兴安落叶松鞘蛾(Coleophora obducta)(李后魂，2003)是落叶松(Larix)叶部的潜叶害虫，对寄主有严格选择性，专一性很强，除了落叶松属之外的针叶树，都不能使其生活或完成生活史(舒朝然等，2003)。

寄主植物挥发物在“昆虫-寄主”识别过程中扮演了重要角色(Light et al., 2005)。使用无公害药剂防治害虫作为一种绿色的、环境友好的防治手段，在实际应用中也越来越受到重视。因此，本研究旨在初步筛选出的对鞘蛾雌成虫有生物活性的植物挥发性物质的基础上，将活性挥发物及无公害药剂喷施到健康落叶松苗木上，观察其对鞘蛾的嗅觉趋向、产卵的影响。

1 材料与方法 1.1 供试昆虫及植物

兴安落叶松鞘蛾采自黑龙江省哈尔滨市宾县兴安落叶松(Larix gmelinii)林内，4、5月份将携带鞘蛾的落叶松枝条采回实验室，室温条件下置于60目养虫网内，网内放置若干健康的兴安落叶松盆栽苗为幼虫提供足够的食物，待成虫羽化备用。

兴安落叶松4年生盆栽苗，幼苗管理严格，避免受到人为机械损伤及病虫危害，选择健康、长势相似的落叶松苗用于嗅觉和产卵试验。

1.2 对鞘蛾雌成虫有活性的挥发物及药剂

利用已经筛选出的对落叶松鞘蛾雌虫有活性的挥发物成分及浓度，即S-α-蒎烯0.04、0.004 mol·L^-1，S-β-蒎烯0.000 4 mol·L^-1，水芹烯0.04、0.000 4 mol·L^-1，3-蒈烯0.04、0.000 4 mol·L^-1，月桂烯0.004、0.8 mol·L^-1和叶醇0.04 mol·L^-1。

共测试7种无公害药剂(表 1)。

1.3 鞘蛾雌成虫对喷施挥发物及药剂的苗木的嗅觉反应

测试兴安落叶松鞘蛾雌成虫对已筛选出的活性挥发物的嗅觉反应，采用改进的自制玻璃“Y”型管，管的2侧臂等长，10 cm，夹角75°，内径2.5 cm；适应臂长20 cm，内径3 cm；三角形陷阱底部直径8 cm；有机玻璃箱长33 cm，宽33 cm，高60 cm。“Y”型管2侧臂分别用硅胶管依次连接三角形陷阱、有机玻璃箱、气体采样仪[QC-1(B)型，北京市劳动保护科学研究所]及活性炭空气过滤装置。

将苗木置于玻璃容器后，每苗喷施10 mL筛选出的活性气味源物质后让其自然挥发5 min，再从引虫口引入鞘蛾雌虫。对照苗喷等量石蜡油。其中，有气味源的一侧为处理壁，另一侧为对照壁，调节气体采样仪的气体流量为400 mL·min^-1，观察鞘蛾雌虫的趋向选择行为。每组测试鞘蛾雌虫10头，重复5组；每测试完1组，调换2侧壁方向。更换不同物质气味源时用酒精擦拭Y型管及有机玻璃容器，自然晾干以消除残留气味，并更换新的盆栽苗，避免不同挥发物成分造成交叉影响。

测定鞘蛾雌成虫对7种无公害药剂的嗅觉反应时，三角形陷阱中的气味源为喷施无公害药剂的10 cm长落叶松枝条，喷药量以枝条潮湿但不滴水为度，对照枝条上喷等量清水。每药剂处理测试3头鞘蛾雌成虫，重复10次。

1.4 鞘蛾成虫对喷施不同挥发物及药剂的苗木的产卵选择

分别将筛选出的诱引物和驱避物喷施于落叶松盆栽苗的3个邻近样枝上，每样枝喷施200 μL；测定鞘蛾雌成虫在喷施7种无公害药剂苗木上的产卵反应时，用中等浓度的药剂喷施落叶松苗样枝。将3个样枝以60目养虫网套在一起，使鞘蛾活动空间较大，产卵枝条相对较小，方便观察统计，对照苗喷等量石蜡油。然后将新羽化鞘蛾成虫雌、雄各15头放入网内，每盆相隔1 m，试验设置3个重复，待养虫网内鞘蛾全部自然死亡后，50倍放大镜下逐个检查针叶，计算卵量。

1.5 数据统计及分析

以χ²检验分析挥发物及无公害药剂对鞘蛾成虫诱引、驱避的差异显著性；以单因素方差分析，检验鞘蛾成虫产卵与对照之间的差异显著性；以Tukey-HSD多重比较分析鞘蛾在喷施不同挥发物以及不同无公害药剂的落叶松苗上的产卵量之间的差异。生测反应的驱避率、诱引率及反应率公式(严善春等，2003)如下：

驱避率=(对照臂内总虫数/测试总虫数)×100%，诱引率=(处理臂内总虫数/测试总虫数)×100%，反应率=(对照臂内总虫数+处理臂内总虫数)/测试总虫数×100%。

2 结果与分析 2.1 鞘蛾雌成虫对喷施挥发物和7种药剂的苗木的嗅觉反应

鞘蛾雌虫对喷施挥发物的落叶松苗具有一定的偏好趋向(图 1)。其中，S-α-蒎烯0.004 mol·L^-1、S-β-蒎烯0.000 4 mol·L^-1和3-蒈烯0.04 mol·L^-1的诱引作用最强，对喷施这3种挥发物成分的落叶松苗做出选择的虫数分别占反应总虫数的56.00%、52.00%和54.00%，χ²检验表明对照臂虫数和处理臂虫数之间差异显著(P < 0.05)。但喷施S-α-蒎烯0.04 mol·L^-1和月桂烯0.8 mol·L^-1后驱避作用最强，反应总虫数为30.23%和23.26%，χ²检验表明对照臂虫数和处理臂虫数之间差异极显著(P < 0.01)。

鞘蛾雌成虫对7种无公害药剂3种稀释倍数的行为反应总体上不如对挥发物的反应敏感，仅对吡虫啉和甲胺基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂在一定稀释倍数下表现出明显的驱避反应(图 2)，其中，吡虫啉3 000倍液对鞘蛾雌成虫的驱避率为诱引率的3.43倍，χ²检验表明诱引虫数和驱避虫数之间差异极显著(P < 0.01)；甲胺基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂2 000倍液也表现出对鞘蛾的驱避作用，驱避率为诱引率的2.20倍，χ²检验表明差异达到显著水平(P < 0.05)；其余几种无公害药剂均对鞘蛾无明显定向作用。

2.2 鞘蛾成虫在喷施不同挥发物和7种药剂的苗木上的产卵选择

喷施不同浓度活性挥发物后，鞘蛾在落叶松苗上的产卵量明显降低(图 3)，除了3-蒈烯0.000 4 mol·L^-1与对照平均每雌产卵量15.79枚相比差异显著(P < 0.05)外，其余与对照相比均达到极显著水平(P < 0.01)。其中，鞘蛾在喷施水芹烯0.000 4 mol·L^-1和月桂烯0.8 mol·L^-1的落叶松苗上的平均每雌产卵量只有5.63枚和5.21枚，月桂烯0.004 mol·L^-1每雌产卵量为6.82枚，3-蒈烯0.04 mol·L^-1每雌产卵量为7.60枚。此外，水芹烯0.04 mol·L^-1和3-蒈烯0.000 4 mol·L^-1及其他几种挥发物各浓度之间对鞘蛾产卵的影响程度相似，它们之间差异不显著(P>0.05)。

鞘蛾在喷施7种无公害药剂的落叶松枝条上的总产卵量比在喷施挥发物的落叶松枝条上的产卵量少(图 4)。鞘蛾在喷施高效氯氰菊酯、阿维菌素、吡虫啉、啶虫脒、高渗苯氧威、苦参碱和甲胺基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂这7种无公害药剂的落叶松苗上的平均每雌产卵量分别为6.73、3.13、3.33、6.27、4.67、4.00和6.00枚，与对照平均每雌产卵量16.73枚相比，差异均达到极显著水平(P < 0.01)。其中，阿维菌素和吡虫啉在这7种药剂中对鞘蛾产卵的抑制作用最强，但二者影响程度相似(P>0.05)，其抑制产卵作用均明显强于高效氯氰菊酯(P < 0.05)；其余几种药剂之间对鞘蛾产卵量的影响程度相似(P>0.05)。

3 讨论

寄主植物挥发物因浓度和昆虫种类不同，可能产生诱引或拒斥作用(Altuzar et al., 2007)。本研究可以看出，尽管离体生测中3-蒈烯在浓度为0.000 4，0.04 mol·L^-1时对鞘蛾雌虫诱引作用强，月桂烯在浓度为0.004、0.8 mol·L^-1时对鞘蛾雌虫驱避作用强，但当喷施于寄主植物上时，二者分别只在高浓度，即3-蒈烯0.04 mol·L^-1对雌虫有诱引作用和月桂烯0.8 mol·L^-1对雌虫有驱避作用；这表明，鞘蛾雌虫对寄主植物挥发物的趋向行为反应存在一定的有效浓度，只有在活性阈值下才能激发鞘蛾的趋向行为反应。此外，盆栽落叶松苗本身释放挥发物，较高浓度的外源挥发物成分的加入可能使鞘蛾对挥发物的活性成分反应更加明显，因此利用外源挥发物干扰鞘蛾的定向行为，可能在鞘蛾防治中将是一种比较有效的手段。

前人研究表明，当幼虫分散能力弱，雌蛾选择合适的寄主植物作为产卵场所时对寄主植物挥发物有一定的偏好(Naves et al., 2006；Habita et al., 2007；Uechi et al., 2007)。本研究结果表明，喷施S-α-蒎烯0.004 mol·L^-1、S-β-蒎烯0.000 4 mol·L^-1和3-蒈烯0.04 mol·L^-1的苗木对雌成虫的诱引作用强，但雌虫在喷施上述挥发物的苗木上的产卵量都显著低于对照，推测鞘蛾寄主识别、取食、产卵所利用的挥发物成分可能不同。并且，有相关报道表明，马尾松毛虫低龄幼虫趋向于在低β-蒎烯含量的松针上取食，而成虫趋向于在高β-蒎烯含量的松针上产卵(陈雄，1991)，即昆虫在不同发育阶段对挥发物所利用的成分可能不同。

本试验中，无论是哪种挥发物，当其单个喷施到落叶松苗上，对鞘蛾产卵均没有诱引活性、只有抑制活性，均显著影响鞘蛾产卵量。但本试验只测试了喷施挥发物对鞘蛾产卵量的影响，未测试将落叶松苗暴露于挥发物气味中对该虫产卵量的影响，今后尚需要进一步观察验证。Ibrahim等(2005)报道，将柠檬烯的甲醇溶液喷施于甘蓝(Brassica oleracea)变种植株上后小菜蛾(Plutella xylostella)在其上的产卵量与对照无显著差异，而将甘蓝变种暴露于柠檬烯中后小菜蛾在变种上的产卵量显著多于对照，即挥发物的处理方式不同对昆虫的影响不同。

研究表明，鞘蛾对7种无公害药剂的总体行为反应不如对挥发物的反应敏感，且在喷施药剂的落叶松枝条上的产卵量也显著减少。这可能是由于药剂干扰了寄主植物落叶松挥发物所致，并因喷施到落叶松苗上的药量较多(枝条潮湿但不滴水)，当试虫落到寄主植物上后虫体便很容易地沾染上药剂，进而对试虫起到毒杀作用，因而产卵量也就受到很大程度的影响。

此外，作者在统计产卵量时发现，无论是喷施挥发物还是药剂，均观察到有少部分鞘蛾死亡后其腹部末端仍然沾有3~6枚不等卵粒的现象，这可能是由于在受限的寄主选择条件下鞘蛾产生生殖压抑，该现象与Landolt等(1990)的报道即生殖上成熟的雌蛾在没有适宜寄主植物时可能会导致生殖压抑是否相似也有待进一步试验验证。