呼吸道感染是儿童常见的感染性疾病，严重威胁儿童健康。Williams等^[1]报道的数据显示，2000年全世界约有190万（160万～220万）5岁以下儿童死于急性呼吸道感染（acute respiratory infections，ARI）。呼吸道病毒是导致人类罹患呼吸道疾病最常见的病原体，目前已经证实急性呼吸道感染中80%以上是由病毒引起，包括呼吸道合胞病毒（RSV）、流感病毒（IV）、副流感病毒（PIV）、腺病毒（ADV）、鼻病毒（RV）及人偏肺病毒（hMPV）等^{[2, 3]}。同一种呼吸道病毒可引起多种临床症状，不同的呼吸道病毒又可引起相同的临床症状而且呼吸道病毒感染存在显著的地域流行特征，了解儿童呼吸道感染病毒病原学特点和流行特征，对该类疾病的防治非常重要。本研究对2011年1月至2013年12月湖州市妇幼保健院住院的呼吸道感染患儿的呼吸道标本进行了常见病毒病原学检测和分析，现将结果报告如下。

（1）研究对象：选择2011年1月至2013年12月湖州市妇幼保健院住院的临床诊断为呼吸道感染的患儿共6 089例。其中男3 694例，女2 395例，年龄3 d至12岁，≤6月龄3 582例，～1岁1 585例，～3岁595例，～5岁208例，＞5岁119例；呼吸道感染诊断标准参照《诸福棠实用儿科学》第7版^[4]。上呼吸道感染纳入标准：发热（≥38.0 ℃），流涕、打喷嚏、咽喉部不适等上呼吸道急性炎症表现者，病程＜5 d；排除非感染性病因（如过敏等）所致的上呼吸道急性炎症。下呼吸道感染纳入标准：患者出现发热、咳嗽、痰粘稠，或肺部出现细湿啰音，并X线显示肺部炎症并实质性改变；排除非感染性原因如肺栓塞、心力衰竭、肺水肿、肺癌等所致下呼吸道胸片的改变。

（2）研究方法：① 试剂与设备：荧光显微镜、37 ℃恒温水浴箱、离心机、涡旋振荡器、呼吸道病毒抗原检测试剂盒（美国Diagnostic Hybrids Inc的D³ Ultra^TM DFA Respiratory Virus Screening & ID Kit）等。②实验室检测：采用直接免疫荧光法，对患儿鼻咽分泌物进行呼吸道合胞病毒，甲、乙型流感病毒（IV-A、IV-B），腺病毒，副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型（PIV-Ⅰ、PIV-Ⅱ、PIV-Ⅲ）等7种呼吸道常见病毒抗原检测。①将鼻咽分泌物标本离心去除上清留沉淀；PBS溶液洗涤、溶解，玻片上点8个样孔，每个点加25 μl细胞悬液，风干或自然干燥。②冷丙酮固定风干，加1滴相应的荧光抗体，37 ℃孵育，用1×洗涤液洗涤，蒸馏水洗1 min，加1滴封闭液，封片后在荧光显微镜下观察。③阳性细胞内显示苹果绿荧光，阴性被Evans蓝染成红色，同时排除非特异性染色，200倍显微镜下每视野找到≥2个阳性细胞判为标本阳性。

（3）统计学分析：采用SPSS 19.0统计软件进行数据处理，计数资料组间率的变异采用χ²检验，有序分组资料采用χ²趋势性检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

（1）呼吸道病毒检出情况：2011－2013年6 089例送检标本中，检出至少一种病毒的1 337例，阳性率21.96%。其中单一感染1 308例，占97.83%（1 308/1 337）；混合感染29例，占2.17%（29/1 337）。单一感染中以RSV检出率最高，为16.47%（1 003/6 089），其后依次为 PIV-Ⅲ、ADV、IV-A、PIV-Ⅰ、IV-B、PIV-Ⅱ；29例混合感染中，23例为RSV＋ PIV-Ⅲ，2例为 RSV＋ADV，RSV＋IV-B、RSV＋PIV-Ⅰ、 RSV＋PIV-Ⅱ、ADV＋PIV-Ⅲ各1例。呼吸道病毒总检出率、RSV检出率有趋势改变现象，差异有统计学意义（χ²＝26.778、16.777，P＝0.000），其余差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 1。

表 1 不同时间段采集标本中呼吸道病毒检出情况

表选项

（2）呼吸道病毒感染的季节性分布：不同病毒其流行特性不同，感染高峰的季节也不同，不同季节儿童呼吸道病毒检出率差异有统计学意义（χ²＝350.339，P＝0.000），以冬春季检出率最高，夏季检出率最低。不同病毒感染高峰不同，RSV的感染高峰是冬季，秋春季节也较常见，夏季的检出率很低；PIV-Ⅲ的感染高峰是春夏季，ADV的感染高峰是春季，其他病毒感染率均较低且全年散发，RSV、IV-A、PIV-Ⅰ、PIV-Ⅲ、ADV、混合感染检出率差异有统计学意义（χ²＝ 481.038、14.790、16.087、88.123、52.227、8.619，P＜0.05），其余差异无统计学意义（P＞0.05），各病毒检出情况见表 2。

表 2 不同季节呼吸道病毒感染情况

表选项

（3）呼吸道病毒感染与年龄的关系：不同年龄组间呼吸道病毒的总检出率不同，以≤6月龄组儿童呼吸道病毒检出率最高，以＞5岁组儿童呼吸道病毒检出率最低，总检出率随年龄增长呈下降趋势，差异有统计学意义（χ²＝114.583，P＝0.000）。随年龄增长RSV、PIV-Ⅲ检出率呈下降趋势，ADV检出率呈上升趋势，差异有统计学意义（χ²＝ 146.678、16.216、51.404，P＝0.000），其余差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 3。

表 3 不同年龄儿童呼吸道病毒感染情况

表选项

（4）呼吸道病毒感染与性别的关系：3 694例男性儿童中呼吸道病毒总检出率为22.20%（820/3 694），2 395例女性儿童中呼吸道病毒总检出率为21.59%（517/2 395），差异无统计学意义（χ²＝0.317，P＝0.573）；不同性别间各种呼吸道病毒病原体检出率差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 4。

表 4 不同性别儿童呼吸道病毒感染情况

表选项

ARI是儿童时期的常见病和多发病，尤其是下呼吸道感染，占儿科住院患儿的24.5%～65.2%^[5]。近年来，随着抗菌药物的广泛使用，细菌性感染有所下降，大部分急性下呼吸道感染疾病中以病毒引起最为常见，并呈一定的地域分布和季节流行趋势。呼吸道病毒感染力强，传播速度快，易造成局部流行，对于住院儿童更易引起多重感染^{[6, 7]}。 因此进行早期快速的呼吸道病毒病原检测、了解流行特征对临床诊断及治疗有重要意义。

本研究显示，2011－2013年6 089例患儿中，1 337例检出至少1种病毒，总检出率21.96%，呼吸道感染患儿中以RSV检出率最高，为16.47%，其次是PIV-Ⅲ、ADV，混合感染较低，病毒谱主要构成排列与国内外的报道基本一致^{[8, 9, 10, 11, 12, 13]}，说明RSV是本地儿童呼吸道感染的首要病原。RSV是世界范围内儿童严重呼吸道疾病最重要的病毒病原之一，是继肺炎链球菌、流感嗜血杆菌之后儿童肺炎死亡第三个重要原因，2005年全球5岁以下儿童估计有6.6万～19.9万例因RSV感染导致肺炎死亡^[14]。因此，作为一种广泛分布的呼吸道病毒，需要我们高度关注，重点防治。男女性儿童间各种病毒病原检出率和总检出率差异无统计学意义（P＞0.05），说明呼吸道病毒感染无性别差异。呼吸道病毒流行常有一定的季节性，不同病毒其流行特性不同，感染高峰的季节也不同。从本研究的结果来看，不同的季节呼吸道病毒检出率不同，以冬春季检出率最高，夏季检出率最低，差异有统计学意义。不同病毒感染高峰不同，RSV的感染高峰是冬季，秋春季节也较常见，夏季的检出率很低；PIV-Ⅲ的感染高峰是春夏季，ADV的感染高峰是春季，其他病毒感染率均较低且全年散发，与国内外报道基本一致^{[8, 9, 10, 11, 12, 13]}。病毒的这种季节性可能是由各地气候差异引起，气候因素对病毒的流行及季节性起着相当重要的作用^[11]。因此，要多注意气候的变化，冬季要注意防寒保暖，要侧重于RSV感染的防治，有效控制呼吸道传染病的传播。连续监测儿童急性呼吸道感染的病毒流行季节，将提高对疾病暴发的预警，对易感人群适时开展免疫预防^[8]。

从不同年龄组患儿病毒的检出率来看，以≤6月龄组儿童呼吸道病毒检出率最高，以＞5岁组儿童呼吸道病毒检出最低，病毒总检出率随年龄的增长逐渐下降，说明呼吸道感染与年龄相关，年龄越小越易感染，这可能与母传抗体降低，而自身体液免疫功能尚未完善，产生的免疫球蛋白水平不高有关。本研究结果显示1岁以内婴幼儿RSV、PIV-Ⅲ检出率为18.39%、3.10%，且RSV、PIV-Ⅲ易发生合并其他病毒感染，因此RSV、PIV-Ⅲ是1岁以内婴幼儿呼吸道感染最重要的病原体，是防治的重点。本研究结果还显示ADV在1岁以上儿童中检出率较高，5岁左右学龄儿童检出率最高，有随年龄增长呈上升趋势，国内外曾有报道ADV在学校中暴发流行，且ADV所致肺炎病情通常较重等^{[15, 16, 17, 18]}。因此要做好相关年龄段儿童ADV感染的监测及防护工作，警惕ADV引起儿童呼吸道感染暴发。

综上所述，呼吸道感染以RSV、PIV-Ⅲ感染较为多见，低龄儿童容易受到病毒感染，1岁以下婴幼儿为发病高峰。呼吸道病毒感染存在季节性特征，冬季作为高发季节尤其应当做好预防保护。在诊治儿童呼吸道感染时，要考虑不同病毒的流行特性，及时行呼吸道病毒病原学的检测，根据不同病原体合理用药、早期治疗，同时应加强婴幼儿的疾病预防和保健工作。