创伤或失血性休克患者死亡原因多为并发感染和多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)^[1]。新近发现胆碱能抗炎通路具有抗炎和抗休克作用。该通路主要有迷走神经及其递质乙酰胆碱构成，在感染、出血或缺血-再灌注等损害时被激活，通过降低促炎因子水平发挥抗炎作用，从而逆转低血压和生存状况^[2-4]。

刘应柯等证实针刺水沟穴对失血性休克有治疗作用^[5]，本实验小组前期研究证实针刺“足三里”穴可以增强传出迷走神经活性，改善失血性休克大鼠的氧供水平及酸中毒程度，本实验拟通过研究电针“足三里”对失血性休克犬是否有保护作用，为针刺用于治疗失血性休克开辟新的思路。

多功能心电监护监测仪及5F Swan-Ganz漂浮导管(Philips Agilent V24C，U.S.A and Arrow international Inc U.S.A)，电针刺激仪(中国成都泰盟科技BL-4201)。

健康杂种犬30只(雌雄不拘，武汉大学医学院动物实验中心提供)，体质量13-18 kg，随机分为5组，n=6：①假休克组(SHAM):除不经股动脉放血外, 所有操作与休克组相同。②休克组(HEM):制备失血性休克模型。③足三里组(EA):制模后电针刺激双侧“足三里”穴。④非经非穴组(NON-EA):制模后电针刺激非经非穴。⑤迷切后电针组(VGX+EA) :制模后切断双侧迷走神经干, 再电针刺激双侧“足三里”穴。

戊巴比妥钠30 mg/kg、芬太尼5 μg/kg静脉注射麻醉, 经口气管内插管, 接纽邦呼吸机(Newport, E100i, U.S.A)控制呼吸，全身肝素化(600 U/kg)。分离右颈外静脉，右下肢股动脉及双侧迷走神经。经右颈外静脉置入5F Swan-Ganz漂浮导管，右股动脉置管。参照Wigger’s改良法^[6]经股动脉快速放血，在15 min内使犬的平均动脉压(MAP)降至40 mmHg左右，并维持此水平40 min。若血压不回升即为模型制备成功，并将此时间点定为0 min。

双后肢备皮, 于膝关节之下1 cm及膝前正中线外侧1 cm的交点处为足三里穴，用不锈钢2号圆利针与皮肤表面呈45°角由后向前刺入，深度达2.0-2.5 cm^[7]，自0 min开始, 以30 Hz电流持续刺激双侧穴位30 min, 强度以犬下肢微颤为宜(约10-15 V)^[8]。非经非穴点选双侧腓骨小头与外髁中点距腓骨外侧缘1 cm处，刺激方法与“足三里”组相同。

经股动脉置管连续监测MAP，经漂浮导管测定心输出量(CO)、肺动脉嵌压(PAWP)和中心静脉压(CVP)。

分别在制模成功的0 min，120 min及180 min从股动脉采血0.8 ml离心(3 000 r/min, 4 ℃)15 min后，取上清保存于-70 ℃冰箱中。采用ELISA法检测血浆中TNF-α含量。

分别在制模成功前(即休克前)，0 min及180 min从股动脉采血1 ml。用丹麦雷度ABL800全自动血气分析仪测定动脉血乳酸值。

数据分析采用SPSS 13.0软件，以均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

制模成功后，与假休克组比较，其余4组在相应时间点MAP、CO、CVP和PAWP均降低(P＜0.05)。与休克组、非经非穴组和迷切后电针组比较，足三里组制模成功120 min及180 min时MAP、CO、PAWP和CVP均显著提高(P＜0.01)(见图 1，图 2，图 3和图 4)。

图 1(Figure 1)

图 1 同时间点犬平均动脉压的变化 与HEM组比较，**P＜0.01

图 2(Figure 2)

图 2 犬心输出量的变化 与HEM组比较，**P＜0.01, *P＜0.05

图 3(Figure 3)

图 3 犬肺动脉嵌压的变化 与HEM组比较，**P＜0.01, *P＜0.05

图 4(Figure 4)

图 4 犬中心静脉压的变化 与HEM组比较，**P＜0.01

制模后0 min, 各组犬血浆中的TNF-α含量无显著差异。180 min时与休克组比较，假休克组和足三里组犬血浆中TNF-α含量显著降低(P＜0.01) (见表 1)。

表 1(Table 1)

表 1 犬血清中TNF-α的含量变化(pg/ml, n=6, x±s) 组别 假休克组 休克组 足三里组 非经非穴组 迷切后电针组 0 min 1.51±0.04 1.54±0.02 1.57±0.04 1.53±0.05 1.56±0.03 120 min 1.52±0.04 1.71±0.05 1.68±0.04 1.71±0.08 1.73±0.10 180 min 1.50±0.04** 1.95±0.07 1.65±0.03** 1.96±0.03 1.93±0.03 与休克组比较，**P＜0.01

表 1 犬血清中TNF-α的含量变化(pg/ml, n=6, x±s)

失血性休克前, 各组犬血乳酸值无显著差异。与休克组比较，假休克组0 min及180 min时犬血乳酸值均较低(P＜0.01)；足三里组180 min时犬血乳酸值较低(P＜0.01)，非经非穴组及迷切后电针组犬血中的乳酸值无统计学差异(见表 2)。

表 2(Table 2)

表 2 犬血乳酸值的变化(mmol/L, n=6, x±s) 组别 假休克组 休克组 足三里组 非经非穴组 迷切后电针组 休克前 0.97±0.36 1.18±0.50 1.30±0.66 1.08±0.60 1.15±0.65 0 min 0.97±0.36** 4.23±0.24 4.01±0.75 4.18±0.48 3.90±0.84 180 min 1.05±0.48** 5.13±1.40 2.57±0.36** 4.45±1.00 4.28±0.97 与休克组比较，**P＜0.01

表 2 犬血乳酸值的变化(mmol/L, n=6, x±s)

失血性休克是一种以组织灌注不足为特点的病理状态, 引起机体炎症系统广泛激活，触发全身性炎性反应，导致错综复杂的病理生理过程进而发展为MODS^{[9, 10]}。因此，除积极进行止血和补充血容量外，在休克早期进行抗炎治疗，对阻止病情恶化有重要意义。近年来有研究发现，电针“足三里”穴可以兴奋迷走神经，促外周神经末梢释放乙酰胆碱(ACh), 与具有α7亚基的N型ACh受体结合，通过细胞内信号传导途径抑制促炎因子释放，抑制全身炎性反应，可能降低SIRS的发生率^[11]。有文献表明，电针“足三里”穴可以在一定程度上改善失血性休克状态下大鼠的肝损伤程度，在特殊情况下可能能够部分替代输液疗法对失血性休克的治疗作用^[12]。

本实验室前期研究已证实电针“足三里”穴能够有效逆转大鼠失血性休克时的低血压状况，改善休克动物的一般生存状况并延长其存活时间。血气分析及乳酸检测显示，电针“足三里”能够迅速纠正失血性休克动物的低氧血症、高碳酸血症和代谢性酸中毒，并显著降低血乳酸水平，改善肺水肿和休克时肺部炎性反应程度^[13]。

本实验观察了电针刺激“足三里”穴对失血性休克犬的血流动力学、血浆TNF-α的含量、血乳酸值的变化情况。CO是组织灌注的最重要的变量之一，其参与其他血流动力学和氧合变量的计算比如全身血管阻力(SVR)，肺血管阻力(PVR)和氧供(DO₂)^[14]。失血性休克模型制备成功后，MAP急剧下降，血浆TNF-α和血乳酸值明显升高，CO、CVP和PAWP降低。电刺激失血性休克犬的“足三里”穴后，其CO、CVP和PAWP明显升高，改善循环灌注状况，从而改善机体组织的氧供状况；能降低血浆TNF-α的含量，拮抗全身性炎性反应；通过降低血液乳酸值的升高，纠正酸中毒，从而恢复了机体的酸碱平衡。非经非穴组结果与休克组类似，并无足三里组的上述变化，可以排除电针刺激本身对机体影响的因素；而双侧迷走神经切断后电针“足三里”对失血性休克动物的上述作用消失，表明外周迷走神经的完整性，对于电针“足三里”的抗失血性休克效应是不可缺少的。

综上所述, 电针刺激“足三里”穴能改善失血性休克动物的血流动力学、血浆TNF-α含量及血乳酸值，从而改善组织灌注、氧供, 有助于维持内环境的稳定, 因此对失血性休克犬具有潜在的保护作用。但是目前针灸的研究水平尚属较浅，技术方法不够先进，所以电针“足三里”穴抗犬失血性休克的作用及具体机制有待深入研究, 电刺激“足三里”穴的时机、强度和时间的选择，以及其临床应用的可能性，尚待进一步研究。