文章信息
- 杨旭, 杨志玲, 汪丽娜
- Yang Xu, Yang Zhiling, Wang Lina
- 平茬更新代次及生长年限对厚朴生长和药用有效成分含量的影响
- Effects of Harvest Rotations and Growth Time on Growth and Medicinal Active Ingredient Content of Magnolia officinalis
- 林业科学, 2017, 53(1): 47-53
- Scientia Silvae Sinicae, 2017, 53(1): 47-53.
- DOI: 10.11707/j.1001-7488.20170106
-
文章历史
- 收稿日期:2015-07-15
- 修回日期:2016-12-14
-
作者相关文章
厚朴(Magnolia officinalis) 为木兰科(Mangonoliaceae) 厚朴属植物,其干燥根皮、干皮和枝皮可入药,性辛苦温,有燥湿消痰、下气除满之功效(国家药典委员会, 2005)。厚朴主要药用有效成分为厚朴酚与和厚朴酚。现代药理研究表明,其酚类成分能有效对抗各类炎症(Miyasaki et al., 2013),促进慢性粒细胞白血病患者淋巴细胞凋亡(Li et al., 2014),对肝癌、膀胱癌、皮肤癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌等多种癌症具有良好的功效(Chilampalli et al., 2011; Tsai et al., 2014; Zhou et al., 2013; Hahm et al., 2014; Chang et al., 2013);同时,其有效成分能清除体内自由基,保护心脑血管(Ho et al., 2012),是有效的抗焦虑药(Li et al., 2013)、镇静剂和抗惊厥药物(Chuang et al., 2013),还能有效治疗因记忆衰退引起的阿尔兹海默病(Lee et al., 2012),并且对因高脂饮食造成的脂肪肝有很好的疗效(Zhang et al., 2014)。
厚朴需生长10年以上才能剥皮利用,资源的生长速度远远赶不上资源的利用速度(杨洪兵等, 2007; 谌金吾等, 2013)。厚朴栽培投资回收期较长,且易受药材行情波动的影响,极大地损伤了农民的栽培积极性。厚朴基部萌蘖能力强,一直是营林中的一项不利因素。在湖北恩施、湖南永道等厚朴主要栽培区,农民自发形成收割平茬后保留主根,在次年主根萌发新稍,新植株生长6~7年之后再平茬1代,循环砍伐3次的栽培方法。这种方法培育的萌蘖苗没有缓苗期,植株在基径、胸径、树高等方面表现出显著的优势(林先明等, 2009),利用HPLC指纹图谱研究其药用有效成分,结果显示平茬植株符合药用要求(陈玲, 2006)。平茬技术不仅可以缩短厚朴缓苗期,提高厚朴林分利用期限,具有较好的经济效益,而且可避免砍树挖篼造成的水土流失,具有良好的生态效益。本研究探讨平茬更新不同代次及其生长年限对厚朴生长及药用有效成分的积累动态,以期为厚朴可持续速生丰产栽培技术提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验地及林分概况试验地湖南省安化县辰山林场位于雪峰山脉北端九龙池山系,地理位置为119°19′E,28°29′N,海拔950~1 020 m,土壤以黄壤和棕黄壤为主。
试验选择辰山林场培育的良种厚朴1代纯林,林分密度1.5 m× 2 m,经营管理模式为中等强度管理,造林前3年每年抚育2次,所选择的林分均生长于向阳的上坡位。
1.2 厚朴平茬再生方式试验所有平茬工作由辰山林场完成并记录。使用油锯对生长12年以上的厚朴进行平茬,保持断面平齐,皮不受损伤,平茬面与土壤齐平;平茬后于当年5~6月,在树兜基部喷施100 mol·L-1的吲哚乙酸10~20 mL,平茬前在树冠投影外围开环状沟施肥,每株施沼液5 kg或腐熟饼肥2 kg (2种肥料肥效相当)。
1.3 调查样地选取和调查方法选取不同平茬代次及生长4,6,8,10,12年的厚朴实生苗为对照。在实生苗生长12年时进行第1次平茬,生长2,4,6,8年的萌生植株,称为1代厚朴;在1代厚朴生长8年后进行第2次平茬,生长2,4,6,8年的萌生植株,称为2代厚朴;在2代厚朴生长8年后进行第3次平茬,生长2,4年的萌生植株,称为3代厚朴。每林分随机选取30株植株,测量树高及胸径。随机选取3株植株,齐地面伐倒后剥皮测其鲜质量,并晒干折成干质量,所得数据为厚朴树皮产量。每林分随机选取10株植株,选择离地1 m的树干,割取宽约5 cm、高约10 cm的树皮,采用游标卡尺测量树皮厚度,用树高、胸径及树皮厚度与生长年限的比值计算连年平均生长量。刮去外层栓皮,粉碎后将林分内所有个体混合,过60目筛备用。
1.4 厚朴酚与和厚朴酚含量测定厚朴酚类物质的含量测定参照2010版《中国药典》的方法(国家药典委员会, 2010)。
1.4.1 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(78:22) 为流动相,检测波长为294 nm。理论板数按厚朴酚峰计算应不低于3 800。
1.4.2 对照品溶液的制备取厚朴酚对照品、和厚朴酚对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每1 mL含厚朴酚40 μg、和厚朴酚24 μg的溶液。
1.4.3 供试品溶液的制备取本品粉末(过3号筛) 约0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,摇匀,密塞,浸渍24 h,过滤,精密量取续滤液5 mL置25 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。
1.4.4 有效成分的测定分别精密吸取2种对照品溶液各4 μL与供试品溶液3~5 μL,注入液相色谱仪,测定。以上所有样品重复3次。
1.5 数据分析采用PASW18单因素方差分析计算不同平茬代次及生长年限之间的厚朴胸径、树高等等指标差异,并用Excel2007及Origin8软件作图。
2 结果与分析 2.1 平茬代次及生长年限对厚朴树高和胸径生长的影响平茬代次及生长年限对厚朴树高生长的影响见图 1。平茬前厚朴的树高生长随生长年限增加呈现先快后慢的趋势,其转折点出现在8年左右,前8年厚朴树高年均增长量为0.87 m,8年之后树高增长速度减缓,仅为0.32 m。1~3代厚朴一直保持高速增长趋势,树高年均增长为1.24,1.18和1.12 m。平茬3次后大部分厚朴根逐渐腐烂,丧失了再生能力,但萌生植株还能保持较高的生长速率。为了进一步说明平茬代次对厚朴树高生长的影响,本研究比较了相同生长年限不同平茬代次的厚朴树高。结果表明,平茬后,萌生植株的树高显著高于平茬前,平茬1~2代厚朴生长6~8年的树高分别与未平茬生长8~10年的厚朴相当。
平茬代次及生长年限对厚朴胸径生长的影响见图 2。与树高生长相似,未平茬厚朴的胸径生长随生长年限增加同样呈现先快后慢的趋势,10年左右出现转折点,前10年厚朴胸径年均增长量为9.03 mm,10年后下降至1.55 mm,1~3代厚朴胸径生长速率均显著高于对照,年均增长量依次为11.67,10.44和12.45 mm。对不同平茬代次相同生长年限厚朴的胸径生长状况进行比较,结果显示,平茬后新植株的胸径显著高于平茬前。1代厚朴生长6年后,胸径与生长8年的对照植株相似,而生长8年的植株胸径甚至超过生长12年的对照厚朴;2代厚朴生长6年的植株胸径接近生长8年的对照厚朴,而生长8年的植株胸径也接近生长12年的对照厚朴,平茬3次后大部分厚朴根逐渐腐烂,失去利用价值。
厚朴的树皮产量是指用作药材部分的干皮、枝皮、根皮干质量的总和,通常生产上最主要的是干皮,本文的树皮产量即指厚朴干皮的干质量。对平茬前后不同生长年限厚朴的产量分析见图 3。未平茬的对照厚朴的树皮产量同样随生长年限增加呈现先快后慢的趋势,其转折点出现在10年左右,前10年厚朴树皮产量的年均增长量为0.55 kg,10年后下降至0.12 kg。平茬后随生长年限增加厚朴树皮产量显著增加,1,2代厚朴树皮产量的年均增长量为0.74,0.64 kg,3代厚朴因生长年限不足其产量较低。为了进一步说明平茬代次对厚朴树皮产量的影响,本研究比较了相同生长年限不同平茬代次厚朴的树皮产量。结果表明,平茬后,厚朴树皮产量迅速增加,1~2代厚朴生长6年后,其树皮产量分别与生长8年的对照厚朴相似,1~2代厚朴生长8年后,树皮产量则分别与生长10~12年的对照厚朴相当。
树皮厚度是决定厚朴质量的重要指标之一。平茬前后不同生长年限厚朴树皮厚度的生长状况见图 4。厚朴树皮厚度与平茬代次呈显著负相关,未平茬厚朴树皮厚度在6年时已达到药用要求,但由于在8~12年处于快速增长期。因此出于对厚朴产量和质量的考虑,一般厚朴栽培10~12年后砍伐质量最佳;1代厚朴树皮厚度生长6年后可达到药用要求,此后逐年增加,但增加的幅度显著低于平茬前。2代厚朴树皮厚度达不到药用要求,一般可做提取用,3代厚朴树皮极薄且脆,失去利用价值。
厚朴酚与和厚朴酚是厚朴的主要药用成分,其含量高低通常用来指示厚朴质量的优劣。1998版《中国药典》规定厚朴酚与和厚朴酚总量不得低于3.0%,2005年后各版《中国药典》规定厚朴酚与和厚朴酚总量不得低于2.0%。
平茬后不同生长年限厚朴药用有效成分含量见图 5和表 1。生长6年的对照厚朴,其酚类成分含量就达到药典规定的要求,此后逐年增加,到8~12年进入快速积累阶段,生长12年的厚朴其酚类成分总量可达到5.52%;平茬后由于根部提供营养,可使萌生植株有效成分含量得以迅速积累,生长6年的1代厚朴其酚类成分含量显著高于平茬前生长6年的植株,而生长8年的1代厚朴酚类成分含量则接近平茬前生长12年的植株;2代植株根系提供营养能力大大降低,厚朴酚类成分积累速度也显著低于1代厚朴,但平茬2代生长6~8年的厚朴酚类成分含量仍可达到药典规定的要求;3代植株中厚朴酚类成分含量极低,不再有利用价值。
厚朴是具有高萌蘖能力的树种,在野外状态下以萌生更新为主(杨旭等, 2013),而这种高萌蘖能力却成为厚朴营林中的不利因素。若科学利用,则可显著延长厚朴药材林分利用年限,降低林分营建成本,提高林分的经济效益。
本研究表明,平茬后厚朴树高、胸径、树皮产量及药用有效成分的积累速度都显著高于平茬前,说明厚朴在受到机械伤害后,可对失去的组织进行补偿生长。目前对萌蘖植物破坏后的再生生长机制已有众多研究。首先,地上部分的破坏导致根冠比严重失调,原有庞大根系吸收的水分及根系储藏的营养物质供给有限的地上组织,导致剩余组织的相对生长速率大幅度增大(Trmnble et al., 1993);其次,植株再生叶片幼嫩,具有较强的光合效率,可使可溶性碳水化合物含量增加等(李跃强等, 1996);再次,地上组织被破坏后,引起体内激素含量的变化,顶端优势消失,细胞分裂素(CK3) 含量显著增加,IAA/CK3减小,促进细胞分裂及生长,促使α-淀粉酶活性提高,最终使得根系储存的淀粉大量水解,为地上枝条的快速恢复提供原料(Van Dam et al., 2001);最后,合成地上组织生长所需蛋白质以氨基酸的形式迅速合成,储藏在根、枝干和皮层等部位,为植株再生生长和组织恢复提供有利的物质基础和能量来源(张海娜等, 2011)。平茬后厚朴的生长速率要显著高于平茬前,植株茎干、皮层部分都可能产生超补偿,使得植株胸径和树皮厚度提前3~4年恢复到平茬前水平。
木本植物受到严重伤害时,会使植物重返幼年相,提高再生组织的防御水平(Bryant et al., 1983)。这种防御包括形态学的防御,例如刺槐(Robinia pseudoaca) 刺长增加(Grubb, 1992)、悬钩子(Rubus hispidus) 和楤木属(Aralia) 植物皮刺增加(Abrahamson, 1975;Pollard, 1992)、异株荨麻(Urtica dioica) 刺毛密度增加(Pullin et al., 1989),还包括化学防御,如次生代谢产物的增加。厚朴酚、和厚朴酚是一类由苯丙素双分子聚合而成的天然化合物,属于木脂素类物质,在其生物转化过程中L-苯丙氨酸解氨酶(L-phenylalanin ammo-nialyase PAL) 具有重要的作用(Amblard et al., 2007)。因此,萌蘖植株中产生的包括苯丙氨酸在内的大量游离氨基酸为厚朴酚类的合成提供了物质基础,使得再生厚朴中酚类物质含量迅速增加,实现了次生代谢产物的超补偿。
另一方面,厚朴的萌芽能力随砍伐次数及伐桩年龄的增大而逐渐下降,这与大多数阔叶树种的研究结果(方升佐等, 2010; 田野等, 2012) 相似。这可能是由于地上部分的多次移除会减少养分向根系的回流,造成下一代次根系生长量降低(Ruess et al., 1998; Wildy et al., 2002)。此外,不断重复采伐大大增加了病菌侵染和内部生理失调的危险,从而导致母树桩死亡(Strong, 1989)。
对湖南省安化县厚朴林的平茬研究显示,平茬有利于厚朴林地生产力和生态环境的恢复与重建。但由于该县厚朴产业发展较好,药农对生长12年左右的0代厚朴和生长8年左右的1~2代厚朴就开始采伐,因此本研究还缺乏更宽年龄的厚朴样本。厚朴林分更新能力维持是一个非常复杂的问题,与不定芽的萌发能力、根系的生存力、伐桩的死亡率、地力的下降等方面密切相关,这些都有待于今后进一步研究,为厚朴乃至皮类药材资源的可持续利用提供更多的实践指导。
4 结论采用单因素方差分析研究不同平茬代次及生长年限的厚朴树高、胸径、树皮产量、树皮厚度及酚类成分的含量差异得知,平茬1~2次的厚朴,其树高、胸径及树皮产量与未平茬前的对照厚朴相比,可提前3~4年达到收益期;平茬后树皮厚度显著低于未平茬厚朴;平茬1次后萌生植株药用有效成分含量得以迅速积累,生长6~8年可达到药典要求,平茬2次后厚朴酚类成分的积累速度有所下降,平茬3次后厚朴无利用价值。这说明平茬能显著提高厚朴树高、胸径和树皮产量的年均增长量,使厚朴提前进入收益期,具有很高的经济和社会效益。平茬次数以1~2次为宜。
[] |
谌金吾, 杨占南, 胡庭坤, 等. 2013. 不同树龄凹叶厚朴7种次生代谢产物积累研究. 西南大学学报:自然科学版, 35(2): 27–34.
( Chen J W, Yang Z N, Hu T K, et al. 2013. Study on accumulation of seven secondary metabolites of Magnolia officinalis var. biloba Rehd. et Wils. with different tree ages. Journal of Southwest University:Natural Science Edition, 35(2): 27–34. [in Chinese] ) |
[] |
陈玲. 2006.厚朴药材(Cortex Magnolia officinalis) 质量评价研究.武汉:中国科学院研究生院(武汉植物园) 硕士论文. ( Cheng L.2006. Studies on the quality assessment of Cortex Magnolia officinalis. Wuhan:MS thesis of Graduate School of Chinese Academy of Sciences, Wuhan Botanical Garden. [in Chinese][in Chinese]) |
[] |
方升佐, 徐锡增, 吕士行, 等. 2000. 杨树萌芽更新及持续生产力. 南京林业大学学报, 24(4): 43–48.
( Fang S Z, Xu X Z, Lü S X, et al. 2000. Coppicing techniques of poplars and sustainable production. Journal of Nanjing Forestry University, 24(4): 43–48. [in Chinese] ) |
[] |
国家药典委员会. 2010. 中国药典. 北京: 化学工业出版社: 275.
( Committee of Pharmacopoeia. 2010. Chinese pharmacopoeia. Beijing: Chemical Industry Press: 275. [in Chinese] ) |
[] |
李跃强, 盛承发. 1996. 植物的超越补偿反应. 植物生理学通讯, 32(6): 457–464.
( Li Y Q, Sheng C F. 1996. Plant overcompensation response. Plant Physiology Communications, 32(6): 457–464. [in Chinese] ) |
[] |
林先明, 郭杰, 唐春梓, 等. 2009. 厚朴基部萌蘖的培养利用研究. 湖北林业科技(4): 25–28.
( Lin X M, Guo J, Tang C Z, et al. 2009. Research on cultivation and utilization of sprout shoot from basal Magnolia officinalis Rehd. et Wils. Hubei Forestry Science and Technology(4): 25–28. [in Chinese] ) |
[] |
田野, 刘文文, 方升佐. 2012. 平茬更新代次对杞柳生长及柳条产量和质量的影响. 南京林业大学学报:自然科学版, 36(2): 86–90.
( Tian Y, Liu W W, Fang S Z. 2012. Effects of harvest rotation on the growth, wicker production and quality of willow shrub. Journal of Nanjing Forestry University:Natural Sciences Edition, 36(2): 86–90. [in Chinese] ) |
[] |
杨旭, 杨志玲, 雷虓, 等. 2013. 濒危植物凹叶厚朴幼苗更新及环境解释. 林业科学, 49(12): 36–42.
( Yang X, Yang Z L, Lei X, et al. 2013. Characteristics and environmental interpretation of seedling regeneration in the endangered species Magnolia officinalis subsp.biloba. Scientia Silvae Sinicae, 49(12): 36–42. [in Chinese] ) |
[] |
杨洪兵, 石磊, 詹亚华, 等. 2007. 生长年限与产地加工等对厚朴浸出物的影响. 湖北中医杂志, 29(2): 90–95.
( Yang H B, Shi L, Zhan Y H, et al. 2007. Effect of growing year and field processed on extract content of Magnolia officinalis. Hubei Journal of Traditional Chinese Medicine, 29(2): 90–95. [in Chinese] ) |
[] |
张海娜, 方向文, 蒋志荣, 等. 2011. 柠条平茬处理后不同组织游离氨基酸含量. 生态学报, 31(9): 2454–2460.
( Zhang H N, Fang X W, Jiang Z R, et al. 2011. Free amino acid content in different tissues of Caragana korshinskii following all shoot removal. Acta Ecological Sinica, 31(9): 2454–2460. [in Chinese] ) |
[] | Abrahamson W G. 1975. Reproductive strategies in dewberries. Ecology, 56(3): 721–726. DOI:10.2307/1935508 |
[] | Amblard F, Govindarajan B, Lefkove B, et al. 2007. Synthesis, cytotoxicity, and antiviral activities of new neolignans related to honokiol and magnolol. ChemInform, 17(16): 4428–4431. |
[] | Bryant J P, Chapin Ⅲ F S, Klein D R. 1983. Carbon/nutrient balance of boreal plants in relation to herbivory. Oikos, 40(3): 357–368. DOI:10.2307/3544308 |
[] | Chang K H, Yan M D, Yao C J, et al. 2013. Honokiol-induced apoptosis and autophagy in glioblastoma multiforme cells. Oncology Letters, 6(5): 1435–1438. |
[] | Chilampalli C, Guillermo R, Zhang X, et al. 2011. Effects of magnolol on UVB-induced skin cancer development in mice and its possible mechanism of action. BMC Cancer, 11(11): 467–481. |
[] | Chuang D Y, Chan M H, Zong Y, et al. 2013. Magnolia polyphenols attenuate oxidative and inflammatory responses in neurons and microglial cells. Journal of Neuroinflammation, 10(1): 10–15. |
[] | Grubb P J. 1992. A positive distrust in simplicity-lessons from plant defences and from competition among plants and among animals. Journal of Ecology, 80(4): 585–610. DOI:10.2307/2260852 |
[] | Hahm E R, Sakao K, Singh S V. 2014. Honokiol activates reactive oxygen species-mediated cytoprotective autophagy in human prostate cancer cells. Prostate, 74(12): 1209–1221. DOI:10.1002/pros.v74.12 |
[] | Ho J H, Hong C Y. 2012. Cardiovascular protection of magnolol: cell-type specificity and dose-related effects. Journal of Biomedical Science, 19(1): 1–9. DOI:10.1186/1423-0127-19-1 |
[] | Lee Y J, Choi D Y, Han S B, et al. 2012. A comparison between extract products of Magnolia officinalis on memory impairment and amyloidogenesis in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease. Biomolecules & Therapeutics, 20(3): 332–339. |
[] | Li H Y, Ye H G, Chen C Q, et al. 2014. Honokiol induces cell cycle arrest and apoptosis via inhibiting class I histone deacetylse in acute myeloid leukemia. Journal of Cellular Biochemistry, 9(4): 287–298. |
[] | Li Y S, Hong Y F, He J L, et al. 2013. Effects of magnolol on impairment of learning and memory abilities induced by scopolamine in mice. Biological & Pharmaceutical Bulletin, 36(5): 764–771. |
[] | Miyasaki Y, Rabenstein J D, Rhea J, et al. 2013. Isolation and characterization of antimicrobial compounds in plant extracts against multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. PLoS One, 8(4): e61594. DOI:10.1371/journal.pone.0061594 |
[] | Pollard J A. 1992.The importance of deterrence: responses of grazing animals to plant variation//Fritz R S, Simms E L. Plant resistance to herbivores and pathogens: Ecology, evolution, and genetics. Chicago: Chicago University Press, 216-239. |
[] | Pullin A S, Gilbert J E. 1989. The stinging nettle, Urtica dioica, increases trichome density after herbivore and mechanical damage. Oikos, 54(3): 275–280. DOI:10.2307/3565285 |
[] | Ruess R W, Hendrick R L, Bryant J P. 1998. Regulation of fine root dynamics by mammalian browsers in early successional Alaskan taiga forests. Ecology, 79(8): 2706–2720. DOI:10.1890/0012-9658(1998)079[2706:ROFRDB]2.0.CO;2 |
[] | Strong T. 1989.Rotation length and repeated harvesting influence Populus coppice production. Forest Service: Research Note, 1-4. |
[] | Trmnble J T, Kolodny-Hirsch D M, Ting I P. 1993. Plant compensation for arthropod herbivory. Annual Review of Entomology, 38: 93–119. DOI:10.1146/annurev.en.38.010193.000521 |
[] | Tsai J R, Chong W, Chen Y H, et al. 2014. Magnolol induces apoptosis via caspase-independent pathways in non-small cell lung cancer cells. Archives of Pharmacal Research, 37(4): 548–557. DOI:10.1007/s12272-013-0232-1 |
[] | Van Dam N M, Baldwin I. 2001. Competition mediates costs of jasmonate-induce defences, nitrogen acquisition and transgenerational plasticity in Nicotiana attenuata. Function Ecology, 15(3): 406–415. DOI:10.1046/j.1365-2435.2001.00533.x |
[] | Wildy D T, Pate J S. 2002. Quantifying above-and below-ground growth responses of the western Australian oil mallee, Eucalyptus kochii subsp. plenissima, to contrasting decapitation regimes. Annals of Botany, 90(2): 185–197. DOI:10.1093/aob/mcf166 |
[] | Zhang Z, Chen J, Jiang X, et al. 2014. The magnolia bioactive constituent 4-O-methylhonokiol protects against high-fat diet-induced obesity and systemic insulin resistance in mice. Oxidative Medicine & Cellular Longevity, 2014: 965954. |
[] | Zhou Y, Bi Y, Yang C, Yang J, et al. 2013. Magnolol induces apoptosis in MCF-7 human breast cancer cells through G2/M phase arrest and caspase-independent pathway. Die Pharmazie, 68(9): 755–762. |