流行性腮腺炎(腮腺炎)，是由腮腺炎病毒(MuV)引起的一种急性呼吸道传染病，人群普遍易感，好发于儿童及≤15岁青少年，常在托幼机构及学校等聚集流行。腮腺非化脓性炎症、腮腺区肿痛为腮腺炎典型临床症状，此外，腮腺炎的发病常伴有多器官损伤，严重者可导致伤残或死亡^[1]。该病至今尚无特效药物治疗，控制腮腺炎感染的唯一有效措施是接种疫苗。自2008年我国将腮腺炎纳入计划免疫后^[2]，各省的腮腺炎发病率虽然呈大幅度下降趋势，但各地市仍不时的出现散发和暴发病例，发病的年龄组及季节性周期也有所变化。本研究分析福建省2005—2017年腮腺炎流行病学及病原学特征变化情况，为腮腺炎防控工作提供参考。

资料与方法

1.资料来源：中国疾病预防控制传染病报告信息管理系统。实验室监测资料来自福建省CDC免疫规划所省级麻疹实验室。腮腺炎疫情相关资料来自于主动搜索、入户访谈、查阅接种证。

2.标本来源：MuV株分离自2011年福建省三明市和2015年莆田市两地腮腺炎疫情暴发点。采集的咽拭子标本保存于2 ml标本收集液中，24 h内冷藏运送到省级CDC麻疹实验室进行病毒分离、鉴定，24 h内不能送达，则-70 ℃保存。

3.病毒分离及序列扩增：MuV分离培养采用Vero细胞，培养14 d，当75%细胞出现病变时，确定为阳性。MuV的RNA提取采用DNA/RNA核酸提取试剂盒(西安天隆科技有限公司)。针对MuV株小疏水蛋白基因316个核苷酸片段进行RT-PCR扩增[TaKaRa One Step RNA-PCR kit(AMV)，大连宝生物工程有限公司]^[3]。扩增后的PCR产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳鉴定。挑选有目标条带的产物送上海铂尚生物科技有限公司测序。

4.序列整理及分子生物学分析：使用Sequencher 4.1.4软件对基因序列进行整理拼接。从基因数据库(GenBank)中获取MuV各基因型的参考株序列，见文献[4]。通过MEGA 5.0软件对整理后序列进行基因亲缘性关系分析。

5.统计学分析：采用SPSS 18.0软件分析，运用描述流行病学的方法，采用率的比较和χ²检验。检验水准α＝0.05，双侧检验。

结果

1.流行概况：2005—2017年福建省共报告腮腺炎病例83 959例，无死亡病例。发病呈先下降后上升又下降的趋势。发病率从2005年的25.6/10万下降至2007年的9.8/10万，而后又开始逐年上升，2011年达到最高峰(43.2/10万)，随后逐年下降，2017年最低(7.5/10万)，年平均报告发病率为17.6/10万。见表 1。

2.时间分布：2005—2017年福建省腮腺炎发病呈明显的双峰特点，第1个发病高峰在4—7月，第2个发病高峰在10月至次年1月。近年来2个高峰期所占的发病数比例有所变化。在第1个发病高峰期，2005年4—7月发病数占全年病例数的58.0%(5 221/9 000)，2012年达到最高为59.6%(8 338/13 981)，随后开始下降，到2017年为41.7%(1 209/2 897)，与2005年同期相比下降了16.3%。第2个发病高峰期，2005年10月至次年1月腮腺炎发病数占全年病例数的24.2%(2 175/9 000)，2012年达到最低为18.3%(2 561/13 981)，随后逐年增加，到2017年为31.6%(914/2 897例)，与2005年同期相比增加了7.4%。虽然2个发病高峰有细微变化，但每年的发病低峰期均在2月和9月。见图 1。

3.人群分布：2005—2017年福建省腮腺炎报告病例数居前3位的人群依然是学生、幼托儿童、散居儿童，年均病例数占总病例数的89.2%(5 814/6 517)。病例主要集中在＜15岁组，年均病例数占总病例数的82.3%(5 361/6 517)，其中5~9岁组年均病例数占38.8%(2 527/6 517)，10~14岁组年均病例数占26.3%(1 716/6 517)。

4.地区分布：2005—2017年福建省9个地级市及平潭综合实验区均有腮腺炎病例报告，发病率位居前4位的是龙岩市(30.7/10万)、三明市(29.4/10万)、宁德市(26.9/10万)和厦门市(21.1/10万)，发病率最少的是泉州市(9.9/10万)。

5.疫情暴发情况：2005—2017年福建省共报告腮腺炎暴发疫情101起，报告病例数3 816例，均发生在学校等聚集地，农村中小学校共发生42起，病例数为1 253例，占总病例数的32.9%，城镇中小学及中等教育学校共发生46起，病例数为1 958例，占总病例数的51.3%。

6.病原学监测：通过Vero/Slam细胞分离培养、PCR及基因测序拼接，最终获得12株MuV(三明市3株、莆田市9株)小疏水蛋白基因序列信息。收集NCBI数据库近年来流行于我国的MuV G基因型病毒株序列^[4]，与现有的MuV 12种基因型标准参考株和疫苗株序列构建系统发育树比较，发现辽宁、陕西、江苏省报道的MuV G基因型病毒株与福建省分离的MuV株在核苷酸和氨基酸上均具有很高的同源性，福建、江苏、辽宁省的分离株处于进化树的同一个分支上，而陕西省分离株则处于MuV G基因型的另一个分支上(图 2)。

MuV分离株核苷酸及氨基酸同源性比较分析发现，2011年辽宁省MuV分离株与2015年福建省MuV分离株比较，其核苷酸及氨基酸同源性最高(98.1%~99.1%与91.1%~93.0%)，其次为2011年福建省MuV分离株(96.8%~97.2%，91.1%~93.0%)。2011年辽宁省MuV分离株与2011年福建省MuV分离株在核苷酸及氨基酸同源性上的达100.0%。另外，与A型疫苗株和国内流行的F型优势毒株的核苷酸及氨基酸同源性比较，2015年福建省MuV分离株相比于2011年福建省MuV分离株，差异进一步加大，表明基因SH区已经有所变异。见表 2。

将福建省2011及2015年分离的MuV株SH区316个核苷酸序列同MuV G基因型标准株进行对比，发现病毒株存在多个核苷酸位点的变异。见表 3。福建省2015年分离株出现11个位点变异。而福建省2011年分离株仅出现3个变异位点，不同年代的病毒株未发现共同突变的核苷酸位点。福建省2015年分离株突变的核苷酸位点中有部分导致了MuV在SH基因编码的57个氨基酸中的6个位点变异，如第17位上由L→F，第20位上由L→P，第28位上由I→L，第48位上由F→S，第56位上由S→L，第57位上由L→P，而福建省2011年病毒株变异的3个位点核苷酸位点均未引起氨基酸变异。

讨论

1989年腮腺炎虽被纳入我国丙类传染病管理，但直到2004年腮腺炎才列入疫情报告，开始网络直报，随后才有较为完整系统的发病资料^[5]。2005—2017年福建省腮腺炎发病资料分析发现，福建省腮腺炎年平均发病率为17.6/10万，低于全国平均水平(19.2/10万左右)^[4]。季节性分布特征明显，呈明显的双峰分布，发病时间与学校开学时间相吻合，腮腺炎易在人群密集的学校区域聚集流行。这些特征和先前报道相一致^[6-7]。2012—2017年间福建省腮腺炎发病的第1个发病高峰有减弱趋势，而第2个发病高峰有增强的趋势。导致这种变化的原因目前还不清楚，后续还需进一步监测分析。人群分布显示福建省腮腺炎与国内其他省的情况相同^{[4-5, 8]}，主要发病人群以学生、幼托儿童、散居儿童为主，其中5~9岁儿童是腮腺炎病例的高发人群，表明腮腺炎预防工作重点关注中小学生。福建省腮腺炎未发现明显的地区分布差异。

2008年4月福建省将麻疹腮腺炎联合减毒活疫苗(MM)和麻风腮联合减毒活疫苗(MMR)纳入一类疫苗扩大免疫规划项目(EPI)^[9]，对18~24月龄组儿童实行1剂次免疫程序。腮腺炎在纳入EPI后，由于人群中的保护性抗体水平低，免疫屏障还未形成，故初期发病率未见明显下降，但随着疫苗接种覆盖率的提高，腮腺炎的发病率得到有效控制，并有逐年下降趋势。即便如此，腮腺炎疫情在福建省各地还时有暴发，而且城镇中小学及中等教育学校的发病率(51.3%)高于农村中小学(32.9%)，这与邓秋云等^[10]报道的腮腺炎乡村疫情较城镇严重刚好相反，可能近年来乡村人口的大量外出务工，使得乡村人口密度下降，有效阻断了疫情的传播途径。

目前以腮腺炎病毒SH基因核苷酸序列差异性为标准，将MuV分成12种基因型(A~L)，各基因型的分布有一定的地域性^[11]。2010年之前我国监测的MuV均为F基因型^[12-13]，未发现其他基因型别。而2011年后陕西省、福建省、江苏省、辽宁省和北京市等地先后均监测到MuV G基因型病毒株^[14-18]。2015年底福建省莆田市疫情再次监测到MuV G基因型病毒株，证明疫情暴发是由G基因型MuV引起的^[15]，推测2011—2015年福建省存在MuV G基因型病毒株的流行。与其他省分离的MuV G基因型病毒株序列比较发现，辽宁、江苏省报道的G基因型病毒株与福建省分离的G基因型病毒株在核苷酸和氨基酸上均具有很高的同源性，同处于进化树的一个分支。与福建省2015年病毒株核苷酸及氨基酸同源性最高为辽宁省2011年病毒株(98.1%~99.1%，91.1%~93.0%)，其次为2011年福建本省分离的病毒株(96.8%~97.2%，91.1%~93.0%)。辽宁省2011年病毒株与福建省2011年病毒株氨基酸同源性达100%，但由于辽宁省2011年病毒株的监测资料很少^[17]，无从探究不同疫情间是否存在联系，是否与福建省MuV G基因型病毒株来自同一传染源需进一步监测。我国使用的腮腺炎疫苗为A型疫苗株(Jeryl-Lynn株)，同源性分析发现国内G型病毒株与A型疫苗株在核苷酸和氨基酸上存在较大差异，福建省2015年病毒株与A型疫苗株的核苷酸和氨基酸同源性差异最大(82.9%~83.2%，73.2%~78.9%)。虽然有报道认为不同的MuV基因型之间有抗原交叉性，这种抗原交叉性可保护接种疫苗后的人群免受不同基因型MuV的感染^[19]，但Nöjd等^[20]发现MuV的这种抗原交叉性是有限的，不同基因型之间存在着抗原差异，接种同一种疫苗所产生的抗体对不同种基因型的保护效果是不同的。美国、爱尔兰、英国近年来相继出现了A型疫苗株对G型病毒株免疫效果不佳的报道^[21-22]，发现腮腺炎暴发于高免疫人群，且腮腺炎疫苗接种覆盖率高，甚至62%完成了2剂次免疫程序^[23]，排除疫苗本身时效性外^[24]，对现有的疫苗株对不同基因型MuV的保护效果存在质疑。随着MuV在人群中的长期传播及承受的免疫压力，MuV基因区可能出现新的变异。分析福建省2015年和2011年MuV分离株在SH区316个核苷酸中变异情况发现，前者11个位点出现变异，后者仅出现3个变异位点。而且2015年福建省MuV分离株突变的核苷酸位点还导致了SH基因编码57个氨基酸中的6个氨基酸发生变异。虽然目前还不清楚这些突变位点是否与病毒的免疫源性有关，但这些突变无疑增加了福建省G基因型MuV与A型疫苗株在核苷酸和氨基酸同源性上的差异，对A型疫苗的免疫保护效果又提出了新的挑战。

本研究存在不足。2005—2017年福建省腮腺炎流行病学资料虽然较为系统完整，但MuV病原学监测和疫情现场资料获取相对薄弱，福建省MuV病原学监测缺乏连续性，分离病毒株数量和型别有限，不能很好地揭示福建省MuV的具体传播情况，后续还应加强腮腺炎流行病学与病原学的监测。

综上所述，2005—2017年福建省腮腺炎发病逐年下降，预防工作要重点关注中小学生，MuV G基因型病毒株在福建省存在传播链，且在SH基因编码区发现部分氨基酸变异。需进一步加强福建省腮腺炎流行病学及病原学监测工作。

利益冲突: 无