断奶仔猪具有体温调节能力差、消化道和消化腺发育不完善、自身免疫未完全建立等生理特点。免疫接种、去势、早期断奶、营养和环境等条件的改变对仔猪有很强的应激性，可使仔猪免疫功能下降、饲料利用率低、抗病力差[1]，同时引起家畜体内血液、内分泌、神经系统等一系列变化，其中最为明显的表现为腹泻，严重时生长抑制甚至死亡。为缓解此类应激，生产上大量应用高锌、高铜、有机砷和抗生素等饲料添加剂[2]，虽能稍微减轻应激导致的腹泻和采食量减少等症状，但是动物耐药性、环境重金属污染和食品安全问题层出不穷。随着农业农村部发布的一系列铜、锌等微量元素减量、药物饲料添加剂退出等政策，标志着我国“无抗时代”的到来。
我国中草药资源丰富。中药具有营养和药物的双重作用，在机体内残留低，一般不产生抗药性。经过传统医药理论进行科学配伍，药物之间相互协同，调动机体全方位积极因素，可以达到保持动物健康状态的效果。2012年我国发布的《饲料原料名录》中就已有中草药，为开发中草药绿色饲料带来很大的发展契机。中草药中的生物活性物质，能直接抑菌、杀菌，调节机体免疫功能[3]，抗应激作用。加入仔猪日粮中，可使仔猪日增重和饲料转化率提高，腹泻率降低[4]。因此，利用中草药替代抗生素缓解仔猪生产过程中的应激成为一种必然的趋势。至今，我国畜牧行业专家进行了许多关于在仔猪日粮中添加中草药的研究，由于其质量参差不齐，致使效果尚未得到广泛认可，尽管有文献综述了中草药在仔猪生产中的应用效果，但一般综述存在主观性，不能对研究之间的变异性给出解释的缺点。
Meta分析是通过收集、评价、合成日益增长的原始试验结果，得出综合结论的一种研究方法。由于其纳入了多个同类研究，因此结论比单个研究更具代表性，在人类循证医学上应用十分广泛，为临床决策提供了强有力的依据[5]。近年来，该方法在饲料添加剂、兽医临床等畜牧领域已有应用。因此，作者拟利用Meta分析方法，对前人关于中草药在断奶仔猪生产中应用的试验进行系统评价，为仔猪生产过程中的保健和缓解应激提供有价值的参考。
1 材料与方法 1.1 检索策略通过计算机检索中国知网(CNKI)、Wanfang Data、VIP数据库、Science Direct、Web of Science检索。检索年限从建库到2019年8月。中文检索关键词包括：断奶仔猪、仔猪、生长性能、中药、中草药；英文检索：weaned piglets、piglets、growth performance、Chinese medicine、Chinese herbal medicine；根据不同材料库的特征分别进行主题词联合自由词相结合的方式收集文献。
1.2 文献的纳入和排除标准 1.2.1 纳入标准研究类型：已发表的随机对照试验或非随机对照试验，无论是否随机分组和盲法均应纳入；研究对象：断奶仔猪；干预措施：饲料中添加中草药并以抗生素(硫酸黏杆菌素、金霉素和杆菌肽锌等)作为对照；结局评价指标：平均日增重、平均日采食量、料重比、腹泻率、纳入文献中给出了指标的平均值(x)和标准差(s)或标准误(sx)二者转换公式为$s_{\bar{x}}=s / \sqrt{n}$，n表示样本数量。
1.2.2 排除标准① 重复发表和使用同次试验数据的文献；②研究对象不是断奶仔猪的文献；③综述类文章、无对照组的文献；④数据不全或数据明显有误的文献；⑤试验组干预措施为中药以外的治疗方法或中药与西药联合用药的情况。
1.3 数据提取提取要素：①题目、第一作者、发表年份；②研究对象、试验组动物总数、对照组动物总数、给药途径，试验周期；③平均日增重、平均日采食量、料重比、腹泻率。
1.4 方法学质量评价采用JADAD评分量表，包括随机序列的产生、分组隐藏、盲法、退出与失访。如每项仅为提及记作1分，说明具体方法的记作2分，1~3分视为低质量研究，4~7分视为高质量研究。
1.5 统计学方法运用Review Manager 5.3软件进行数据分析并绘制相关图表。计数资料用标准化均数差(std mean difference, SMD)、95%可信区间(confidence interval, CI)表示，用I2判断各研究间异质性，如果无异质性(P>0.1，I2 < 50%)，采用固定效应模型(fixed effect model, FEM)进行分析；各研究间存在统计学有异质性(P < 0.1，I2 < 50%)，采用随机效应模型(randomized effect model, REM)进行分析。并对研究结果进行敏感性分析，探究异质性来源，用漏斗图检验其发表偏移。
2 结果 2.1 文献检索与筛选按照检索策略共得到文献470篇，阅读文献题目及摘要，排除非临床研究，非对照试验、综述、重复发表的文献333篇，阅读全文，排除不符合纳入标准的文献86篇，排除对照组药物非硫酸黏杆菌素、金霉素、硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌的文献24篇，最终纳入文献27篇，文献类型包括期刊、专利、学位论文和会议论文，具体筛选方式见图 1。
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图 1 文献筛选流程 Fig. 1 Study flow diagram of reference screening |
纳入文献的国别均为中国，研究对象为断奶仔猪，其中试验组共935头，对照组935头。试验组均为以中药添加至饲粮中，以茯苓、黄芪、党参、山楂、蒲公英等一般具有清热解毒、扶正固本、燥湿止泻功能中药为主。对照组以抗生素(金霉素、硫酸黏杆菌素、硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌)为主，见表 1。27篇文献只提到进行随机分组，并没有提到具体的分组方法，未提及脱落和失访情况，根据JADAD评分标准，本研究纳入的文献评分只有1分，说明文章质量较低，见表 1。
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表 1 纳入文献基本特征及质量评价 Table 1 Basic characteristics and quality evaluation of included references |
有26篇文献提到日增重，各文献间异质性I2=95%>50%，具有异质性。经敏感性分析，逐一剔除文献后发现其异质性没有得到明显改善，故采用随机响应模型。分析结果显示，中药组和抗生素组相比，置信区间落在无效线的右侧，表明中药组的效应量大于抗生素组，即添加中药对断奶仔猪的影响极显著优于抗生素[SMD=1.22, 95%CI(0.69~1.75), P < 0.01]；亚组分析结果显示，中药组的日增重均极显著优于硫酸黏杆菌素组[SMD=0.87, 95%CI(0.37~1.37), P < 0.01]、硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌[SMD=3.13, 95%CI(1.04~5.22), P < 0.01]，而中药组的日增重与金霉素组相比，统计分析无差异[SMD=0.64, 95%CI(-0.74~2.02), P=0.36>0.05]，见图 2。
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图 2 中药组与抗生素组日增重比较的森林图 Fig. 2 Forest plot of daily gain comparison of Chinese medicine and antiblotic group |
有22篇文献提到日采食量，各文献间异质性I2=91%>50%，具有异质性。经敏感性分析，逐一剔除文献后发现其异质性没有得到明显改善，故采用随机效应模型。分析结果显示，中药组和抗生素组相比，置信区间落在无效线的右侧，表明中药组的效应量大于抗生素组，即添加中药对断奶仔猪的影响极显著优于抗生素[SMD=0.77, 95%CI(0.34~1.20), P < 0.01]。亚组分析结果显示，中药组的日采食量均显著优于硫酸黏杆菌素组[SMD=0.46, 95%CI(0.05~0.87), P < 0.05]、硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌[SMD=1.67, 95%CI(0.35~2.98), P < 0.05]，而中药组的日增重与金霉素组相比，统计分析无差异[SMD=1.27, 95%CI(-0.00~2.55), P=0.05]，见图 3。
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图 3 中药组与抗生素组日采食量比较的森林图 Fig. 3 Forest plot of daily feed intake comparison of Chinese medicine and antiblotic group |
有23篇文献提到料重比，各文献间异质性I2= 91%>50%，具有异质性。经敏感性分析，逐一剔除文献后发现其异质性没有得到明显改善，故采用随机响应模型。分析结果显示，中药组和抗生素组相比，结果与无效线相交，表明中药组和抗生素组的差异不显著[SMD=-0.35, 95%CI(-0.78~0.09), P=0.12>0.05]。亚组分析结果显示，中药组料重比均极显著低于硫酸黏杆菌素组{SMD=-0.66, 95%CI[-1.09~(-0.24)], P < 0.01}、金霉素{SMD=-0.63, 95%CI[-1.20~(-0.06)], P=0.03 < 0.05}，而中药组的料重比与硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌组相比，统计分析无差异[SMD=1.63, 95%CI(-0.64~3.91), P=0.16>0.05]，见图 4。
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图 4 中药组与抗生素组料重比比较的森林图 Fig. 4 Forest plot of material to weight ratio comparison of Chinese medicine and antiblotic group |
有16篇文献提到腹泻率，各文献间异质性I2>50%，具有异质性。经敏感性分析，逐一剔除文献后发现其异质性没有得到明显改善，故采用随机响应模型。分析结果显示，中药组和抗生素组相比，置信区间落在无效线的左侧，表明抗生素组的腹泻率高于中药组，即添加中药对断奶仔猪的影响极显著优于抗生素{SMD=-1.77, 95%CI[-2.52~(-1.01)], P < 0.01}。亚组分析结果显示，中药组的腹泻率均极显著低于硫酸黏杆菌素组{SMD=-1.31, 95%CI[-2.1~(-0.52)] P < 0.01}、金霉素{SMD=-2.94, 95%CI[-4.58~(-1.3)], P < 0.01}，而中药组的腹泻率与硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌组相比，统计分析无差异[SMD=-2.00, 95%CI(-4.17~0.18), P=0.07]，见图 5。
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图 5 中药组与抗生素组腹泻率比较的森林图 Fig. 5 Forest plot of diarrhea rate comparison of Chinese medicine and antiblotic group |
本研究中，日增重(图 6A)、日采食量(图 6B)、料重比(图 6C)、腹泻率(图 6D)所纳入的文献大部分在漏斗图内，有小部分文献在图外，对称性相对较差，说明有一定的发表偏倚，但偏倚程度不大。其中料重比为文献分布对称性相对较好，说明其发表偏倚程度较小。
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A.日增重；B.日采食量；C.料重比；D.腹泻率 A. Daily weight gain; B. Daily feed intake; C. Material to weight ratio; D. Diarrhea rate 图 6 中药组和对照组结局指标比较的漏斗图 Fig. 6 Funned plot for comparison of outcome indicator of Chinese medicine and antiblotic group |
中草药是我国特有的中医理论与实践的产物，以其来源天然、功效独特、无残留、无副作用等优势受到科研人员的青睐。近年来大量研究显示，中药作为仔猪饲料添加剂具有增强免疫力[32]，抗菌驱虫[33]、保健防病的作用[34]。仔猪断奶阶段频繁的疫苗注射、阉割、转群等生产操作对仔猪的应激较大，加之仔猪肠道微生态不健全、免疫力低，对周围环境要求高，从而导致整个猪场仔猪阶段发病率高、管理难度大、成活率低等问题。本文所纳入的文献多选用茯苓、黄芪、党参、山楂、蒲公英等中草药组方添加。茯苓[35]具有利尿、抑菌、抗炎、抗氧化、抗癫痫等作用，山楂[36]具有驱绦虫、健脾开胃、消食化滞、活血化痰功能。这些中草药一般具有清热解毒、扶正固本、燥湿止泻等功效，可有效降低仔猪腹泻率，促进其生长。
本文中纳入27篇文献，1 870头仔猪，试验组935头，对照组935头。分析结果显示：中药组日增重和日采食量都显著优于抗生素组(P < 0.01)，但与金霉素组相比效果相当，且中药组和抗生素组样本容量基本接近，纳入文献大部分都在漏斗图内，并经敏感性分析，异质性没有得到明显改善，说明所得结果较为稳健。纳入试验研究中有诸多药物具有健脾开胃、消食化积等功能[37]，如神曲、麦芽和山楂等，所以有利于胃肠道对营养物质的消化吸收利用，在一定程度上能提高断奶仔猪的饲料采食量饲料消化率, 达到提高日增重和日采食量的作用。本文的中药组腹泻率显著低于抗生素组(P < 0.01)，但与硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌组效果相当，中药组和抗生素组的置信区间大部分重合，样本容量接近，所以得出的结论可靠。中医理论中诸多中草药有燥湿止痢、调理肠道微生态、增强免疫力的作用[38]。有学者认为抗生素的长期使用导致耐药性增加，即导致抗生素的抗性基因向病原菌转化[39]，给动物乃至人类的疾病治疗带来巨大挑战，所以在断奶仔猪生产中以适当中草药替代抗生素可起到更好的效果。
Meta分析是最好的二次研究的方法之一，其是将多个研究结果的数据合并分析，估计某一干预措施疗效的统计学方法。通过合并研究增加样本含量，获得结果比较客观，结果具有可重复性。而叙述性文献综述的结果是定性描述，不同的研究者由于主观倾向可能得出不同的结论，结果具有不确定性。所以其具有不受原文献结论影响的特点，使得其结果更为可信。因其是建立在已发表文献的基础之上，所以结论受纳入文献质量的影响较大，在本文纳入的中药对断奶仔猪生长性能影响的研究中，存在以下因素：①所纳入的文献质量不高；②各研究试验饲养环境、饲料情况有差异；③所选择抗生素和中药的规格不一致，导致了研究结果不一致。所以单个RCT试验是Meta分析的基础，畜牧兽医领域还需加强高质量RCT研究，重视试验方案的设计。
4 结论在断奶仔猪生产阶段添加中草药在日增重、增加采食量、降低腹泻率等相关指标方面显著优于抗生素，即断奶仔猪阶段使用中草药保健防治研究具有重要潜力。
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