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纺锤体蛋白INMAP高表达裸鼠荷瘤模型构建

纺锤体是由大量微管及其结合蛋白 纵向排列组成的中部宽阔、两极缩小的 细胞器。其中染色体和纺锤体微管之间 的相互作用受到严密调节,使染色体能 够平均分配到子细胞中。细胞分裂中染 色体的正确分离是遗传信息稳定性的保 证,因此纺锤体在此过程中起到举足轻 重的作用。

无论是结构性还是功能性的纺锤体 蛋白,其异常表达都可能造成纺锤体组 装紊乱,进一步影响细胞生长命运或增 殖 属 性。INMAP(interphase nucleus & mitotic apparatus protein)是北京师 范大学梁前进课题组发现的一种纺锤体 蛋白。该课题组已经从分子来源、基因 表达和生理功能等方面证明了该蛋白是 一种纺锤体组装调控蛋白,并通过保障 着丝粒完整性等作用维持染色体的稳定 和细胞周期的正常运行。

INMAP蛋白高表达导致肿瘤细胞在 分裂过程中出现多中心体、多核、多极纺 锤体,甚至纺锤体微管无序化等现象,最 终引起细胞异常分裂,影响肿瘤发生的 细胞的生长。基因表达异常与肿瘤发生 的关系一直是研究热点,也是攻克癌症 的弹着点;构建裸鼠荷瘤模型来研究肿 瘤的特性,从基因表达和相互关系上探 讨基因在细胞增殖中的重要性是很有效 的途径。因此,本课题组利用稳定高表 达INMAP的HeLa细胞株构建了裸鼠荷 瘤模型,检验INMAP高表达对肿瘤细胞 致瘤性的影响。皮下接种细胞使裸鼠荷 瘤,瘤组织的石蜡切片经苏木素-伊红 (H&E)染色后显示:细胞排列疏松,核固 缩而深染、破碎和溶解现象多;可见大片 无细胞结构的坏死区域;核分裂相出现 的几率很少。结果表明:在裸鼠体内,IN- MAP过表达抑制肿瘤细胞生长,促进细 胞凋亡。进一步研究发现,高水平的IN- MAP通过p53/p21相关通路影响HeLa 细胞生长,促使细胞凋亡。可见INMAP 蛋白通过协调纺锤体形成、保障着丝粒 蛋白完整性等途径在细胞有丝分裂中发 挥重要作用,相关研究有助于细胞恶性 增殖等机理的探究。

《科技导报》2015年第1期17~21页 发表了朱艳等的“利用多克隆抗体检测 纺锤体蛋白基因INMAP在肝癌细胞中的 表达”研究论文,该文通过诱导原核表 达,获得可溶性的His-INMAP融合蛋 白,经镍亲和柱分离纯化、免疫小鼠,制 备了特异性较高的INMAP多克隆抗体。 用新制备抗体检验出INMAP在几种肝癌 细胞系中具有异常表达和多态性。

本期封面图片表现了INMAP高表达 裸鼠荷瘤模型的构建,由朱艳提供,何梦 洁协助图片编排。本期封面由王静毅设 计。

(责任编辑王媛媛)