文章信息
- 王有年
- Wang Younian
- 植物杀螨活性物质研究进展
- Research Advances and Application Prospects of Botanical Acaricides
- 林业科学, 2010, 46(6): 118-127.
- Scientia Silvae Sinicae, 2010, 46(6): 118-127.
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文章历史
- 收稿日期:2009-03-08
- 修回日期:2009-12-17
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植物源农药是一类利用含有活性物质的植物的某些部位或提取其有效成分制成的防治有害生物的农药(张一宾,1997)。植物源农药有着悠久的历史,在化学农药面世之前,世界上许多国家已经大量开发和应用植物性农药。我国是使用杀虫植物最早的国家,在《周礼》、《山海经》、《神农本草经》、《齐民要术》、《本草纲目》、《天工开物》等古籍中,均有使用植物性药物防治农业有害生物的记载(徐汉虹,2001)。国外同样有许多关于植物源农药使用的记录。如17世纪欧洲就开始用烟草提取尼古丁来防治作物害虫。在19世纪末日本大量种植除虫菊(Chrysanthemum cineriafolium)防治害虫。在印度次大陆,几个世纪前印楝(Azadirachta indica)就被用来驱避储粮害虫。起初从植物提取和加工农药的方式非常原始,到19世纪后,在近代科学技术和工业发展的基础上,对植物源农药的开发逐渐从经验阶段上升到科学实验阶段,如除虫菊、烟草(Nicotiana)、鱼藤(Derris trifoliata)发展为商品化加工制剂并广泛使用。20世纪40年代以后,有机合成农药蓬勃发展,植物源农药逐渐被人类所忽略;到60年代后期,有机合成农药的种种弊端使天然产物农药重新受到重视,特别是对印楝的研究带动了植物源农药的发展。近年来,国内外科研人员对楝科(Meliaceae)、菊科(Compositae)、毛茛科(Ranunculaceae)、唇形科(Labiatae)等科属植物进行研究,并成功地开发了多种植物源农药。植物杀虫剂的研究给研制开发安全、高效的杀螨活性物质提供了思路,研究植物杀螨活性物质有助于发现具有新型作用靶标的杀螨先导化合物,为进一步开发研制此类农药新品种奠定了基础(韩建勇等,2003)。
1 杀螨活性植物的研究现状 1.1 菊科人们最早发现除虫菊有杀虫作用,并以除虫菊素为模板合成了菊酯类农药。万寿菊(Tateges erecta)是菊科1年生草本植物,其杀虫地位同印楝、川楝(Melia toosendan)、烟草、鱼藤等一样重要(Grainge,1988)。近年来对万寿菊的杀螨活性做了比较深入的研究。万寿菊甲醇提取物对朱砂叶螨有一定的触杀、杀卵、产卵忌避和抑制产卵作用;万寿菊的氯仿提取物对山楂叶螨(Tetranychus viennensis)有较强的生物活性(曹挥等,2003b;孙双艳等,2002)。菊科植物具有显著的光活化毒素,合成的光敏化合物种类最多(Downum,1986)。万寿菊的杀螨活性也受光照的影响。在非光照条件下,万寿菊氯仿提取物的杀螨效果并不明显;而在光照条件下,万寿菊的氯仿、石油醚、甲醇提取物均表现出显著的杀螨活性(曹挥等,2006)。在非光照处理过程中,处理组与对照组试螨的蛋白酶活性差别不明显,而在光照处理的2 h之中,处理组试螨的蛋白酶活性明显小于对照组,表明试螨的蛋白酶活性受到了抑制。非光照条件下,处理组与对照组的谷胱甘肽-S-转移酶活力变化趋势基本一致,二者的比活力值无明显变化;而在光照处理的过程中,处理组试螨的谷胱甘肽-S-转移酶活性受到一定程度的抑制,这表明万寿菊氯仿提取物中可能存在着对谷胱甘肽-S-转移酶有抑制作用的光活化物质。用万寿菊氯仿提取物处理后的试螨无论在光照条件下还是在非光照条件下,处理组酯酶酶带的颜色和大小与对照相比均比较弱;光照条件下,这种变化尤为明显,这些结果都表明万寿菊的氯仿提取物对试螨的酯酶活性有明显的抑制作用(王鸿雷等,2003;曹挥等,2006)。用万寿菊根氯仿提取物处理山楂叶螨后,试螨的谷胱甘肽-S-转移酶和蛋白酶活性显著升高,蛋白质含量明显下降,蛋白酶及蛋白质含量变化程度在光照条件下显著高于黑暗处理。表明万寿菊根氯仿提取物中存在的光活性物质能够促进山楂叶螨离体酶液中蛋白酶的活化,激活试螨体内的蛋白酶而促进蛋白质的降解(师光禄等,2007)。
苍耳子(Xanthium sibiricum)的石油醚提取物对朱砂叶螨(T. cinnabarinus)也有较强的毒力作用(王燕等,2008);艾属植物苦蒿(Artemisia absinthium)和艾蒿(A. argyi)的超微波提取、水提取和蒸汽蒸馏法提取物中,β-侧柏酮占到总含量的87%以上,是毒杀二斑叶螨(T. urticae)的主要活性成分;2种艾属植物蒸汽蒸馏法提取物杀螨活性最高,48 h死亡率分别为83.2%和75.6%(Chiasson et al., 2001)。另外,中亚苦蒿(A. absinthium)对Ixodes ricinu亦有很好的驱避活性(Jaenson,2005)。青蒿(Artemisia annua)10 mg·mL-1丙酮提取物对二斑叶螨和朱砂叶螨在48 h的校正死亡率达90%以上(周宇杰等,2006;朱芬等,2003)。
薇甘菊(Mikania micrantha)乙醇提取物对柑橘全爪螨(Pananychus citri)有显著的产卵驱避作用,持续时间达10天,比一般的杀螨活性物质更能有效控制柑橘全爪螨的田间种群,而且对柑橘全爪螨的天敌安全(岑伊静,2004a)。薇甘菊的甲醇提取物也表现出显著的产卵驱避作用,其驱避活性成分为2,2-亚甲基双(6-叔丁基-4甲基)苯酚和2种甾醇类化合物(岑伊静,2004b;2005)。紫茎泽兰(E. adenophorum)的甲醇提取物对二斑叶螨的卵、成螨以及柑橘全爪螨的成螨也有良好的触杀和拒食活性(刘燕萍等,2004)。
1.2 茄科茄科(Solanaceae)植物烟草的主要活性成分烟碱对各种螨都有较强的毒杀力,90%的烟碱原液对柑橘全爪螨24 h的药效达80%以上,7天药效增至95%(张永毅等,1996),硫酸烟碱对山楂叶螨、麦岩螨(Petrobia latens)和针叶小爪螨(Oligonychus ununguis)都有较强的毒杀力(赵国林等,1997b;高锋等,2005)。该科番茄类植物野生番茄(Lycopersicon hirsutum)含有的2种甲基酮2-十三烷酮和2-十一烷酮对二斑叶螨、朱砂叶螨、截形叶螨(T. truncatus)的成螨、卵都有生物活性,驯化番茄(Lycopersicum esulentum)植株中主要是2-十三烷酮对螨有效(Efstrations et al., 1997)。
1.3 豆科我国19世纪就有用鱼藤的根作为杀虫剂的记载,被公认为理想的杀虫杀螨植物。鱼藤是主要用来防治柑橘红蜘蛛。赵善欢等(1952)指出鱼藤酮和鱼藤素是鱼藤植物杀虫主要成分。豆科的苦参(Sophora flavescens)、苦豆子(S. alopecuroids)也有杀螨活性。苦参含有金雀花碱和苦参碱,能防治各种害虫和朱砂叶螨等(中国土农药志编辑委员会,1959)。苦参乙醇提取物对二斑叶螨、柑橘全爪螨均表现出较好的拒食活性,尤其是对柑橘全爪螨,随处理时间的延长,活性有增强的趋势(刘燕萍等,2004)。袁静等(2004)测试了苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、野靛碱对朱砂叶螨的活性,LC50均大于2.5 mg·mL-1,野靛碱是4种生物碱中杀虫活性最高的。另有报道,苦参素对害螨均能有效控制(王建文等,1998;史应武,1999;马振江等,2002)。姜双林等(1998)研究了苦豆子总生物碱的杀虫杀螨活性,结果表明其对螨类的生物活性大小顺序为麦岩螨>朱砂叶螨>山楂叶螨,LC50分别是509.86,617.38,698.47 mg·L-1,可见苦豆子总生物碱对螨类有明显的触杀作用。王国利等(2001)也证实30%苦豆子乙醇提取液对二斑叶螨具有生物活性。皂角种子的氯仿提取物对朱砂叶螨也有较好的毒杀作用(申照静等,2008).
1.4 楝科楝科植物含有杀虫植物种类颇多,其中印楝、苦楝(Melia azedarach)和川楝是该科主要杀虫植物。
印楝是世界上最负盛名的杀虫植物。印楝种皮的各种溶剂提取物对朱砂叶螨生物活性顺序是:戊烷>氯仿>正丁醇>丙酮>甲醇>水(没有效果),表明随着溶剂极性增加提取物活性降低,即亲脂性的溶剂提取物比亲水性溶剂活性强(Sanguanpong et al., 1992)。印楝对400多种害虫具有生物活性(Lawrence et al., 1996),主要的活性成分是印楝素。印楝素对柑橘锈螨(Phyllocoptruta oleivora)及柑橘全爪螨有生物活性,具有良好的田间防效(Kalaisekar et al., 2003)。
苦楝种核提取物对柑橘全爪螨的成螨、若螨和卵均有很强的生物活性,田间防效好,对其天敌纽氏钝绥螨(Amablyselus newsaml)比较安全(韦成礼等,1995)。苦楝对二斑叶螨成螨、卵均有较强的触杀及驱避活性,对Boophilus microplus的幼螨有极强的毒杀活性,能抑制卵胚胎的发育(Borges et al., 2003);大叶桃花心木(Swietenia macrophylla)也是楝科植物,其花朵的乙醇提取物对香蕉皮氏叶螨(T. piercei)具有良好的忌避作用(刘奎等,2005)。
1.5 瑞香科瑞香科植物大多数具一定的毒性。瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)为瑞香科狼毒属植物,全草有毒。潘为高等(2004)研究瑞香狼毒石油醚索氏提取物对柑橘全爪螨成螨的毒力是氧化乐果原药毒力的11.5倍。瑞香狼毒提取物对山楂叶螨有很好的触杀和内吸活性。在触杀活性测试中,其石油醚提取物和氯仿提取物的杀螨活性最高;在内吸作用中,乙醇、氯仿和石油醚提取物的杀螨活性均较高,杀螨效果显著。在内吸处理中,瑞香狼毒提取物对山楂叶螨的蛋白酶、谷胱苷肽-S-转移酶和酯酶的活性有不同激活作用;而在触杀处理中,对蛋白酶和谷胱苷肽-S-转移酶的影响不明显,而对酯酶的活性有一定抑制作用。在对石油醚提取物的不同溶剂萃取物进行生物活性追踪测定中发现,石油醚萃取物和氯仿萃取物具有较高的生物活性,浓度为0.6 g·L-1,被处理山楂叶螨的24 h校正死亡率分别达到93. 22%和79. 66%(曹挥等,2003a;Shi et al., 2004;Wang et al., 2009;李捷等,2007)。贺春贵(1996)报道瑞香狼毒对朱砂叶螨也有触杀作用。陈梅等(2008)还对瑞香狼毒杀螨活性成分二氧化碳超临界萃取条件进行了优化,探索了一套工业化提取的最佳条件。
河朔荛花(Wikstroemia chatnedophne)是一种瑞香科有毒植物,其4 mg·mL-1石油醚萃取物对山楂叶螨的卵、若螨和成螨均有极强的生物活性,校正死亡率分别达到74.48%,100%,100%(赵莉蔺等,2005)。赵莉蔺等的研究还发现河朔荛花杀螨活性成分不属于生物碱类。用河朔荛花活性成分处理后的雌成螨,试螨体内的生理生化代谢酶类和解毒酶类的活性被激活,而试螨的Ca2+-ATP酶和乙酰胆碱酯酶活性被强烈抑制,因而初步推测河朔荛花活性成分是通过影响山楂叶螨的神经传导和生殖、消化系统而导致雌成螨死亡(曹挥等,2007c)。
1.6 唇形花科唇形花科植物富含多种芳香油,其中不少芳香油成分可用作杀虫杀螨活性物质。唇形科植物筋骨草亚科(Ajugoideae)、黄芩亚科(Scutellarioideae)、绿花亚科(Chloanthoideae)、牡荆亚科(Viticoideae)、荆芥亚科(Nepetoideae)中67种植物的粗提液对朱砂叶螨有杀灭活性,其中筋骨草(Ajuga chamaepitys)和荆芥亚科杀螨潜力最强(Heidi,2005)。该科迷迭香精油对二斑叶螨具有触杀、熏蒸成螨的作用(Choi et al., 2004;Miresmaili et al., 2006),对捕食螨智利小植绥螨(Phytoseiulus persimilis)几乎不敏感,但是它对捕食螨巴氏钝绥螨(Amblyseius barkeri),植绥螨(Typhlodromus athiasae)有毒性。该科的益母草(Leonurus heterophyllus)甲醇抽提物对柑橘全爪螨雌成虫有较好的触杀作用,对其天敌瓢虫安全,对捕食螨亦有一定的选择作用(徐心植等,1994);紫背金盘(Ajuga nipponensis)、牛至(Origanum vulgare)、百里香(Thymus vulgaris)对二斑叶螨、鸡刺皮螨(Dermanyssus gallinae)、大蜂螨(Varroa destructor)也有一定的生物活性。
1.7 藜科藜科的土荆芥(Chenopodium ambrosioides)全草有毒,有杀虫或驱虫作用(黄雪峰等,2002)。其精油含有α-terpene、p-cymene和limonene,对二斑叶螨和苹果全爪螨(P. ulmi)的成螨有极强的生物活性,其商业产品0.5%UDA-245杀螨效果优于0.7%的印楝精油和0.006%的阿维菌素(Chiasson et al., 2004)。
地肤(Kochia scoparia)是一年生藜科草本植物(戴岳等,1994;朱学文,1996)。地肤氯仿粗提取物对二斑叶螨、朱砂叶螨和山楂叶螨具有显著的毒杀活性(侯辉等,2004a;2004b;Shi et al., 2006)。地肤不同部位提取物对螨及卵的生物活性有差异,表现为籽>和叶>根;地肤子氯仿萃取物及其活性流分对山楂叶螨具有胃毒、抑制生长发育、抑制繁殖等作用(曹挥等,2007a;2007b)。地肤提取物处理山楂叶螨后,螨体内谷胱甘肽-S-转移酶、羧酸酯酶等解毒酶活性被激活,而单胺氧化酶、Ca2+-ATP酶的活力受到一定的抑制。谷胱甘肽-S-转移酶、羧酸酯酶都是螨体内重要的代谢解毒酶系,它们参与了内源或异源有毒物质的代谢解毒,特别是对杀虫剂的解毒,这表明地肤提取物中存在对山楂叶螨有毒的物质,从而激活了螨体的解毒作用,来维持螨的正常的生理功能,而Ca2+-ATP酶的被抑制可能会破坏细胞内外Ca2+的平衡,影响神经细胞的兴奋和传导,引起神经传递的阻断;单胺氧化酶被抑制,使螨体内神经胺积累,也会造成神经传递的阻断,从而导致螨体的死亡(曹挥,2007a)。地肤子提取物处理山楂叶螨后,也能导致试螨体内蛋白含量、蛋白酶活性有所升高,谷胱甘肽-S-转移酶活性被激活,这表明地肤子提取物也对山楂叶螨有毒害作用,从而引起了螨体的解毒作用;而且试螨的乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶的活力也受到一定程度的抑制(曹挥等,2008)。
1.8 伞形花科伞形花科植物孜然芹(Cuminum cyminum)、茴芹(Pimpinella anisum)对朱砂叶螨有熏蒸作用,生物活性达99%的死亡率(Tunç et al., 1998)。Lee(2004;2005)报道茴芹和茴香(Foeniculum vulgare)种子所含的p-anisaldehyde和(+)-fenchone对粉尘螨(Dermatophagoides farinae)、屋尘螨(D. pteronyssinus)以及腐食酪螨(Tyrophagus putrescentiae)均有良好的活性。毒参(Conium maculatum)对柑橘全爪螨有拒食作用;东当归(Angelica acutiloba)和日本川芎(Cnidium officinale)对尘螨和腐食酪螨有较高的生物活性(Kwon et al., 2002;2003;Tsukamoto et al., 2006)。
1.9 蒺藜科蒺藜科多年生草本植物骆驼蓬(Peganum harmada)全草有毒,赵国林等(1997a)报道其地上部分乙醇提取物对山楂叶螨、果苔螨(Bryobia rabrioculas)、麦岩螨、截形叶螨具有显著的触杀作用。骆驼蓬提取中脂溶性碱对朱砂叶螨的雌成虫生物活性明显(赵晓萌等,2005)。
1.10 姜科姜科植物姜黄(Curcuma longa)根茎中含有的正己烷和苯的提取物对朱砂叶螨有极强的触杀活性,其活性成分主要是姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素,后者的活性最高;姜黄素分子中的二酮结构可能是抑制作用的必需结构(张永强等,2004;2007)。
1.11 木犀科木犀科植物大叶丁香(Eugenia caryophyllata)丙酮提取物对香蕉皮氏叶螨具有良好的毒杀作用,13.33 mg·mL-1对皮氏叶螨的48 h和72 h校正死亡率均达到80%以上(陈青等,2004)。阮娜等(2005)采用点滴法测试大叶丁香花蕾提取物对兔痒螨(Psoroptes communis cuniculi)的活性,其石油醚提取物12 min使全部试虫麻痹,20 min可杀死全部供试螨虫。Kim等(2003a)报道50%丁香醇提取物平均16 min可杀死全部供试兔痒螨,效果优于杀螨药物苦参、苦楝等。从丁香芽精油中分离得到的丁香醇和它的同类化合物(乙酰丁香酯、异丁子香酚和甲基丁香酚)对尘螨和腐食酪螨(Tyrophagus putrescentiae)亦具有触杀和熏蒸作用(Kim et al., 2003a;2003b)。
1.12 桃金娘科该科植物白千层(Melaleuca leucadendra)含有1,8-桉树脑,苞鳞白千层(Melaleuca bracteata)含有大量的苯丙素类物质。后者叶精油对欧洲屋尘螨具有很强的杀螨活性(Yatagaia et al., 1998)。
1.13 其他杀螨植物近年来,国内外研究者还筛选出了另外一些具有不同程度杀螨活性的植物。有些的乔木类植物具有杀螨、驱避等活性。如核桃(Juglans regia),银杏(Ginkgo biloba),樟科植物陈年锡兰肉桂(Caylon cinnamon),大戟科植物三宝木(Trigonostemon reidioide)等。研究分别发现核桃叶和核桃青皮的提取物对山楂叶螨和朱砂叶螨具有很好的毒杀作用(王有年等,2007;王海香等,2008;Wang et al., 2007;Wang et al., 2009)。用核桃叶石油醚提取物处理朱砂叶螨后,螨体内谷胱甘肽转移酶活性被激活,而乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶的活力都受到一定程度的抑制,这可能会引起神经传递的阻断,导致螨体的死亡(王有年等,2007)。核桃青皮石油醚提取物的杀螨活性较高,浓度为1 mg ·mL-1时,对朱砂叶螨雌成螨24 h后的死亡率可达到83.44%,明显高于氯仿、甲醇提取物(P < 0.05)。活性成分对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶(AchE)与Na+,K +-ATPase活性有明显的影响,当提取物浓度为10 mg ·mL-1,试螨的AchE与Na+,K+-ATPase的活性低于对照,处理8 h后分别为对照的0.47与0.62倍(王海香等,2008)。核桃青皮里的活性成分是棕榈酸甲脂,而且试验也证明化学合成的棕榈酸甲脂对朱砂叶螨的毒杀效果很好(Wang et al., 2009)。
90%银杏外种皮乙醇粗提物对柑橘全爪螨有高效的杀灭作用,它的LC50为48.3 mg·L-1,LC90为94.1 mg·L-1,对其进行分离纯化,在石油醚部分得到高效杀螨活性物质,初步认为是有机酚酸类物质(罗彭等,2006)。柏科日本罗汉柏(Thujopsis dolabrata)中的香芹酚(carvacrol)和β-侧醇(β-thujaplicine)也对二斑叶螨具有毒杀作用(Akendengue et al., 2003)。地中海柏木(Cupressus sempervirens)和丝柏(Allium sativum)对朱砂叶螨的驱避效果可达到75%以上(Mansour et al., 2004)。
百合科植物阿福花(Asphedolus aestivus)根提取物对朱砂叶螨有毒杀作用,其根提取物可以抑制朱砂叶螨产卵以及卵的孵化(Genosoylu,2007)。无患子科植物无患子(Sapindus saponaria)茎皮的乙醇提取物对血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus)幼虫具有和好的杀灭活性,有可能是一种植物源杀螨活性物质和杀蜱剂(Fernandes et al., 2007)。
常绿乔木植物中不少树种对螨及卵具有生物活性。樟科植物陈年锡兰肉桂的新鲜叶片阴干后,采用索氏提取法丙酮液提取,其提取物对皮氏叶螨具有较强的毒杀作用(陈青等,2005)。大戟科植物三宝木的根正丁醇提取物经过硅胶柱得到4个瑞香烷类成分,对欧洲户尘螨(Dermatopha goides pteronyssinus)的LC50分别为2.53,0.78,5.59,0.92 μg·cm-2,比苯甲酸苄酯(LC50为6.6 μg·cm-2)更有灭螨潜力。而来自16种红树植物的甲醇提取物对柑橘全爪螨雌成螨的触杀试验显示,10 g·L-1浓度的海芒果(Cerbera manghas)、苦槛蓝(Myoporum bontioides)、苦榔树(Clerodendrum inerme)和黄槿(Hibiscus tiliaceus)的触杀活性较高(邓业成等,2007)。蓝雪科植物白花丹(Plumbago zeylanica)的提取物对柑橘全爪螨也有良好的杀螨、杀卵和产卵抑制活性,其甲醇提取物的萃取物及纯化流分触杀成螨的LC50分别为0.71,0.67 mg·mL-1,杀螨卵LC50为0.66 mg·mL-1(韩建勇等,2004)。橄榄科植物Protium heptaphyllum的果实和叶的精油通过气质联机分析,被确定果实精油的主要成分是α-萜品烯,叶片含有α-萜品烯和倍半萜烯(trans-9-epicaryophyllene)、长叶烷酮、α-石竹烯。果实精油中的物质比叶片中的对二斑叶螨毒杀和拒食作用效果显著(Pontes et al., 2007)。漆树科西西里漆树(Rhus coriaria)对朱砂叶螨具有驱避作用,48 h内驱避率可达到75%以上(Mansour et al., 2004)。
一些灌木藤本植物也具有杀螨活性且容易种植开发。胡椒科植物荜茇(Piper longum)所含的piperoctadecalidine处理二斑叶螨48 h后,LD50为246 mg·L-1(Park et al., 2002)。芸香科的川黄柏(Phyllodendron chinese)丙酮和甲醇冷浸法提取物对朱砂叶螨毒杀效果较好(周刚,2007)。番茄枝科的紫玉盘属植物Uvaria versicolor和U. klaineane的甲醇和乙烷提取物处理屋尘螨24 h,抑制中浓度分别为0.095 mg·m-2和0.12 mg·m-2(Akendengue et al., 2003)。从肯尼亚紫金牛科(Myrsinaceae)植物中分离到的苯醌(benzoquinone)也具有杀螨活性(Midiwo et al., 2002)。
最容易积累生物量的杀螨活性植物是草本类植物。天南星科植物菖蒲(Acorus calamus)全株有毒,其精油在10 mL·L-1含量下处理二斑叶螨24 h,其死亡率达到93%(Tewary et al., 2005)。张美淑等(2006)报道曼陀罗和萝藦甲醇和乙醇的提取物对截形叶螨试验种群有干扰作用,驱避效果达65%以上。通过对喜马拉雅山脉5种中药植物进行筛选发现,禾本科爪哇香茅(Cymbopogon wintorianus)精油对二斑叶螨具熏蒸活性,9.3×10-3 μL·mL-1含量处理螨,可使其死亡81%,香菜科香菜(Coriandrum sativum)精油对二斑叶螨也具有熏蒸作用(Choi et al., 2004)。
另外还发现牵牛子(Pharbitis purpurea)、马钱子(Strychnos mux-vomica),苍耳子(Xanthium sibivicum)、百部(Stemona japnica)、红藤(Sargento-doxa cuneata)、贯众(Osmuncla japonica)、白鲜皮(Dictamnus dasycarpus)等几种中药的提取物也能有效的杀灭朱砂叶螨(王燕等,2008;2009)。申照静等(2008)研究了石榴(Punica granatum)皮、牵牛种子和皂角(Cassianomame)种子的提取物对朱砂叶螨的作用,发现牵牛种子的氯仿与石油醚提取物、石榴皮的石油醚提取物和皂角种子的氯仿提取物杀螨效果较好。
2 植物源杀螨农药的开发利用目前,植物源杀螨活性物质的开发利用分两方面:一是直接利用,即对植物中的活性物质进行粗提取后,直接加工成可利用的制剂。这种利用方式的主要优点是能够发挥粗提物中各种成分的协同作用,而且投资少,开发周期短;二是间接利用,即研究活性物质的结构、作用机制、结构与活性间的关系,进行人工模拟合成筛选,从中开发出新型植物源农药制剂。间接利用是当前国内外植物源农药研究开发的热点,也是植物源农药研究发展的方向(梁媛等,2006)。
一些植物的杀螨活性物质结构和作用机制已经明确,并研制成了商品性的农药制剂。商品化的植物杀虫剂在我国共有15个植物源农药单剂登记,有烟碱、印楝素、鱼藤酮、茴蒿素、血根碱、丁子香酚、苦参碱、苦皮藤素、藜芦碱、蛇床子素、松碱、松脂酸钠、氧化苦参碱、闹羊花素-Ⅲ、楝素(刘长令,2002;梁媛等,2006)。生产中植物源农药可以制成乳剂、粉剂单独使用,也可以植物源农药之间混配及植物源农药与化学农药、生物化学农药混配使用。1)烟碱 对害螨有胃毒、触杀及熏蒸作用,能使害螨迅速麻痹死亡,且有杀卵作用,其盐类如硫酚盐比较稳定,持效期较长。它的作用机制是干扰离子通道,与害螨神经系统的乙酰胆碱受体结合,导致害螨神经兴奋死亡,主要用于防治果树、蔬菜、棉花(Gossypium)、茶树(Camellia)上的害螨。应用于生产的烟碱农药制剂有90%烟碱原液、稳定杀螨活性物质0.6%和40%硫酸烟碱、5%烟碱·楝素水剂(张永毅等,1996;赵国林等,1997b;陈琳等,1998)。2)印楝素(川楝素) 从印楝树种子中提取。广谱性的杀虫剂,兼具拒食剂和昆虫生长调节剂等。是当今世界农药市场上极具竞争力的一个品种。中国科学院昆明植物研究所研制了0.5%的印楝乳油;1993年,张兴等用工厂化生产原粉配制成0.5%的川楝素乳油;川楝素加少量化学试剂配成川楝素乳油,商品名叫“蔬果净”,主要用于防治蔬菜上的害虫害螨(李永夫等,2003)。3)鱼藤酮 来自鱼藤的茎和根,是线粒体呼吸抑制剂。中等毒性,具有触杀作用,剂型有4%鱼藤粉剂,河北天顺生物工程有限公司和鱼藤酮广州市金农达化工有限公司分别生产的50%和25%鱼藤酮乳油(胡长效等,2008),主要用于防治水稻(Oryza sativa)、蔬菜、果树上的害虫害螨。4)茴蒿素 主要成分是山道年和百部碱。具有触杀和胃毒作用,有速效性和持效性。害螨触药或食药后麻痹神经,使气门窒息,属低毒、广谱杀虫剂。0.65%茴蒿杀虫水剂可防治蔬菜、果树、棉花、小麦及园林等植物上的害螨(刘俊华,2002)。5)苦参碱 属植物神经毒剂,害螨接触药剂后可使神经麻痹,蛋白质凝固堵塞气门窒息而死。对害螨的作用主要是触杀和胃毒,广谱性杀虫剂(刘俊华,2002)。苦参碱产品登记在植物农药中属于热点产品。市场中上0.3%苦参碱素用于防治苹果(Malus pumila)叶螨;1.2%苦烟乳油(主要有效成分:苦参碱、烟碱)用于防治板栗(Castanea mollissima)红蜘蛛(Oligonychus ununguis);沈阳化工研究院研究的3%苦参碱水剂由苦参干根经甲醇提取所得苦参总碱配制而成,其中苦参碱含量为3%(马振江等,2002)。6)苦皮藤素 提取自苦皮藤(Celastrus angulatus)的根皮、种子。具有麻痹和毒杀作用,苦皮藤素Ⅳ直接作用于神经-肌肉接头的突触导致死亡;苦皮藤素Ⅴ能够破坏中肠细胞质膜及其内膜系统造成胃毒作用。1999年,吴文君研制、中试成功苦皮藤素乳油(含0.2%的苦皮藤素Ⅴ和20%根皮提取物)(李永夫等,2003)。7)除虫菊素 来自除虫菊的花,毒性较低、击倒能力强,它对光不稳定,残效期短,以其为先导化合物开发了一系列拟除虫菊酯杀螨活性物质。剂型有除虫菊粉和3%除虫菊乳油。另外,山东金茂生物工程有限公司生产1.8%除虫菊素加苦参乳化剂商品(赵敦田等,2005)。
但是当前植物源杀螨活性物质生产应用中也存在一些亟待解决的问题。1)活性成分含量和活性强度不稳定,给生产带来困难。植物中次生代谢物质含量与植物的生长发育阶段、组织器官、地域分布、生长环境等因素有关(何军等,2006),直接造成植物来源的选择问题。另外,植物中活性成分易受外界环境条件(如温度、湿度、光照、土壤pH值、土壤营养成分和周围生物群落等)的影响,因此稳定性不高。2)植物活性成分复杂,不利于明确各成分间的作用关系。植物中杀螨活性成分往往是一类或几类次生代谢物质,其含量差异很大,这使分离、纯化单体活性物质工作变得困难;同时不清楚各成分之间的关系是协同、增效还是拮抗,给毒理学的研究也造成了许多困难。3)植物来源有限,商品化生产受到限制。近年来,国内出现了一股植物源杀螨活性物质直接加工利用的热潮,大多数企业所用的植物多为野生植物。野生的植物往往在质量保证和数量上都难以满足企业用作生产原料的要求。用于直接加工的栽培的植物一般也数量有限。4)剂型有限,无法推动无害化生产。植物源农药在作用方式和作用机制上,与有机合成农药有一定差异,特别是植物源杀螨活性物质对害螨作用的靶标有所不同。这种作用特点要求在田间应用剂型上有所选择。然而,现在使用得最多、最成功的是制成乳油,但乳油的加工需要大量的有机溶剂,易污染环境。生产无公害的复配剂型成为植物源杀螨活性物质研究的重点。5)防效缓慢和控制虫害范围较窄,普及应用较难。植物源杀螨活性物质不具备化学农药用量少、见效快的优点,尤其是遇到突发性和毁灭性害螨危害时,植物源杀螨活性物质速效性差,不能作为应急药剂。
3 植物源杀螨活性物质研究存在的问题及需要加强的研究方向目前在植物源杀螨活性物质的研究上,尤其在针对植食性害螨的植物源杀螨活性物质研究方面,我们国内的研究热度远远高于国外。除了上述植物源杀螨活性物质生产应用中存在的问题外,在植物源杀螨活性物质的研究也存在着一些需要注意的问题。首先是对植物中的杀螨活性成分研究不够。目前对绝大部分杀螨活性植物的研究都是集中在对杀螨植物的筛选和植物粗提物杀螨活性的鉴定,而对杀满活性成分的分离和分子结构鉴定研究的较少。有些植物的杀满活性成分虽然已经被分离出来,但是纯化的杀螨活性成分单体对害螨的作用并没有粗提物的效果好,并且这些杀螨活性物质大都难以溶解,配制成生产上可以利用的农药比较困难。因而要加强对植物中杀螨活性成分的分离鉴定,并开展对这些杀螨活性物质的分子结构进行研究改造,增强其杀螨活性,增加其配置农药的可操作性。第二、对植物源杀螨活性物质的杀螨机制研究不够。目前对植物源杀螨活性物质杀螨机制进行研究的文献报道很少,而且都是一些比较表面的研究。主要集中在植物源杀螨活性物质对害螨一些酶的活性的影响,如对害螨的蛋白酶、脂酶、乙酰胆碱脂酶、ATPase酶、谷胱甘肽酶等活性的影响,而对真正的杀螨活性物质杀螨的毒性机制缺乏研究。还不清楚植物源杀螨活性物质的作用靶标以及作用于害螨的方式。因而在开展植物源杀螨活性物质时要加强对杀螨机制的研究。杀螨活性物质毒理机制研究应该从3方面进行:一是研究植物源杀螨活性物质对害螨生理及细胞结构的影响;二是用分子生物学方法研究植物源杀螨活性物质对害螨的蛋白质活性和基因表达的影响,寻找真正的靶标蛋白;三是加强对害螨本身的研究,如对其身体结构、细胞结构、生理特点等进行研究,这样可以有目的的、高效的研究开发植物源杀螨活性物质。四是深入研究剂型和药剂分散体系。目前发现的一些植物源杀螨活性物质大都难溶解,因而要研究合适的剂型和药剂分散体系,使配制的植物源杀螨活性物质药效稳定、持久,生产上可操作性强。
植物是生物活性物质的天然资源库,虽然发现农药先导物的新活性物质和实现高效植物杀螨活性物质的开发,需要相当长的时间和较大的资金的投入,但是毋庸置疑,植物源杀螨活性物质研究将会提供许多种不同的杀螨活性物质供人们深入地研究改造,将为创制新型杀螨活性物质提供很多的途径。另外,我国可利用的具有农药活性成分的植物资源十分丰富,加之全国各地荒山、荒地均可种植,生产植物源农药投资小,见效快,原材料广泛,因而对一些具有杀螨活性的植物可以直接开发利用,为我国的有机农业服务。因此,开发利用植物资源用于害螨防治的前景将十分广阔。
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