急性脑梗死是一种由粥样硬化性狭窄、血栓形成、栓塞性梗阻引起的神经系统疾病^[1]。该病症状、病情程度和预后取决于梗死灶的位置、数目和大小^[2]。据统计，约三分之一的急性脑梗死患者会因病死亡^[3]。大量研究表明炎症在该病的发生和发展中起着至关重要的作用^[4]。结合珠蛋白(haptoglobin, Hp)是一种急性时相反应蛋白，具有Hp1-1、Hp2-1、Hp2-2 3种表型，在炎症状态下血浆水平显著升高^[5]。有研究证实，高血浆Hp水平提示非小细胞肺癌、卵巢癌、结直肠癌等恶性肿瘤患者的不良预后^[6-7]。此外，血浆Hp还与心肌梗死、中风和充血性心力衰竭等疾病的发生密切相关^[8]。然而，血浆Hp水平是否可作为急性脑梗死患者预后的标志物，目前尚缺乏相关研究报道。本研究收集100例急性脑梗死患者的临床资料，以探讨血浆Hp水平与急性脑梗死患者预后的关系，为急性脑梗死患者预后评估提供依据。

1 对象与方法 1.1 研究对象

选择2013年1月至2014年12月来我院接受治疗的急性脑梗死患者100例(病例组)和100例健康体检者(对照组)。病例组男75例，女25例；年龄55~70岁，平均年龄为(62.52±7.26)岁；体重指数(body mass index, BMI) 23~29 kg/m²，平均值为(26.12±2.16)kg/m²。对照组男70例，女30例；年龄55~71岁，平均年龄为(63.03±7.05)岁；BMI 24~29 kg/m²，平均值为(26.33±2.09)kg/m²。两组患者在性别、年龄、BMI方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)，研究对象具有可比性。

本研究获得我院医学伦理委员会批准(审批号：YL-2017-028)，且所有研究对象均知情同意。

1.2 纳入和排除标准

纳入标准：①急性脑梗死患者符合2015年中华医学会神经病学分会制定的《中国脑血管病一级预防指南》诊治标准^[9]，经头部CT或磁共振成像证实；②颈动脉超声检查发现由动脉粥样硬化所致的相关血管狭窄(>50%)或闭塞；③发病至入院时间 < 36 h；④既往无脑梗死史；⑤无其他脏器严重疾病；⑥由患者或直系亲属知情同意并签署知情同意书，提供患者的详细资料。

排除标准：①出血性卒中；②硬脑膜下血肿；③恶性肿瘤；④颅内感染或急慢性感染；⑤既往有手术治疗史；⑥其他中枢神经系统疾病、自身免疫系统疾病、凝血功能障碍、代谢性疾病；⑦听力及语言障碍；⑧治疗或住院期间死亡。

1.3 研究方法

收集并记录入组者的性别、年龄、身高、体重、吸烟史、嗜酒史、糖尿病、高血压、高脂血症、心绞痛、心肌梗死等临床资料。BMI=体重(kg)÷身高(m)²。吸烟史定义为吸烟≥1支/d，持续时间≥1年。嗜酒史定义为饮入酒精含量≥50 g/d，持续时间≥1年。

采集患者入院后第2天清晨空腹静脉血5~10 mL，3 000转/min离心20 min后分离血清、血浆，-80℃冰箱中保存待测。应用美国Beckman公司生产Hp试剂盒，采用双光路免疫浊度分析仪检测血浆Hp水平。Hp表型检测方法：收集的患者血清和50%的血红蛋白按照19 :1比例混合，加入其1/2体积的蔗糖溶液待检；采用Chelex-100法提取DNA；凝胶制备，电泳分离，电泳结束后将凝胶放入联苯胺染色液中，加入30%过氧化氢显谱10 min，谱带清晰后判断Hp表型。

采用电话或患者入院就诊的方式每半年随访1次。定义患者确诊时间为研究起始点，最后一次随访记录作为研究终点，随访至2018年8月31日。

1.4 统计学分析

应用SPSS 22.0软件进行统计学分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用t检验；计数资料以例(%)表示，组间比较采用χ²检验。采用受试者工作特征(ROC)曲线筛选切点，计算曲线下面积评估参数预测效力。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，利用Log-Rank法进行差异性检验。P < 0.05表示差异有统计学意义。

2 结果 2.1 病例组和对照组临床资料比较

病例组和对照组在性别、年龄、BMI、嗜酒史、高脂血症、心肌梗死、血红蛋白、Hp表型方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)。病例组中吸烟史、糖尿病、高血压、心绞痛、血浆Hp水平高于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05)。病例组患者3年总死亡率59%(59/100)。见表 1。

2.2 血浆Hp预测急性脑梗死患者3年死亡事件发生的ROC曲线

ROC曲线结果显示，血浆Hp预测急性脑梗死患者3年死亡事件发生的最佳截断值为275.25 μg/L。对应的曲线下面积为0.821(0.802~0.854)，敏感度为61.55%，特异度为80.05%(P < 0.05)。见图 1。

2.3 不同血浆Hp组别患者临床资料比较

血浆Hp≥275.25 μg/L组与血浆Hp < 275.25 μg/L组患者在性别、年龄、BMI、吸烟史、嗜酒史、糖尿病、高脂血症、心绞痛、血红蛋白、Hp2-2表型数比较，差异无统计学意义(P>0.05)。血浆Hp≥275.25 μg/L组中高血压、心肌梗死、Hp2-1表型数、血浆Hp水平、3年总死亡率高于血浆Hp < 275.25 μg/L组，差异有统计学意义(P < 0.05)；而Hp1-1表型数低于血浆Hp < 275.25 μg/L组，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 2。

2.4 不同血浆Hp组别患者预后比较

Kaplan-Meier法生存曲线结果显示，血浆Hp≥275.25 μg/L组患者3年总死亡率显著高于血浆Hp < 275.25 μg/L组，差异有统计学意义(P < 0.05)。见图 2。

3 讨论

急性脑梗死若在发病早期或发病入院后进行针对性治疗，可有效缓解病情进展^[10]。在临床研究中生物学标志物是指能够反映疾病状态和严重程度、可客观检测的某些特征性指标。特异性生物标志物对急性脑梗死的病情诊断、疗效评估及预后判断具有重要作用。近年来，关于急性脑梗死患者预后生物标志物的研究也成为了临床研究热点。

Hp是一种急性时相反应蛋白，在感染、组织损伤、肿瘤等多种炎症过程中表达水平升高^[5-9]。该蛋白的主要功能是结合从红细胞中释放的游离血红蛋白，减弱其在人体内的氧化活性及对肾脏的损伤；直接抑制低密度脂蛋白的氧化过程^[12]。既往关于血浆Hp与脑血管病的研究主要集中在Hp表型与脑血管病患者预后之间的关系^[11]，而血浆Hp水平对这些患者预后的影响尚不清楚。

本研究发现，急性脑梗死患者血浆Hp水平高于对照组。ROC曲线分析显示这些患者的血浆Hp水平与3年总死亡事件发生相关，并且血浆Hp水平的最佳截断值为275.25 μg/L。根据血浆Hp水平分组发现，血浆Hp≥275.25 μg/L组患者3年总死亡率高于血浆Hp < 275.25 μg/L组。此外，Kaplan-Meier生存分析还发现，高Hp水平的患者3年总死亡率与低Hp水平的患者相比较高。因此，血浆Hp水平有可能作为预测急性脑梗死患者预后的重要生物标志物。

既往研究表明，脑损伤后Hp升高的主要合成器官是肝脏^[12]。虽然Hp可以不可逆地结合血液中的游离血红蛋白，但血浆Hp水平的升高并不意味着溶血或出血的开始。先天性免疫系统激活在脑缺血再灌注损伤中起着重要作用，因此免疫系统激活前减少炎症分子已成为治疗靶点。据报道，Hp可以激活先天性免疫系统，并促进病情进展^[13]。Hp可预测预后的原因也许与先天性免疫系统的激活有关。Zhang等^[11]的研究指出，血浆Hp水平与急性脑梗死患者预后密切相关，而不同Hp表型患者的预后差别不大，并指出血浆Hp预测急性脑梗死患者3年死亡事件发生的最佳截断值为281.54 μg/L。此外，在心血管疾病方面，血浆Hp水平也可预测患者预后。Chiang等^[14]的研究指出，急性心肌梗死患者血浆Hp水平升高与总生存率独立相关，不同Hp表型组患者的总生存率没有差异，急性期血浆Hp水平可能反映炎症过程中氧化应激的严重程度。在其他疾病方面，Lml等^[15]的研究指出，血浆Hp可能是多囊卵巢综合征及其并发症发生的潜在生物标志物。

本研究有以下不足：样本量较少，为单中心研究，这对本研究结论的准确性有一定影响；纳入的患者可能未排除其他未知影响因素，对结论也会造成一定影响；缺乏预测急性脑梗死患者预后的其他标志物研究，容易造成研究结论片面；本研究未纳入陈旧性脑梗死患者数据，这可能会影响结果。

总之，血浆Hp水平偏高提示急性脑梗死患者预后不良，血浆Hp水平有可能作为预测急性脑梗死患者预后的重要生物标志物。