2022, Vol. 43
文章信息
- 王继宝, 陈凯, 赫晓霞, 龚渝蓉, 杨锦, 段星, 王译葵, 杨跃诚, 叶润华, 蒋岩, 段松, 邢文革.
- Wang Jibao, Chen Kai, He Xiaoxia, Gong Yurong, Yang Jin, Duan Xing, Wang Yikui, Yang Yuecheng, Ye Runhua, Jiang Yan, Duan Song, Xing Wenge
- HIV-1感染者抗病毒治疗后HIV-1DNA载量动力学变化及影响因素分析
- Dynamic changes and influencing factors of HIV-1 DNA load in HIV-1 infected individuals under antiretroviral therapy
- 中华流行病学杂志, 2022, 43(5): 692-695
- Chinese Journal of Epidemiology, 2022, 43(5): 692-695
- http://dx.doi.org/10.3760/cma.j.cn112338-20211129-00922
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文章历史
收稿日期: 2021-11-29
2. 北京祥瑞生物制品股份有限公司，北京 101407;
3. 北京市理化分析测试中心/北京市食品安全分析测试工程技术研究中心/北京市基因测序与功能分析工程技术研究中心，北京 100089;
4. 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室，北京 102206
2. Beijing Sanroad Biological Products Company Limited, Beijing 101407, China;
3. Beijing Engineering Technology Research Centre of Gene Sequencing and Gene Function Analysis, Beijing Engineering Research Center of Food Safety Analysis, Beijing Center for Physical & Chemical Analysis, Beijing 100089, China;
4. National HIV/AIDS Reference Laboratory, National Center for AIDS/STD Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China
艾滋病抗病毒治疗能改善HIV感染者的生存状况。对于抗病毒治疗的效果，目前主要通过病毒学指标、免疫学指标和临床症状3个方面评估，其中，病毒学指标最为重要。对于大多数感染者而言，抗病毒治疗3~6个月之后，体内的病毒载量会降至现有试剂检测不到的水平，从而达到病毒学抑制，采用HIV储存库检测的方法进一步评价HIV感染者体内病毒学指标是艾滋病诊疗工作中的重要课题[1]。HIV储存库一般指整合到人基因组内的HIV-1前病毒，主要存在于淋巴结、血液、脑脊液等组织中[2]。目前，HIV储存库检测通常以总HIV-1 DNA为标志物，最常用的总HIV-1 DNA检测方法为荧光探针PCR法，检测样本为全血[3-9]。目前关于HIV储存库的检测尚无统一标准，临床上并未展开应用。德宏傣族景颇族自治州（德宏州）是我国最早成批出现HIV感染者的地区，积累了大样本量的队列，本研究选取样本量较大、时间跨度较长的新发队列作为研究对象，分析HIV-1感染者抗病毒治疗后HIV-1 DNA载量动力学变化及影响因素，为HIV-1 DNA定量检测在抗病毒治疗效果监测及评估的应用提供参考依据。
对象与方法1. 研究对象：来源于德宏州CDC建立的2009-2018年HIV新发感染队列，HIV-1确证阳性后即入组为HIV新发感染者，每年定期参加随访。剔除标准为抗病毒治疗时间 < 12个月或随访次数 < 3次。
2. 研究方法与内容：
（1）HIV-1 DNA定量检测：用全血DNA提取试剂盒（快而精医药股份有限公司，荷兰）提取样本中DNA，提取的DNA置-20 ℃保存备用。用HIV-1 DNA检测试剂盒（北京金豪制药股份有限公司，北京）对样本进行HIV-1 DNA定量检测（试剂盒的检测下限为20拷贝/106 PBMCs），荧光PCR仪型号为Bio-Rad CFX96（伯乐生命医学产品有限公司，美国）。
（2）相关定义：①HIV-1新发感染：最近1次HIV-1检测结果分别为阴性与阳性（阳转）的时间间隔 < 12个月，判定为HIV-1新发感染；≥12个月判定为既往感染。②基线HIV-1 DNA载量值：阳转后采集的第一份静脉血样本中HIV-1 DNA载量值。③最近1次随访HIV-1 DNA载量值分为2组：（a）病毒库清除效果较好：HIV-1 DNA载量值< 100拷贝/106 PBMCs；（b）病毒库清除效果不佳：HIV-1 DNA载量值≥100拷贝/106 PBMCs。
3. 统计学分析：采用SPSS 17.0软件进行统计学分析。以抗病毒治疗时长为横坐标，HIV-1 DNA载量均值为纵坐标，构建HIV-1 DNA载量值随抗病毒治疗时长动力学变化曲线图。采用单因素和多因素logistic回归模型，分析HIV-1病毒库清除效果的影响因素，单因素分析后进行多因素分析，自变量筛选的纳入标准为0.1。双侧检验，检验水准为α=0.05。
结果1. 研究对象基本情况：招募175例HIV感染者中，入组为研究对象113例，HIV新发感染者占49.6%（56/113），男性占53.1%（60/113），性传播占80.5%（91/113），注射吸毒传播占19.5%（22/113）。抗病毒治疗方案以拉米夫定+依非韦伦+替诺福韦（3TC+EFV+TDF）为主（40.7%，46/113）；年龄M（Q1，Q3）为43（37，50）岁；确诊至抗病毒治疗的时间间隔M（Q1，Q3）为29（2，144）周；基线CD4、基线CD8和基线CD4/CD8的M（Q1，Q3）分别为460（356，650）个/μl、958（699，1 414）个/μl和0.49（0.34，0.68）。最近1次随访HIV-1 DNA载量值< 100和≥100拷贝/106 PBMCs的分别有41例（36.3%）和72例（63.7%）。
2. HIV-1 DNA载量随治疗时间动力学变化趋势：113例HIV感染者中，均成功提取核酸和HIV-1 DNA定量测定。抗病毒治疗前，HIV-1 DNA载量均值>800拷贝/106 PBMCs；抗病毒治疗1年后，HIV-1 DNA载量值迅速下降至 < 400拷贝/106 PBMCs；此后，随着抗病毒治疗的持续进行，HIV-1 DNA载量值趋于稳定，无明显下降趋势。HIV-1 DNA载量值随治疗时间动力学变化趋势见图 1。抗病毒治疗开始后0~6年HIV-1 DNA载量值（拷贝/106 PBMCs，x±s）分别为854±1 481、364±461、352±472、356±545、252±352、365±596和269±271。
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| 图 1 HIV-1感染者抗病毒治疗后体内HIV-1 DNA载量动力学变化趋势（误差线为95%CI） |
3. 抗病毒治疗后HIV-1 DNA载量值的影响因素：单因素logistic分析结果显示，HIV-1 DNA载量值的影响因素包括基线CD8（P=0.080）、基线CD4/CD8（P=0.060）和基线HIV-1 DNA载量值（P=0.003），将这3个因素纳入多因素logistic分析结果显示，影响因素为基线HIV-1 DNA载量值。见表 1。
本研究发现，113例HIV-1感染者的HIV-1 DNA载量值在抗病毒治疗后第1年随访下降幅度最大，随后下降到一定水平之后保持稳定不再下降，维持在380拷贝/106 PBMCs，这与Besson等[10]和Koelsch等[11]研究结果相似。抗病毒治疗初期HIV-1 DNA载量值大幅下降的原因是游离HIV-1 DNA较易被清除，抗病毒治疗第1年被清除的多数为该类型HIV-1 DNA[12]，但整合的HIV-1 DNA很难被清除，导致抗病毒治疗后期DNA水平降低不明显。据估计，抗病毒治疗1年之后，HIV-1 DNA半衰期为13年[13]。
开始抗病毒治疗后，HIV-1 DNA载量值在不同个体中显示出明显差异。一般认为影响HIV-1 DNA载量的因素有抗病毒治疗前HIV-1 DNA载量值（基线HIV-1 DNA载量）、基线病毒载量、基线CD4计数、基线CD8计数、感染至开始治疗时间间隔等[13-15]。本研究通过对113例HIV感染者治疗后1~6年数据分析结果表明，与HIV-1 DNA载量值相关的因素为基线HIV-1 DNA载量值。表明被HIV感染且形成前病毒的CD4计数是影响HIV储存库规模的关键因素，被感染的CD4越多，则HIV储存库越不易被清除。本研究结果显示，基线CD4计数、感染至开始治疗时间间隔等因素对HIV-1 DNA载量值无显著关系，这与其他研究结论有所区别。考虑到本研究样本有限，且参与分析的因素仅限于感染者的一般人口统计学信息，研究结果具有一定的局限性。
综上所述，HIV-1 DNA载量是治疗效果评估的重要指标。早诊断与早治疗措施有利于降低HIV-1 DNA载量和HIV-1感染者的免疫功能重建。这一结果印证了HIV-1核酸诊断的重要意义，为核酸检测的应用提供了重要的参考依据，也对今后HIV-1诊断和抗病毒治疗工作提出了更高的要求和挑战。
利益冲突 所有作者声明无利益冲突
作者贡献声明 王继宝、陈凯：研究设计、数据收集、数据分析、论文撰写、论文修改；赫晓霞：数据收集；龚渝蓉、杨锦、段星、王译葵、杨跃诚、叶润华：数据收集、数据整理；蒋岩、段松：研究设计；邢文革：论文修改
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