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文章信息
- 孙爱群, 田应洲, 李松, 熊荣川, 陈红
- SUN Aiqun, TIAN Yingzhou, LI Song, XIONG Rongchuan, CHEN Hong
- 龙里瘰螈与织金瘰螈的核型
- Comparative Studies on Karyotypes of Paramesotriton longliensis and P. zhijinensis
- 四川动物, 2015, 34(1): 81-83
- Sichuan Journal of Zoology, 2015, 34(1): 81-83
- 10.3969/j.issn.1000-7083.2015.01.013
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文章历史
- 收稿日期:2014-09-10
- 接受日期:2014-09-25
两栖纲Amphibia蝾螈科Salam and ridae瘰螈属Paramesotriton动物已报道有12种(费梁等,2005,2006,2009;李松等,2008a,2008b;Gu et al.,2011,2012;王超等,2013),即尾斑瘰螈P. caudopunctatus、中国瘰螈P. chinensis、德氏瘰螈P. deloustali、尔宓瘰螈P. ermizhaoi、富钟瘰螈P. fuzhongensis、广西瘰螈P. guangxiensis、香港瘰螈P. hongkongensis、龙里瘰螈P. longliensis、茂兰瘰螈P. maolanensis、武陵瘰螈P. wulingensis、云雾瘰螈P. yunwuensis、织金瘰螈P. zhijinensis。其中龙里瘰螈与织金瘰螈是李松等(2008a,2008b)发现的新种,前者分布于贵州省龙里县水场乡,后者分布于贵州省织金县城双堰塘。瘰螈属动物的染色体研究,国内仅见谷晓明(1995)、谷晓明和高晓东(1997)、章菊明等(1985)分别对尾斑瘰螈与中国瘰螈的报道,未见龙里瘰螈与织金瘰螈的染色体核型报道。笔者采用常规涂片法,对贵州产龙里瘰螈与织金瘰螈的染色体核型进行分析,旨在为瘰螈属的遗传、进化、发育、系统分类等研究提供基础资料。1 材料与方法
龙里瘰螈(4♀♀,5♂♂)与织金瘰螈(4♀♀,5♂♂)于2008年采于贵州省龙里县和织金县。
染色体制片按30 μg·g-1体质量的剂量对供试动物腹腔注射秋水仙素(含量0.5 mg·mL-1),14~18 h后活体解剖。分别取2种瘰螈的精巢与小肠,精巢于1%柠檬酸钠溶液中剪成约1.5 mm小块,小肠剖开后用1%柠檬酸钠溶液洗净,再剪成约1.5 mm左右的小块;吸去柠檬酸钠溶液,分别加KCl溶液(0.046 mol·L-1),室温下低渗30~40 min,甲醇与冰乙酸混合液(3∶1)固定2次,每次30 min,60%冰乙酸涂片,空气干燥。Giemsa(pH6.8)染色30 min,镜检,拍照。选择染色体分散良好的10个细胞进行测量,计算染色体的相对长度和臂比值。染色体分类按Levan等(1964)的标准划分。2 结果
2种瘰螈的染色体参数见表 1,染色体中期形态及核型见图 1。
龙里瘰螈的2n=24=16m+8sm,染色体臂数(NF)=48,其中No.7、10、11、12为亚中着丝粒染色体(sm),其余均为中着丝粒染色体(m)。按其相对长度可以分为3组:第1组(No.1~4)相对长度大于10,均为m;第2组(No.5~8)相对长度在7~10之间,No.7为sm,其余全为m;第3组(No.9~12)相对长度在7以下,除No.9为m外,其余为sm,并且No.12明显小于其他各对。
织金瘰螈的2n=24=20m+4sm,NF=48,其中除No.9、11为sm,其余均为m。按其相对长度也可以分为3组: 第1组(No.1~4)相对长度大于10,均为m;第2组(No.5~8)相对长度在7~10之间,均为m;第3组(No.9~12)相对长度在7以下,其中No.9、11为sm,No.10、12为m。
2种瘰螈均未发现与性别相关的异形染色体。3 讨论
我国蝾螈科已知有5属(叶昌媛,1993),可以划分为2支,蝾螈属Cynops、肥螈属Pachytriton、瘰螈属为一支,其核型极为相似,无近端着丝粒染色体(ST);疣螈属Tylototriton和棘螈属Echinotriton为另一支,有ST(谷晓明,田应洲,2000)。
瘰螈属动物基于线粒体Cyt b序列的系统发育树又可分为2支,一支为尾斑瘰螈种组,包括尾斑瘰螈、龙里瘰螈、茂兰瘰螈、武陵瘰螈及织金瘰螈,另一支为中国瘰螈种组,包括中国瘰螈、富钟瘰螈、香港瘰螈、广西瘰螈、德氏瘰螈、尔宓瘰螈(陈学平,2008;王会,2009;王超等,2013)。
从核型上看,中国瘰螈雌性2n=24=16m+8sm,雄性2n=24=17m+7sm,NF=48,其中No. 6、9、10、11为sm(章菊明等,1985;李树深,2007);尾斑瘰螈染色体数目2n=24=18m+6sm,NF=48,其中No.7、10、11为sm(谷晓明,高晓东,1997);龙里瘰螈的2n=24=16m+8sm,NF=48,其中No.7、10、11、12为sm;织金瘰螈的2n=24=20m+4sm,NF=48,其中No.9、11为sm。已知的4种瘰螈均属单型的对称核型(表 2)。龙里瘰螈与中国瘰螈均有4对近中着丝粒染色体,只是sm染色体所在序号不同而已,尾斑瘰螈有3对近中着丝粒染色体,织金瘰螈有2对近中着丝粒染色体。根据分子系统学研究,在尾斑瘰螈种组中,尾斑瘰螈与武陵瘰螈的亲缘关系较近,茂兰瘰螈、龙里瘰螈及织金瘰螈的亲缘关系较近。从核型上可看出,龙里瘰螈与中国瘰螈的亲缘关系较近,织金瘰螈与尾斑瘰螈的亲缘关系较近。
Wu等(2010)研究龙里瘰螈和织金瘰螈的线粒体ND2基因,结果表明两者的ND2遗传距离较小(p-distance<1.84%),据此判断2个物种的遗传分化不足以达到种级分化。本研究表明,织金瘰螈只有2对sm染色体,而龙里瘰螈有4对sm染色体,可为2个物种的成立提供核型上的佐证。
另外,近期野外调查发现,织金瘰螈成体有退化的3个鳃迹,繁殖期雄体尾椎骨外部皮肤呈浅黄色,而龙里瘰螈无鳃迹,繁殖期雄体尾部皮肤呈粉红色。繁殖季节的形态特征差异提供了不同物种间生殖前隔离基础,对于物种的识别更具生物学意义,可进一步说明龙里瘰螈与织金瘰螈应为2个相互独立的有效物种。龙里瘰螈与织金瘰螈的C带带型差异有待进一步研究。
种名 Species 序号 Number 相对长度 Relative length /%(x±SE) 臂比值 Arm ratio(x±SE) 类型 Type 龙里瘰螈 Paramesotriton longliensis 1 11.83±0.09 1.426±0.08 m 2 11.64±0.22 1.128±0.03 m 3 10.76±0.07 1.356±0.04 m 4 10.03±0.13 1.445±0.03 m 5 9.94±0.23 1.039±0.07 m 6 9.06±0.14 1.185±0.02 m 7 8.24±0.11 1.945±0.07 sm 8 7.79±0.13 1.055±0.14 m 9 6.06±0.13 1.323±0.08 m 10 5.34±0.10 2.347±0.04 sm 11 4.80±0.15 2.224±0.09 sm 12 3.35±0.09 1.73±0.01 sm 织金瘰螈 P. zhijinensis 1 13.87±0.20 1.114±0.03 m
2 11.76±0.08 1.310±0.06 m
3 10.68±0.08 1.329±0.08 m
4 10.31±0.15 1.047±0.10 m
5 8.91±0.19 1.407±0.11 m
6 7.92±0.19 1.104±0.02 m
7 7.32±0.21 1.636±0.12 m
8 7.12±0.14 1.075±0.02 m
9 6.35±0.16 2.564±0.03 sm
10 6.27±0.17 1.437±0.10 m
11 5.15±0.05 1.831±0.10 sm
12 4.33±0.15 1.528±0.04 m
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