体这个观点,这种多种亚型共存的观点合理地阐明了心肌M2受体所无法解释的功能[6]。心肌M受体中以M3受体的发现最具代表性,尤其是近年来研究发现,激动M3受体不仅具有负性肌力和负性频率的作用,还可以介导一种新型钾电流,并且在心衰、心律失常等疾病的发生发展中起到了重要的作用。最新研究表明,激动M3受体能够很好地防治心源性猝死,对心肌起到重要的保护作用[7]。
1 心肌M3受体的发现Jaiswal等[8]首次在1989年发现M3受体拮抗剂可抑制家兔心肌组织中乙酰胆碱对前列腺素合成的促进作用,提示哺乳动物心肌上存在M3受体; 1999年,有学者应用全细胞膜片钳技术发现匹鲁卡品在犬心室肌细胞激活了一种新的不同于M2受体介导的电流[6]。进一步研究表明,这是一种新型的延迟整流钾电流,并且能够被M3受体阻断剂4-DAMP和p-F-HHSiD特异性阻断,但不能被其他M受体阻断剂所阻断,如哌仑西平 (M1受体阻断剂)、美索曲明 (M2受体阻断剂) 及托品酰胺 (M4受体阻断剂)。而且该电流与电压呈线性关系,并将其命名为IKM3,即M3受体激动的延迟整流钾电流[9, 10]。同时发现胆碱 和匹鲁卡品可以显著减慢心率 (heart rate,HR) 和缩短动作电位时程 (action potential duration,APD),而此作用可以被M3受体阻断剂4-DAMP和p-F-HHSiD所抑制,但美索曲明对HR和APD没有影响,这一结果提示激活IKM3电流后,可以减慢HR,缩短APD[10]。Zakharov等[5, 11]的研究,进一步证明该结果的准确性。
2 心肌M3受体的功能 2.1 负性肌力与负性频率作用在发现IKM3电流的研究中,作者在离体水平上证实了激动M3受体可以介导IKM3电流的产生,从而发挥对心脏的负性肌力和负性频率的作用[12]。此外我们还从整体水平入手,阐述了M3受体的生理功能。实验发现,M3受体激动剂胆碱可显著降低大鼠和家兔的HR、等容收缩期心室内压上升的最大速率 (± dp/dt max) 以及左心室收缩压 (left ventricular systolic pressure,LVSP),而M3受体选择性拮抗剂4-DAMP可逆转胆碱的作用,说明激动M3受体可导致心率减慢,心肌收缩力减弱[13]。Abramochkin等[14]指出激动M3受体,通常可以产生负性电生理作用: ① 缩短工作心肌的APD; ② 通过使舒张期除极缓慢而减慢窦性心律,该结果亦证实了本研究组的发现。而后人们又对其机制进行研 究,发现M3受体激动剂胆碱可以激活一种延迟整流钾电流IKM3,导致K+外流,引起心肌细胞膜的超极 化,APD缩短[5]。一方面,心肌细胞膜的超极化可使膜的最大舒张末期复极电位加大,使之与阈电位的距离变大,因而心肌自律性降低,心率减慢; 另一方面,动作电位时程的缩短可导致Ⅱ期平台期缩短,钙离子内流减少,心肌收缩力减弱。
2.2 改善细胞间的传导作用间隙连接蛋白43 (connexin43,Cx43) 是构成心肌细胞间通道和缝隙连接的最基本蛋白质之一,并且在心肌缺血再灌注损伤及闰盘重构过程中起着非常重要的作用[15]。在心肌缺血时,Cx43的表达下调,而M3受体的表达上调; 而预先给予M3受体激动剂后,Cx43的表达没有变化[16, 17]。在M3受体抗心律失常的研究中发现,大鼠心肌细胞单位膜上M3受体与磷酸化的Cx43的结构性与功能性呈共定位关系[17]。以上结果提示,激动M3受体可以改善细胞间的电信号传导,并且该作用可能是通过M3受体与Cx43存在结构和功能性的整合而实现的。
3 M3受体与心血管疾病的关系 3.1 M3受体对心律失常的抑制作用心律失常是心血管疾病中最常见的临床症状,严重的心律失常是导致心源性猝死的重要发病原因。研究发现,在结扎大鼠左冠状动脉前降支建立的缺血性心律失常模型中,预先给予胆碱可减轻心律失常,而M3受体抑制剂4-DAMP可以逆转胆碱的作用,说明了这种抗心律失常作用是通过M3受体产生的[18]。
在明确M3受体能够介导新型延迟整流钾电流IKM3后,作者又对此进行了深入的研究。M3受体激 动剂胆碱及毛果芸香碱均能延迟急性心肌缺血和乌头碱诱导的大鼠室性心律失常的发病时间,因此具有明显的抗心律失常作用,并且能显著延长动物存活时间; 在哇巴因诱导的豚鼠心律失常模型中,使用同样的药物进行干预后,显示的结果与上述相符。在离体水平,分别应用乌头碱及哇巴因处理的大鼠心肌细胞实验显示M3受体激动剂胆碱和毛果芸香碱 均能够通过减少L型Ca2+电流 (ICa-L),降低缺血引起的ICa-L和Na+-Ca2+交换体 (sodium-calcium exchanger,NCX) 的表达上调,逆转细胞内钙超载。此外,在乌头碱/氯化钡诱导的心律失常大鼠模型中,M3受体表达上调,使心脏对乌头碱/氯化钡的敏感性降低,呈现延迟性心肌保护作用[19, 20, 21, 22]。M3受体过表达后,小鼠心肌缺血诱导心律失常的发生率和缺血再灌注损伤后的死亡率显著降低,心室肌细胞的APD90缩短[7]。
以上结果充分表明激动心脏M3受体可以激活IKM3,改善心肌细胞内Ca2+超载,提示M3受体/IKM3是抗心律失常新靶点。此外,最新研究结果表明,卡巴胆碱通过蛋白激酶C (protein kinase C,PKC) 激动人胚胎肾细胞上的M受体,可以增强hERG基因的 表达和功能,而这一现象可以被M3受体特异性阻断剂4-DAMP彻底阻断[23]。而hERG基因编码心脏快速延迟整流钾离子通道Ikr,在心脏动作电位复极化过程中和抗心律失常上发挥重要作用[24]。提示M3受体可能会通过激动心肌上的hERG基因来促进心脏动作电位复极化,从而抑制心律失常的发生。
3.2 M3受体对心肌缺血的保护作用缺血缺氧可以导致心肌细胞损伤,而激动M3受体可以使心率减慢、心肌收缩力减弱以及对抗交感神经的过度兴奋。因此,作者认为这些效应可以通过减少心肌的耗氧量,对缺血心肌产生保护作用[13]。
基于上述观点,作者采取结扎大鼠左冠状动脉前降支造成的急性心肌缺血,观察M3受体激动剂胆碱和M3受体拮抗剂4-DAMP的干预作用。结果表明,胆碱可以提高心肌缺血模型大鼠的血清超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase,SOD) 活力,降低丙二醛 (malondialdehyde,MDA) 含量,减轻氧自由基引起的心肌损伤[25]。外源性H2O2能够诱导大鼠心肌细胞凋亡,而激动M3受体可对抗其诱导的心肌细胞凋亡,使细胞内B淋巴细胞瘤-2基因 (B-cell lymphoma-2,Bcl-2) 生存信号分子增加,使Fas凋亡启动因子降低,Ca2+i下调[25, 26]。因此,M3受体的心肌保护作用部分是通过调节凋亡相关基因实现的。
缺血预适应指反复短暂的心肌缺血对心肌产生保护作用,使心肌对更长时间缺血的耐受性增强。其中热休克蛋白 (heat shock protein,HSP) 70、环氧酶 (cyclooxygenase,COX)-2、β-连环蛋白 (catenin) 和PKC-ε为主要参与者,他们均在细胞的增殖或凋亡中起重要作用; 激活M3受体可通过上调HSP70、COX-2和β-catenin表达,激活PKC-ε,进而减小心肌梗死面积[27, 28]。以上研究表明,M3受体激活具有心肌缺血保护作用。
3.3 M3受体对病理性心肌肥厚的影响心肌细胞Ca2+ 超载或肌浆网Ca2+ 失调均可导致心肌肥厚。而基于激动M3受体可以减轻心肌细胞Ca2+ 超载,作者发现在大鼠横主动脉弓缩窄 (transverse aortic constriction,TAC) 或血管紧张素Ⅱ (angiotensinⅡ,AngⅡ) 诱导的心肌缺血模型中,M3受体表达均上调[18],此结果与应用异丙肾上腺素 (isoprenaline,ISO) 或AngⅡ诱导的乳鼠原代心肌细胞肥大模型中的结果相一致。为了深入研究其机制,作者又采用转基因技术建立的心肌M3受体过表达转基因小鼠和M3受体过表达心肌细胞系,施以相同的实验方法。结果显示,无论是在体还是离体水平,M3受体过表达均能降低心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)和β-肌球蛋白重链 (myosin heavy chain,MHC) 表达水平; 在AngⅡ诱导的心肌肥厚模型中,野生型小鼠的血管紧张素1型受体 (angiotensin type 1 receptor,AT1 R) 表达增加,ERK、c-Jun氨基末端激酶 (c-Jun n-terminal kinase,JNK)、P38 MAPK随之表达增加,而转基因小鼠AT1 R水平没有明显变化,ERK、JNK、P38 MAPK的表达也受到抑制,这些提示M3受体的心肌保护作用可能与下调AT1 R从而抑制MAPK通路有关[29, 30]。
3.4 M3受体在房颤中表达量的改变Wang等[31]在有窦性节律和慢性房颤 (atrial fibrillation,AF) 患者的心房细胞上研究M3受体对乙酰胆碱敏感的钾电流(IKACh) 的影响时发现,IKACh在AF患者上显著增强,并且4-DAMP (10 nmol·L-1) 可较大幅度抑制IKACh (62%),但对于具有窦性节律的健康人的心房细胞的影响只有30%,结果提示M3受体的功能性表达在病理和生理条件下可能存在较大差异。在快速起搏引 起的充血性心衰 (congestive heart failure,CHF) 犬的心肌离体心房细胞上进行Western blotting分析,比较M2和M3受体密度,并用全细胞膜片钳技术检测IKACh和IKM3电流密度 (pA/pF),发现来自CHF犬的心房细胞和正常对照组相比,M3受体密度和IKM3电流密度显著上升[32]。由此可以推测,M3受体在病理 条件下对心肌细胞具有显著的影响作用。
3.5 M3受体具有潜在的抗心力衰竭作用病理性心肌肥厚、心肌纤维化、心律失常以及冠状动脉疾病等均可导致心力衰竭。M3受体调控信号的通路都与这些疾病的发生发展有着密切的联系,但到目前为 止,仅有少数研究揭示M3受体与心力衰竭之间的关系。其中最具代表性的就是Shi等[33]发现M3受体密度和IKM3的电流密度在充血性心力衰竭犬的心房肌细胞上明显增加; Brodde等[34, 35]通过药理学方法直接观察到在大鼠和人心室肌细胞中,激动M3受体可以使肌醇磷酸盐 (inositol phosphate,IP) 形成增加,提示激动M3受体可以增加心肌收缩力。另外有临床报道,M3受体拮抗剂能够改善患者的肺功能,并且可以改善充血性心律衰竭患者的左室舒张末压 (left ventricular end diastolic pressure,LVEDP) 和脑尿钠肽 (brain natriuretic peptide,BNP)[36]。以上证据间接预示着M3受体可能参与心力衰竭的调控,但尚缺乏直接的证据证实M3受体与之相关。
3.6 M3受体在心源性猝死中起着重要作用心源性猝死的重要发病机制为致命性的心律失常和缺血性心脏病,心肌电的不稳定性是其产生的主要电生理学基础。
最新研究揭示,M3受体上调可显著减少心律失常的发生,并降低心肌缺血再灌注引起小鼠的死亡率。并且,可通过增加内向整流钾电流 (IK1) 来加速膜电位的复极化,从而显著缩短动作电位时程。而最新研究证明,这种作用是通过抑制了微小RNA (microRNA,miR)-1的表达来实现的[7],因此也揭示了M3受体调控心律失常发生的重要机制,为防治心律失常所致的心源性猝死提供新思路。
4 M3受体防治相关心血管疾病的分子机制现已知M3受体参与对多种疾病的调控,但是这种对多疾病的调控必然是通过多路径的机制来实现的,所以这其中蕴含的机制也较为复杂,而目前还没有被完全揭示。目前,已知与M3受体和心血管疾病相关的信号分子有很多,而且M3受体调控心血管疾病的机制也已较为确定,这也使其在心血管疾病中的作用得到进一步肯定。而在其他疾病中,由于仍缺乏深入的研究,导致M3受体改善其他疾病的机制并不是十分清晰。但可以肯定的是,这些改善作用都与M3受体的激动或抑制有关。
MicroRNA是调节心脏离子通道功能和表达的重要信使,其中与M3受体密切相关的有miR-1和miR-376b-5p。M3受体过表达可降低miR-1表达水 平,并促进联接蛋白 (connexin) 43和内向整流钾通道Kir2.1表达,并且增加IK1的电流密度[7, 37, 38, 39]。在大鼠心肌缺血模型中,miRNAs微阵列分析结果显示miR-376b-5p表达显著上调[40]。心肌细胞转染miR- 376b-5p会加重H2O2诱导的细胞损伤。M3受体激动剂胆碱可以逆转miR-376b-5p表达上调,同时减轻 心肌缺血损伤,所以M3受体激动剂通过抑制miR- 376b-5p产生心肌保护作用。进一步发现,核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB) 与miR-376b-5p有结合位点并能参与调控miR-376b-5p的表达[40]。此外,研究还发现脑源性神经营养因子 (brain derived neurotrophic factor,BDNF) 为miR-376b-5p的下游靶点,而存在于心肌中的BDNF能防止心肌缺血引起的损伤从而发挥心脏保护作用[41, 42]。因此推断M3受体的心肌保护作用的机制为: M3受体可以通过NF-κB抑制miR-376b-5p来促进BDNF的表达,进而产生心肌保护作用[40]。这为M3受体的心肌保护作用提供了新的分子机制。
分子机制的明确,对于了解和治疗疾病至关重要。在发病机制的各个环节加以控制,这样不仅可以扩大药源,还可以减少不良反应的发生,减少用药风险。激动M3受体后,体内相关信号分子的水平发生改变,从而对相关疾病具有改善作用。
综上所述,M3受体在许多疾病 (如心律失常、心肌缺血、心肌肥厚、房颤、心衰以及其他非心血管疾病[43]) 的发生发展中起到重要的生理功能和病理意义。
5 M3受体转基因鼠和细胞系的建立无论是药物靶标确认,还是新药研发的疗效评价,整体动物实验都是必不可少的[3]。许多激动剂或拮抗剂的选择性不强,是临床上容易导致不良反应发生的原因之一,而同样也会给基础实验研究带来很多困扰。转基因技术的出现,为人类精确地研究基因与疾病的关系提供了可能,而且可以在个体发育的每个阶段中使用任何个体进行遗传功能的分析。因此,这种特殊的模型与传统的模型不同,它们可以直接将疾病与基因相关联,在评价药物疗效的同时,能够确认药物在体内作用的真正分子基础。为此,转基因疾病动物模型的开发和应用已成为疾病和药物研究热点[3, 4]。
目前还没有发现M3受体特异性激动剂或拮抗剂,因此无法排除其他受体的干扰。针对这一问题,作者研究组应用转基因技术,将重组M3受体质粒注入小鼠受精卵的原核中,首次成功建立心肌过表达M3受体转基因鼠,并且建立了稳定过表达M3受体的H9c2细胞系[7, 18]。这为更好地研究心脏M3受体的功能提供了较理想的动物模型和细胞模型,使精确研究M3受体的功能成为可能。而正是因为上述这些研究的贡献,使得我们能够在整体水平上确定M3受体的功能,而且在分子水平上明确M3受体相关药物的作用机制。
6结语与展望虽然相对于主流的M2受体,M3受体在心脏上的分布量非常小,而且其所受到的关注程度和研究程度也并不及前者。但是,M3受体对心脏功能的影响不容小视。不论在细胞表面的电生理水平,还是在细胞内的蛋白水平,M3受体都显示出了至关重要的作用和地位。而且,随着科学技术和实验方法不断地完善,M3受体在心脏上的功能已经从最开始的无人知晓到饱受争议再到现在的日渐明确,而这也足以鼓励研究者们对它的继续探究。
然而,M3受体的研究尚存在局限性: ① 虽然心肌上是否存在M3受体这个争议已经消除,但与M2受体相比,M3受体在心肌的分布数量较少。以往的研究并没有找到M3受体特异性激动剂或阻断剂,虽然有些研究结果可以排除与M2受体相关,但仍不能完全判定其结果一定只与M3受体相关。虽然后续应用转基因技术证实并发现M3受体参与心肌保护的作用及机制,但由于伦理道德的限制以及转基因相关技术尚未完全成熟,要将研究成果迅速有效转化为可在临床实际应用的理论、技术、方法及药物仍有较大的难度; ② 在心血管疾病的研究中,绝大部分研究都只是针对心肌细胞,而对于非心肌细胞的研究较少,忽略了其可能在心脏重塑及纤维化方面的作用; ③ M3受体在体内分布广泛,针对某种疾病防治时,很难避免药物对其他组织器官上的M3受体产生影响而引起的副作用; ④ 转基因技术虽然能够极好地解决以往研究的弊端,但有研究显示,M3受体基因敲除后,其他受体的表达存在变化[44, 45],因此还不能完 全确定这些变化的受体是否参与疾病的调控; ⑤ 与M3受体相关的信号通路复杂多样,目前研究并不十分详尽,其调控疾病的机制仍需更加深入的研究。
尽管M3受体在保护心血管疾病方面的机制已 经较为明了,但是仍有许多相关的尚未探讨的分子机制需要验证和发现,比如microRNA、长链非编码RNA (long noncoding RNA,lncRNA) 等。更重要的 是,未来的研究者们应着重考虑如何将M3受体与转化医学更好地结合起来,从而把研究的理论成果有效地应用到临床上去。比如,研发新的选择性更强的M3受体阻断剂和抑制剂,寻找可以将药物靶向运送至发病组织器官的方法,甚至开发M3受体转基因人造器官。
激动(或抑制) M3受体除了可以对心脏疾病有改善作用,还可以对其他许多疾病产生有效的治疗效果。虽然,这其中的许多机制仍未被阐明,但无论如何,激动 (或抑制) M3受体对于这些疾病的改善作用不可否认。而对M3受体改善其他疾病的机制研究,不仅可以使我们更加全面认识M3受体的功能,还可以对心脏M3受体的功能研究起到启发和借鉴作用,从而为进一步地研究与探讨M3受体对心血管疾病的发病机制提供更完善的理论依据。同时,也为寻找治疗心血管疾病的新的或最佳的靶点,以及开发更加有效的治疗药物和合理的治疗策略,提供了帮助和希望。
| [1] | Yang BF. Pharmacology (药理学) [M]. Beijing: People's Medical Publishing House, 2008. |
| [2] | Behjati M. The concept of Maslow's pyramid for cardiovascular health and its impact on“change cycle”[J]. ARYA Atheroscler, 2014, 10: 65-69. |
| [3] | Liu JT. Current Pharmacology (当代药理学) [M]. Beijing: China Union Medical University Press, 2008. |
| [4] | Wang XL. Practical Molecular Pharmacology (应用分子药理学) [M]. Beijing: China Union Medical University Press, 2005. |
| [5] | Yue P, Lu YJ, Yang BF. Advances in the study of cardiac M3 receptor as a novel target of antiarrhythmic drugs [J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2006, 41: 702-705. |
| [6] | Shi H, Wang H, Wang Z. Identification and characterization of multiple subtypes of muscarinic acetylcholine receptors and their physiological functions in canine hearts [J]. Mol Pharmacol, 1999, 55: 497-507. |
| [7] | Liu Y, Sun L, Pan Z, et al. Overexpression of M3 muscarinic receptor is a novel strategy for preventing sudden cardiac death in transgenic mice [J]. Mol Med, 2011, 17: 1179-1187. |
| [8] | Jaiswal N, Malik KU. Methoctramine, a cardioselective antagonist: muscarinic receptor mediating prostaglandin synthesis in isolated rabbit heart [J]. Eur J Pharmacol, 1991, 192: 63-70. |
| [9] | Wang H, Shi H, Lu Y, et al. Pilocarpine modulates the cellular electrical properties of mammalian hearts by activating a cardiac M3 receptor and a K+ current [J]. Br J Pharmacol, 1999, 126: 1725-1734. |
| [10] | Wang H, Han H, Zhang L, et al. Expression of multiple subtypes of muscarinic receptors and cellular distribution in the human heart [J]. Mol Pharmacol, 2001, 59: 1029-1036. |
| [11] | Zakharov SI, Overholt JL, Wagner RA, et al. Tetramethylammonium activation of muscarinic receptors in cardiac ventricular myocytes [J]. Am J Physiol, 1993, 264: C1625-1630. |
| [12] | Wang H, Lu Y, Wang Z. Function of cardiac M3 receptors [J]. Auton Autacoid Pharmacol, 2007, 27: 1-11. |
| [13] | Liu Y, Wang Y, Ma ML, et al. Cardiac-hemodynamic effects of M3 receptor agonist on rat and rabbit hearts [J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2001, 36: 84-87. |
| [14] | Abramochkin DV, Tapilina SV, Sukhova GS, et al. Functional M3 cholinoreceptors are present in pacemaker and working myocardium of murine heart [J]. Pflugers Arch, 2012, 463: 523-529. |
| [15] | Wei Z, Zhong G. Gap junction protein 43 and arrhythmia correlation research progress [J]. Guangxi Med J (广西医学), 2009, 31: 865-868. |
| [16] | Yue P, Zhang Y, Du Z, et al. Ischemia impairs the association between connexin 43 and M3 subtype of acetylcholine muscarinic receptor (M3-mAChR) in ventricular myocytes [J]. Cell Physiol Biochem, 2006, 17: 129-136. |
| [17] | Zhao J, Su Y, Zhang Y, et al. Activation of cardiac muscarinic M3 receptors induces delayed cardioprotection by preserving phosphorylated connexin43 and up-regulating cyclooxygenase-2 expression [J]. Br J Pharmacol, 2010, 159: 1217-1225. |
| [18] | Wang S, Han HM, Jiang YN, et al. Activation of cardiac M3 muscarinic acetylcholine receptors has cardioprotective effects against ischaemia-induced arrhythmias [J]. Clin Exp Pharmacol Physiol, 2012, 39: 343-349. |
| [19] | Yang B, Lin H, Xu C, et al. Choline produces cytoprotective effects against ischemic myocardial injuries: evidence for the role of cardiac M3 subtype muscarinic acetylcholine receptors [J]. Cell Physiol Biochem, 2005, 16: 163-174. |
| [20] | Liu Y, Du J, Gao Y, et al. Role of M3 receptor in aconitine/ barium-chloride-induced preconditioning against arrhythmias in rats [J]. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol, 2009, 379: 511-515. |
| [21] | Zhao WM, Qi HP, Liu Y, et al. The antiarrhythmic effect and possible ionic mechanisms of pilocarpine on animal models [J]. J Cardiovasc Pharmacol Ther, 2009, 14: 242-247. |
| [22] | Liu Y, Xu CQ, Jiao JD, et al. M3-R/IK (M3)-a new target of antiarrhythmic agents [J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2005, 40: 8-12. |
| [23] | Wang T, Hogan-Cann A, Kang Y, et al. Muscarinic receptor activation increases hERG channel expression through phosphorylation of ubiquitin ligase Nedd4-2 [J]. Mol Pharmacol, 2014, 85: 877-886. |
| [24] | Sanguinetti MC, Jiang C, Curran ME, et al. A mechanistic link between an inherited and an acquired cardiac arrhythmia: HERG encodes the IKr potassium channel [J]. Cell, 1995, 81: 299-307. |
| [25] | Liu Y, Jing YH, Sun HL, et al. Relationship between M3 receptor and myocyte apoptosis induced by acute myocardial infarction [J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2004, 39: 338-341. |
| [26] | Liu Y, Sun HL, Wu H, et al. Protective effect of M3 receptor on H2O2-induced apoptosis of rat myocardial cells in vitro [J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2004, 39: 887-891. |
| [27] | Hang PZ, Zhao J, Wang YP, et al. Reciprocal regulation between M3 muscarinic acetylcholine receptor and protein kinase C-epsilon in ventricular myocytes during myocardial ischemia in rats [J]. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol, 2009, 380: 443-450. |
| [28] | Wang YP, Hang PZ, Sun LH, et al. M3 muscarinic acetylcholine receptor is associated with beta-catenin in ventricular myocytes during myocardial infarction in the rat [J]. Clin Exp Pharmacol Physiol, 2009, 36: 995-1001. |
| [29] | Wang S, Han HM, Pan ZW, et al. Choline inhibits angiotensin II-induced cardiac hypertrophy by intracellular calcium signal and p38 MAPK pathway [J]. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol, 2012, 385: 823-831. |
| [30] | Liu Y, Wang S, Wang C, et al. Upregulation of M3 muscarinic receptor inhibits cardiac hypertrophy induced by angiotensin II [J]. J Transl Med, 2013, 11: 209. |
| [31] | Wang Z, Shi H, Wang H. Functional M3 muscarinic acetylcholine receptors in mammalian hearts [J]. Br J Pharmacol, 2004, 142: 395-408. |
| [32] | Shi H, Wang H, Yang B, et al. The M3 receptor-mediated K+ current (IKM3), a G(q) protein-coupled K+ channel [J]. J Biol Chem, 2004, 279: 21774-21778. |
| [33] | Shi H, Wang H, Li D, et al. Differential alterations of receptor densities of three muscarinic acetylcholine receptor subtypes and current densities of the corresponding K+ channels in canine atria with atrial fibrillation induced by experimental congestive heart failure [J]. Cell Physiol Biochem, 2004, 14: 31-40. |
| [34] | Pönicke K, Heinroth-Hoffmann I, Brodde OE. Demonstration of functional M3-muscarinic receptors in ventricular cardiomyocytes of adult rats [J]. Br J Pharmacol, 2003, 138: 156-160. |
| [35] | Willmy-Matthes P, Leineweber K, Wangemann T, et al. Existence of functional M3-muscarinic receptors in the human heart [J]. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol, 2003, 368: 316-319. |
| [36] | Hang P, Zhao J, Qi J, et al. Novel insights into the pervasive role of M3 muscarinic receptor in cardiac diseases [J]. Curr Drug Targets, 2013, 14: 372-377. |
| [37] | Zhang R, Dong DL, Yang BF. Basic research and application of microRNA-a novel target for regulating cardiac arrhythmias [J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2011, 46: 6-11. |
| [38] | Zhu W, Yang L, Du Z. MicroRNA regulation and tissuespecific protein interaction network [J]. PLoS One, 2011, 6: e25394. |
| [39] | Zhou R, Hang P, Zhu W, et al. Whole genome network analysis of ion channels and connexins in myocardial infarction [J]. Cell Physiol Biochem, 2011, 27: 299-304. |
| [40] | Pan Z, Guo Y, Qi H, et al. M3 subtype of muscarinic acetylcholine receptor promotes cardioprotection via the suppression of miR-376b-5p [J]. PLoS One, 2012, 7: e32571. |
| [41] | Lorgis L, Amoureux S, Vergely C, et al. Brain-derived neurotrophic factor (BDNF): role of this neurotrophin in cardiovascular physiopathology [J]. Ann Cardiol Angeiol (Paris), 2009, 58: 99-103. |
| [42] | Katare RG, Kakinuma Y, Arikawa M, et al. Chronic intermittent fasting improves the survival following large myocardial ischemia by activation of BDNF/VEGF/PI3K signaling pathway [J]. J Mol Cell Cardiol, 2009, 46: 405-412. |
| [43] | Kistemaker LE, Bos ST, Mudde WM, et al. Muscarinic M(3) receptors contribute to allergen-induced airway remodeling in mice [J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 2014, 50: 690-698. |
| [44] | Yamada M, Miyakawa T, Duttaroy A, et al. Mice lacking the M3 muscarinic acetylcholine receptor are hypophagic and lean [J]. Nature, 2001, 410: 207-212. |
| [45] | Matsui M, Motomura D, Karasawa H, et al. Multiple functional defects in peripheral autonomic organs in mice lacking muscarinic acetylcholine receptor gene for the M3 subtype [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2000, 97: 9579-9584. |