武汉大学学报(医学版)   2016, Vol. 37Issue (03): 426-429   DOI: 10.14188/j.1671-8852.2016.03.020.
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引用本文 

李征, 杨小明, 张天标, 李真珍, 娄安锋. 单核细胞趋化蛋白1和血管内皮生长因子在膀胱癌组织表达的相关性[J]. 武汉大学学报(医学版), 2016, 37(03): 426-429. DOI: 10.14188/j.1671-8852.2016.03.020.
LI Zheng, YANG Xiaoming, ZHANG Tiabiao, LI Zhenzhen, LOU Anfeng. Correlation of the Expression of Monocyte Protein 1 and Vascular Endothelial Growth Factor in Bladder Cancer[J]. Medical Journal of Wuhan University, 2016, 37(03): 426-429. DOI: 10.14188/j.1671-8852.2016.03.020.

作者简介

李征，男，1982-，医学硕士，主要从事泌尿系疾病的诊断和治疗研究

基金项目

国家自然科学基金青年项目(编号：U1304803)

文章历史

收稿日期：2015-01-12
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单核细胞趋化蛋白1和血管内皮生长因子在膀胱癌组织表达的相关性
李征 1, 杨小明 2, 张天标 2, 李真珍 3, 娄安锋 3     
1. 南阳市中心医院泌尿外科 河南 南阳 473000;
2. 郑州大学第一附属医院泌尿外科 河南 郑州 450052;
3. 郑州大学第一附属医院/河南省重点高校开放实验室 河南 郑州 450052
收稿日期：2015-01-12
基金项目：国家自然科学基金青年项目(编号：U1304803)
作者简介：李征，男，1982-，医学硕士，主要从事泌尿系疾病的诊断和治疗研究
[摘要] 目的: 探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)与血管内皮生长因子(VEGF)在膀胱癌组织中的表达的相关性。 方法: 纳入膀胱癌组织标本68例，正常膀组织标本11例，分别检测MCP-1与VEGF在膀胱癌组织以及正常膀组织中的表达。此外，分析MCP-1与VEGF在膀胱癌组织中的表达与患者年龄、性别、是否原发、有无转移、临床分期、病理分级等关系，并进一步分析MCP-1与VEGF两者间的相关性。 结果: ①膀胱癌组织MCP-1检测率为66.18%，正常膀组织MCP-1检测率为18.18%(P＜0.05)。MCP-1与膀胱癌患者的临床分期、病理分级呈正相关(P＜0.05)，与肿瘤的原发、复发无关(P＞0.05)；②膀胱癌组织VEGF检测率为69.12%，正常膀组织VEGF检测率为9.09%(P＜0.05)。VEGF与膀胱癌患者的临床分期、病理分级呈正相关(P＜0.05)，与肿瘤的原发、复发无关(P＞0.05)。 结论: MCP-1与VEGF表达与术前临床分期、病理分级有关，在膀胱癌中，MCP-1与VEGF可能通过协同作用参与了膀胱癌发生、发展的分子调控过程。
关键词： 单核细胞趋化蛋白1    血管内皮生长因子    膀胱癌    相关性    
Correlation of the Expression of Monocyte Protein 1 and Vascular Endothelial Growth Factor in Bladder Cancer
LI Zheng1, YANG Xiaoming2, ZHANG Tiabiao2, LI Zhenzhen3, LOU Anfeng3     
1. Dept. of Urological Surgery, Nanyang City Center Hospital, Nanyang 473000, Henan, China;
2. Dept. of Urological Surgery, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China;
3. Key Laboratory of The First Affiliated Hospital ofZhengzhou University, Zhengzhou 450052, China
[Abstract] Objective: To investigate the correlation of expression of monocyte chemotactic protein 1 (MCP-1) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in bladder cancer. Methods: 68 cases of bladder cancer tissue samples and 11 cases of normal bladder tissue samples were used in this study to detect the expression of MCP-1 and VEGF. In addition, the relationship between the expression and patients' age, gender, primary or not, metastasis, pathological classification, or clinical stages, ect., were analyzed and further analysis of the correlation between MCP-1 and VEGF was taken. Results: ①The bladder cancer MCP-1 detection rate was 66.18%, the normal bladder tissue MCP-1 detection rate was 18.18% (P < 0.05). MCP-1 expression and bladder cancer staginger pathological grading were positively correlated (P < 0.05), while it had no relation to the primary state and recurrent tumor (P > 0.05); ②The bladder cancer tissue VEGF detection rate was 69.12%, and the normal bladder tissue VEGF detection rate was 9.09% (P < 0.05). Expression of VEGF and bladder cancer staging or pathological grading were positively correlated (P < 0.05), and it had no relation to the primary state and recurrent tumor (P > 0.05). Conclusion: MCP-1 and VEGF expression are related to the preoperative clinical staging and pathological grading in bladder cancer. MCP-1 and VEG may be involved in the molecular regulation through synergistic effect in bladder cancer occurrence and development process.
Key words: Monocyte Chemotactic Protein 1    Vascular Endothelial Growth Factor    Bladder Cancer    Correlation    

膀胱癌属于泌尿系统恶性肿瘤，临床较为多见。目前，对于膀胱癌的发病机制尚不完全明确。已有研究认为，慢性炎症与膀胱癌的发生存在较为密切的联系，“炎-癌链”已经成为临床上研究肿瘤发病的一个新方向[1]。因此，分析癌症的微环境对于了解癌症的机制十分重要。本研究为研究炎症相关因子与膀胱癌之间相关性，对膀胱癌组织中单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1，MCP-1)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达进行了检测，现报告如下。

1 材料与方法 1.1 研究对象

本研究共纳入膀胱癌组织标本68例，正常膀组织标本11例。膀胱组织标本均来源于我院2010年1月-2014年1月手术或行膀胱镜取活检。68例膀胱癌患者年龄43-86岁，平均年龄(64.2±10.9)岁。病理分级:Ⅰ级41例，Ⅱ级18例，Ⅲ级9例。临床分期:参考UICC-NTM分期标准:Tis-T1 21例，T2 21例，T3-T4 26例。11例正常膀组织经病理检查提示无膀胱癌性病变。所有膀胱组织样本做成石蜡标本，连续切片4 μm厚, 待用。

1.2 试剂

兔抗MCP-1多克隆抗体、兔抗VEGF多克隆抗体(美国Santa Cruz公司)，SP免疫组化试剂盒以及DAB显色试剂盒均购自武汉博士德生物试剂有限公司。

1.3 免疫组化染色

染色方法严格执行SP试剂盒产品说明书进行，MCP-1与VEGF抗体均使用0.1 mol/L磷酸盐缓冲液稀释，稀释比例1:100，并用PBS替代一抗作阴性对照。微波枸橼酸盐缓冲液抗原修复，DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片，最后在光镜下观察。结果判定以光镜下观察细胞出现棕黄色颗粒为阳性染色。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0统计学软件包进行统计分析、处理，各组计数资料之间的比较采用卡方检验，MCP-1与VEGF的相关性研究采用两种属性独立性的卡方检验，关联程度采用Spearman等级相关分析法。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 MCP-1与VEGF在膀胱癌组织以及正常膀胱组织中的阳性率比较

膀胱癌组织中，MCP-1与VEGF的阳性表达率分别为66.18%、69.12%；正常膀胱组织中，MCP-1与VEGF的阳性表达率分别为18.18%、9.09%。MCP-1与VEGF在膀胱癌组织中的表达均明显高于正常膀胱组织，差异有显著性(P＜0.05)，见表 1。

表 1 MCP-1与VEGF在膀胱癌组织以及正常膀胱组织中的阳性率比较[n(%)]
2.2 MCP-1在膀胱癌中的表达与临床以及病理因素的关系

我们根据患者的年龄、性别、是否原发、有无转移、临床分级、病理分期等进行分析。结果显示，MCP-1阳性表达与膀胱癌患者的年龄、性别、是否原发、有无转移无明显相关(P＞0.05)。MCP-1阳性表达与膀胱癌患者的临床分级以及病理分期有关，并且随着临床分级以及病理分期的上升，MCP-1阳性表达亦明显升高(P＜0.05)，见表 2。

表 2 MCP-1在膀胱癌中的表达与临床以及病理因素的关系(n)
2.3 VEGF在膀胱癌中的表达与临床以及病理因素的关系

我们根据患者的年龄、性别、是否原发、有无转移、临床分级、病理分期等进行分析。结果显示，VEGF阳性表达与膀胱癌患者的年龄、性别、是否原发、有无转移无明显相关(P＞0.05)。VEGF阳性表达与膀胱癌患者的临床分级以及病理分期有关，并且随着临床分级以及病理分期的上升，VEGF阳性表达亦明显升高(P＜0.05)，见表 3。

表 3 VEGF在膀胱癌中的表达与临床以及病理因素的关系(n)
3 讨论

目前的研究认为，临床上很多肿瘤的发病与感染、慢性刺激以及炎症存在较为密切的联系。慢性炎症的一个重要特征是单核巨噬细胞系统的激活，而在慢性炎症的过程中，C-C类趋化因子起到了重要的作用[2-4]。MCP-1属于较为重要的C-C类趋化因子，又被称为单核细胞趋化和激活因子(monoctye chemotactic and activating factor，MCAF)。目前研究发现，单核细胞以及巨噬细胞能够在某些炎症因子的刺激下分泌MCP-1，而一些肿瘤细胞系则可组成性产MCP-1[5, 6]。VEGF最初从肿瘤细胞的分泌物中分离出来，因此，VEGF作为重要的血管生成因子在各类肿瘤的发生中均起到重要的作用[7]。临床通过抑制VEGF调控血管生成作用，达到抑制肿瘤及其它以病理性血管生成为特征的疾病的目的，已成为目前临床上一种较为有效的治疗方法[8, 9]。随着研究的深入，发现VEGF及其家族成员不仅仅参与了肿瘤血管生成，同时也参与其它生理以及病理的血管生成。VEGF是参与调控血管生成最为重要的血管生长因子，能够促进内皮细胞的增殖，从而诱导血管的发生。VEGF在组织中的表达直接反映了该组织的血管生成活性[10, 11]。

为进一步研究MCP-1与VEGF在膀胱癌组织中的表达及其相关性，我们分别对膀胱癌组织以及正常膀胱组织中的MCP-1与VEGF的表达进行了检测。本研究中，正常膀胱组织中MCP-1、VEGF表达极少，分别为2例、1例。这是由于一般情况下组织细胞没有受到外界的刺激，处于一种相对稳定的静止状态[12]。我们观察了膀胱癌患者的性别、年龄、是否原发病、有无转移、临床分期以及病理分级与MCP-1、VEGF之间的联系。结果显示，MCP-1、VEGF的表达不受患者性别、年龄、是否原发病、有无转移等影响(P＞0.05)。但是，MCP-1、VEGF的表达与患者的临床分期以及病理分级存在密切的联系，呈现了正相关(P＜0.05)。该结果说明MCP-1与VEGF两者呈同向表达的关系，显示两者在膀胱癌的发生过程中可能具有协同调控的重要作用。研究显示，由于慢性炎症造成的肿瘤组织中的单核巨噬细胞，受到肿瘤细胞分泌的一些细胞因子的影响，其表达MCP-1的能力明显提升，与VEGF的表达水平具有明显的相关性，从而促进了肿瘤的生长[13]。所以，调节炎症或肿瘤组织中MCP-1水平的表达，也许能够成为预防、控制肿瘤的方法之一。

综上所述，MCP-1与VEGF表达与术前临床分期、病理分级有关，在膀胱癌中，MCP-1与VEGF可能通过协同作用参与了膀胱癌发生、发展的分子调控过程。

参考文献
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