女贞子为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait.的干燥成熟果实，具有滋补肝肾、明目乌发的功效^[1]，其主要活性成分为萜类和苯乙醇苷类等^[2]有机成分与相关无机元素。女贞子始载于《神农本草经》^[3]，列为上品，谓其味苦平，主补中，安五脏，养精神，除百病。女贞子效果确切，使用历史悠久，其饮片入药的中成药制剂达115种之多^[4]。2013年国内启动了第4次中药资源普查项目，对全国范围内中药资源进行统计和整理，发现女贞子分布区域广、产地多，各产地自然气候条件和采收加工差异等因素导致其质量参差不齐，对其质量评价主要集中在特女贞苷、女贞苷等有机成分分析方面，对于无机元素的相关研究较少。无机元素对维持机体正常生理状态有着不可忽视的作用，中药的药理活性和疗效不仅与有机成分有关，而且与其所含金属元素的种类及含量密切相关^[5-6]。例如锶对人体骨代谢具有双重作用，既能促进成骨细胞分化，又会抑制破骨细胞形成，其化合物雷奈酸锶在临床上用于治疗骨质疏松症^[7-8]；锰在内分泌、神经等系统中发挥的作用与中医“肾”的功能完全吻合，并且锰是线粒体SOD的活性部分，缺锰会使SOD活性降低，补充锰可提高机体抗病能力，达到滋补强壮、祛病健体的目的^[9]，临床上肾阴虚多采用含锰较高的中药进行治疗^[10-11]。无机元素的含量与女贞子的采收时间等也具有相关性，缪军强等^[12]对同一产地不同采收时间的女贞子矿物元素含量进行了比较，发现铜元素含量随着采收月份的推迟逐渐升高。因此，对于女贞子的质量控制，应对特女贞苷等有机化合物和无机元素的含量共同进行规定，确保其质量。

本实验采用ICP-MS法，对全国第4次中药资源普查所收集的不同产地的48批女贞子样品中21个无机元素进行了测定，同时，还对特女贞苷含量和百粒重进行测定，为全面了解女贞子质量现状和进一步完善女贞子的质量控制和安全性评价标准提供数据支持。

1 材料与方法 1.1 仪器与试剂

Scientific X Series 2电感耦合等离子体质谱(ICP-MS，Thermo Fisher)，Multiwave型微波消解仪(安东帕)，Milli-Q系列超纯水处理系统(美国密理博公司)。

元素标准物质：铅(批号GSB04-1742-2004)、镉(批号GSB04-1721-2004)、砷(批号GSB04-1714-2004)、汞(批号GSB04-1729-2004)、铜(批号GSB04-1725-2004)、铝(批号GSB04-1713-2004)、铬(批号GSB04-1723-2004)、锰(批号GSB04-1736-2004)、钯(批号GSB04-1743-2004)、钡(批号GSB04-1717-2004)、钨(批号GSB04-1760-2004)、锶(批号GSB04-1754-2004)、锗(批号GSB04-1723-2004)、铟(批号GSB04-1731-2004)、铋(批号GSB04-1719-2004)，镍、钼、硒、镝、铊、银、锡、铍、锑等21个单元素对照溶液，质量浓度均为1 000 mg·L^–1，均购自国家有色金属及电子材料分析测试中心。

样品来源于第4次资源普查采集的48批女贞子药材，经北京中医药大学李向日教授鉴定为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait.的干燥成熟果实，其中安徽6批、四川4批、云南5批、湖南13批、山西8批、河南12批，详细信息见表 1。

1.2 金属元素含量的测定 1.2.1 对照品储备溶液的制备

分别精密量取上述21个单元素对照品溶液适量，用5%硝酸溶液稀释制成每1 mL分别含铅、砷、钯、钨、镍、铬、锰5 μg，含铝、钡、铜、锶50 μg，含镉、钼、硒2.5 μg，含汞、镝、铊、银、锡、铍、锑0.5 μg的溶液，即得。

1.2.2 对照品溶液的制备

精密量取上述对照品储备液适量，用5%硝酸溶液稀释制成每1 mL含铅、砷、钯、钨、镍、铬、锰0、1、5、10、20、50 ng，含镉、钼、硒0、0.5、2.5、5、10、25 ng，含铝、钡、铜、锶0、10、50、100、200、500 ng的系列浓度混合溶液。另精密量取汞，镝、铊、银、锡、铍、锑对照品储备液适量，用5%硝酸溶液稀释制成每1 mL含0、0.1、0.5、1、2、5 ng的溶液。

1.2.3 内标溶液的制备

精密量取锗、铟、铋单元素对照品溶液适量，用水稀释制成每1 mL各含1 μg的混合溶液，即得。

1.2.4 供试品溶液和空白溶液的制备

精密称取药材粉末0.5 g于高压消解罐中，加硝酸7 mL，放置1 h，待反应不剧烈后加盖密封，装入微波消解仪中，设置功率模式消解程序，第一阶段10 min升至1.1 kW，保持10 min；第二阶段15 min升至1.4 kW，保持20 min。待冷却后取出，缓慢打开罐盖排气，将高压消解罐放入控温电热板上，于140 ℃赶酸。消解罐取出放冷，将消化液转移至50 mL量瓶中，用少量水多次洗涤消解罐，洗液合并于量瓶中，加内标溶液(1 mg·L^–1)200 μL，用水稀释至刻度，摇匀备用；除不加内标溶液外，其余同法制备试剂空白溶液。

1.2.5 测定条件

ICP-MS条件：射频功率1.2 kW，采样深度15 mm，辅助气(氩气)流速0.8 L·min^–1，冷却气流速13.0 L·min^–1，蠕动泵转速30.0 r·min^–1，通道为3，重复次数为3，扫描次数为30，检测方式为自动。

2 结果与分析 2.1 实验方法学 2.1.1 标准曲线制备

根据样品中待测元素的水平配制对照品溶液，依次测定21个无机元素的系列质量浓度对照品溶液，按测定条件以对照品质量浓度(X)为横坐标，对照品峰强度(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，得各元素的回归方程、相关系数。见表 2。

2.1.2 检测下限

将与试样同步处理的空白溶液平行测定6次，取6次测定结果的3倍标准偏差(3σ)作为各元素的检测下限，结果见表 2。

2.1.3 精密度

取标准曲线第4点溶液，连续进样6次，分别以各元素峰面积值计算RSD，结果见表 2。

2.1.4 重复性

取2号样品约0.5 g，平行操作6份，分别按供试品溶液的制备方法操作，按“1.2.5”项下条件进行测定，计算各元素峰面积的RSD，结果见表 2。

2.1.5 加样回收率

取2号样品约0.5 g，平行操作6份，精密称定，置消解罐中，加入混合标准储备液1 mL，按“1.2.4”项下自“加硝酸7.0 mL”起操作，测定并计算加样回收率，结果见表 2。

2.2 元素含量测定

取各样品的供试品溶液，按上述条件测定3次取平均值，得女贞子的无机元素分析结果，见表 3。根据结果可知，铝含量很高，锰、锶含量相对较高。对其中重金属元素及有害元素镉、砷、铅、汞、铜等进行分析显示，云南省的2批女贞子样品(S9、S11)中未检测出汞元素。48份女贞子样品中，大多数无机元素的量均有一定的差异，其中铝、锰的含量差异悬殊，最高分别为494.712、110.169 mg·kg^–1，最低只有32.192、5.052 mg·kg^–1，表明不同产地的女贞子样品中各无机元素量差异较明显，但其元素分布规律却呈现相似的分布态势。

2.3 特女贞苷的含量测定

依据《中华人民共和国药典》(2015年版)女贞子项下含量测定的规定，对特女贞苷的含量进行测定，结果见表 3。其中4批样品(S2、S23、S29、S47)含量不符合标准，S29和S47样品的采收时间不符合规定，这可能是其含量较低的原因。

2.4 女贞子百粒重的测定

对女贞子逐批取样，每批样品的每个包装内至少在2~3个不同部位各取样品1份，混匀后取中位粒径的女贞子100枚，测定其质量。结果见表 3。

2.5 无机元素指纹谱的建立

取所有女贞子样品无机元素含量的均值，根据元素的定量测量结果，筛选出16个无机元素。为绘图过程的方便，把一些含量悬殊的元素同时缩小或扩大相同倍数至同一数量级(铝缩小10倍，铍、银、锡、锑、镝、钨、铊扩大100倍，硒、钼、钯扩大10倍)，见图 1。女贞子中无机元素的含量有差异，可以根据各元素分布规律区分。

3 讨论

本实验采用ICP-MS法测定了第4次全国中药资源普查采集的48批女贞子样品中的21个无机元素。结果显示，铝含量很高，锰、锶含量相对较高。《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》对药用植物原料、饮片、提取物及其制剂等的质量标准做了规定，其中重金属总量≤20.0 mg·kg^–1，铅≤5.0 mg·kg^–1，镉≤0.3 mg·kg^–1，汞≤0.2 mg·kg^–1，砷≤2.0 mg·kg^–1，铜≤20.0 mg·kg^–1。48批女贞子中共有4批样品重金属和有害元素超出规定，安徽省S3样品砷超标，河南省S36样品汞超标，湖南省样品S15和S30样品中铅、汞和镉均超标，且镉含量高达标准规定的2倍。

4批特女贞苷含量未达到《中华人民共和国药典》(2015年版)标准，其百粒重均小于1.80 g，其他44批含量合格样品百粒重均大于等于1.80 g，说明百粒重与样品特女贞苷含量具有相关性，可作为初步评价女贞子质量的方法，故建议《中华人民共和国药典》在女贞子项下增添百粒重标准。从收集的女贞子样品中特女贞苷含量和有害元素及重金属元素限量测定结果可知，全国范围内女贞子质量势态较优。特女贞苷含量未达标可能与植株树龄、采收季节、当地降水量、光照和未合理使用化肥等有关；重金属元素及有害元素含量超出标准限量，可能与各产地土壤，水源内相关元素含量，女贞子自身对相关元素的吸收能力，化肥使用方法和使用量对女贞子内部对各元素的吸收和循环效率的影响等因素有关，具体决定性影响因素还需进一步研究。