脑脊液细胞计数在脑脊液常规分析以及相关疾病临床诊断治疗和预后评价中具有重要的临床意义^[1]，以往该分析多采用的是直接在高倍镜下根据细胞核形态分别计数单个核(包括淋巴和单核细胞)和多个核细胞，共计数100个，此方法花费高，操作冗杂，精密度低，需要有经验的相关技术人员操作，且结果准确性和重复性低，并不适于现代化医院大规模临床工作的开展^[2]。因此近年来，血液分析仪在脑脊液细胞计数与分类中的应用发展迅猛，各实验室均尝试使用各类细胞分析仪来对脑脊液细胞进行计数和分析。目前，国内已有文献报道有的实验室尝试使用仪器法来代替手工计数法^[3]，如三分类血液分析仪、UF-100尿沉渣仪等，但限于所用仪器的灵敏度不高、仪器成本高、线性差、干扰因素多等，均未能取得满意结果。本文旨在探讨雅培Ruby (手动模式)和UF-1000i (体液模式)在脑脊液细胞计数中的应用和比较分析，同时对比手工计数结果，分析不同方法得出结果的可接受度和重复性，以及该数据对于临床诊疗的意义，选出适用于脑脊液细胞计数的仪器。

实验所用的245例脑脊液标本取自本院2015年8月到2016年8月住院患者，均由相关操作人员在无菌条件下进行腰椎穿刺或脑室引流获得，保证标本符合相关检查要求。其中男性患者122例，女性患者123例。

雅培Ruby全自动分析仪、UF-1000i全自动分析仪及原装配套试剂、质控品，日本OLYMPUS光学显微镜。

手工计数法严格按照《全国临床检验操作规程》进行，计数项目包括红细胞(RBC)数目、白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)、单核细胞(MONO)、嗜酸粒细胞(EOS)、嗜碱粒细胞(BASO)，每份标本计数2次，每次计数100个，结果取平均值^[4]。

雅培Ruby (手动模式)、UF-1000i (体液模式)检测严格按照说明书进行，分析前检测仪器配套质控物，仪器性能符合相关检测要求。每个标本连续测定3次，结果取平均值。分别记录雅培Ruby所测得的数据和UF-1000i所测得的数据。

分别使用雅培Ruby (手动模式)和UF-1000i (体液模式)，对白细胞数目不同的3份脑脊液标本(结果分别为高、中、低)进行10次连续测定。求出平均值和变异系数。

线性及重复性分析采用Excel 2007，相关性分析及配对t检验采用SPSS软件，以P＜0.05为差异有统计学意义。

将245例标本编号A01-A245，分别采用雅培Ruby (手动模式)、UF-1000i (体液模式)、手工计数法测得其红细胞(RBC)数目。

取该245例标本，分别采用雅培Ruby (手动模式)、UF-1000i (体液模式)进行测定，测定其白细胞数目、分类结果[单个核白细胞(MN)、分叶核白细胞(PMN)]，将所得结果进行分类统计，仪器法测得白细胞数目均＜499×10⁶个/L时，将在该范围内的203份数据编号为B01-B203；白细胞数目均>500×10⁶个/L时，将在该范围内的42份数据编号为C01-C42。

取编号为C01-C42的标本，用手工计数法复查结果，发现仪器法和手工计数法结果相差很大，仪器法结果不可用。

取编号为B01-B203的标本，用手工计数法复查结果，将所得结果与仪器法所得结果进行相关性分析，结果见表 1。

表 1(Table 1)

表 1 雅培Ruby和UF-1000i分类计数相关性分析 分类项目 仪器 Y=bX+a r P RBC 雅培Ruby Y=0.835X+0.579 0.928 ＜0.01 UF-1000i Y=0.693X+0.805 0.889 ＜0.01 WBC 雅培Ruby Y=1.067X-2.259 0.998 ＜0.01 UF-1000i Y=1.065X+3.400 0.991 ＜0.01 MN 雅培Ruby Y=0.925X-0.133 0.979 ＜0.01 UF-1000i Y=1.247X+0.528 0.81 ＜0.01 PMN 雅培Ruby Y=1.178X-0.639 0.989 ＜0.01 UF-1000i Y=0.617X+11.353 0.679 ＜0.01

表 1 雅培Ruby和UF-1000i分类计数相关性分析

取B01-B203标本中白细胞数目不同的3份脑脊液标本(结果分别为高、中、低)编号D1、D2、D3，分别进行10次连续测定，进行重复性分析，结果见表 2。

表 2(Table 2)

表 2 雅培Ruby和UF-1000i重复性分析 仪器 标本 标准差 平均值 变异系数(%) D1 1.370 320 319 13.1 10.46 雅培Ruby D2 2.780 887 149 189.2 1.47 D3 3.400 980 251 367.7 0.93 D1 1.054 092 553 18.0 8.56 UF-1000i D2 1.595 131 482 194.1 0.82 D3 1.286 683 938 396.9 0.33

表 2 雅培Ruby和UF-1000i重复性分析

所测的245例标本中，有42例(C01-C42) 标本的结果明显异常，两台仪器测出来的结果均和手工计数法得到的结果相差甚远，所测得的白细胞数目远高于手工计数法数目。在用显微镜进行手工计数时，发现这42例标本中均含有大量的霉菌、真菌等，数量约为两台仪器所测出来的白细胞数目。所测得的白细胞数目＜499×10⁶个/L的203例样本，用显微镜手工计数时，均未发现明显的霉菌、真菌。所有标本在实验过程中，均为无菌环境下采集，且在1 h内完成实验操作，所以能保证标本基本不存在外来污染，所检测出的霉菌、真菌均为脑脊液中自带的^[5]。故初步认为两台仪器不能很好的分辨出霉菌、真菌，会误识别为白细胞。分析发现该42例标本在仪器上所表现出来的白细胞数目均>500×10⁶个/L，因此可初步得到结论为，当两台仪器所测得的白细胞数目>500×10⁶个/L时，均需要通过手工计数法对标本进行复查，从而得出准确的数据。

通过分析表 1可得出结论，在以手工计数法所测得结果为金标准时，雅培Ruby血液分析仪和UF-1000i血液分析仪测定脑脊液中的红细胞数目、白细胞数目、单个核的白细胞数目、分叶核的白细胞数目均有良好的相关性，且雅培Ruby血液分析仪的相关性要略好于UF-1000i血液分析仪。

通过分析表 2可得出结论，两台仪器测得结果所显示的变异系数分别为10.46%、1.47%、0.93%、8.56%、0.82%、0.33%，均小于手工计数法时变异系数(手工计数法变异系数一般大于20%)，说明两台仪器均有较好的重复性和精密度。相对而言，UF-1000i血液分析仪的重复性和精密度略好于雅培Ruby血液分析仪。

脑脊液细胞计数具有重要的临床意义，手工计数法虽然准确度高，是脑脊液细胞计数的金标准，但是由于操作费时、繁琐，无法较好地满足临床需要，故需要找出准确度高的仪器来从一定程度上代替手工计数法，以便准确迅速地得到所需要的结果^[6]。用全自动血细胞分析仪或尿沉渣分析仪进行脑脊液细胞计数已有相关研究^[7-10]。本文采用雅培Ruby血液分析仪和UF-1000i血液分析仪进行脑脊液细胞计数，分别测定红细胞数目、白细胞数目、单个核的白细胞数目和分叶核的白细胞数目等项目。结果表明，当仪器法所测得的白细胞数目＜499×10⁶个/L时，雅培Ruby血液分析仪和UF-1000i血液分析仪均有较好的重复性、精密度及相关性；当仪器法所测得的白细胞数目>500×10⁶个/L时，雅培Ruby血液分析仪和UF-1000i血液分析仪均存在较大的误差，结果不可信，必须采用手工计数法复查结果，得出准确值。

本院近两年脑脊液细胞计数样本量大幅增加，如果仍靠人工计数法进行检测，不能及时满足临床需要。在进行脑脊液细胞计数时，雅培Ruby血液分析仪和UF-1000i血液分析仪两台分析仪虽然不是百分之百的准确，也不能完全代替手工计数法，但是在标本量多，临床急需知道结果等特殊情况时，有条件的实验室可以优先选取仪器法进行测定分析，能节约大量时间，加快发放报告的速度，具有较高的临床价值，当所得结果存疑时，及时通过手工计数法复查，为临床提供更准确的结果。