铜、锌是人体必需的微量元素，为细胞或组织代谢所必需。如果摄取不足或排泄过多，会导致生理功能或形态结构的异常改变，使体内失去稳态，从而导致各种疾病。铜广泛分布于生物组织中，是机体内蛋白质和酶的重要组成部分，许多重要的酶需要微量铜的参与和活化。铜缺乏会对心血管系统，脂质代谢等造成不良影响。绝对或相对铜缺乏可使血清TC、TG水平升高，引起高胆固醇血症^[1]。有流行病学实验显示，扩张型心肌病患者体内铜代谢失衡，显著高于正常人群^[2-3]。另有研究表明，铜缺乏与糖尿病发生有关^[4]。锌分布于几乎所有的组织和器官，含锌最高的组织是眼球的视觉部分和前列腺。锌缺乏相较于锌中毒来说更加普遍，锌缺乏会对生长发育，神经元发育，免疫系统等造成严重影响^[5-8]。目前，我国关于正常人群血浆中铜、锌元素浓度的研究相对较少，且多为特殊人群^[9-10]。而参考值的建立，对于评估人群健康状况和提高居民生活水平有着重要意义。本研究于2009—2010年对河南省三市一般人群血浆中铜、锌及其流行病学分布进行调查分析，得到了当地一般人群血浆中铜、锌的浓度水平，为一般人群中铜和锌参考值区间的建立及进一步的科学研究提供参考数据。

1 材料和方法 1.1 对象

采用整群随机抽样的方法，于2009—2010年在河南省3个城市的部分区县中，抽取了1 866名(6~60)岁人群作为调查对象。经过签署知情同意书后，开展了血液样品的采集和问卷调查。采样地区的选择，人群选择和伦理学审查均严格按照本课题组制定的现场采样及质量控制方案进行^[11]。调查对象的纳入标准为：在抽样地区居住满5 a；居住地周边5 km范围内无铜、锌相关污染企业；年龄范围为(6~60)岁，并将其分为(6~12)岁、(13~16)岁、(17~20)岁、(21~30)岁、(31~45)岁、(46~60)岁等6个年龄组。剔除有接触职业有害因素人群，自述患肝脏疾病、肾脏疾病、糖尿病、甲亢及肿瘤等慢性消耗性疾病以及在3个月内服用过复合微量元素类药物和保健品的研究对象。最终对符合条件的1 866名调查对象进行了血浆中铜、锌含量的测定。

1.2 主要仪器与试剂

肝素锂抗凝剂采血管(美国BD公司)，冻存管(美国Axygen公司)，去离子水(≥18.0 mΩ)，硝酸(优级纯，德国Merck公司)，电感耦合等离子体发射光谱仪(OPTIMA 8000DV型，美国PE公司)，血清痕量标准物质(L-2，批号1309416，挪威Seronorm公司)。

1.3 检测方法

取0.5 mL血浆，加入4.5 mL稀释液(体积分数为1%硝酸)，充分振荡混匀。采用电感耦合等离子体发射光谱法测定铜、锌浓度。标准曲线法定量，Cu和Zn的标准曲线测定范围均为(50~300) μg/L。方法的检出限分别为：15.1和8.2 μg/L，定量下限分别为50.2和27.3 μg/L^[12]。

1.4 质量控制

在样品采集、运输、存储及实验室检测等环节，均依照本课题组制定的质量控制方案进行^[11]。从事样品采集和检测的人员均经过统一技术培训，对调查的内容进行了培训，对承担检测参数的实验室人员进行了现场实际操作的技术培训；样品采集的容器和用品均经检测低于检测限，并由项目组统一配置与发放至各个采样点；样品采集在洁净的环境进行，避免环境污染和交叉污染。同时为保证实验结果的可靠性，本实验采用有证血清痕量标准物质(挪威Seronorm公司，L-2，批号1309416)进行质量控制，每(50~70)个样品间加入一个质控样，以保证实验结果的准确性。

1.5 统计学分析

采用SPSS 19.0软件进行统计检验，以P < 0.05为有统计学意义。对符合正态分布的资料，采用均数和标准差对其进行统计描述；采用t检验对性别间差异进行统计学检验，采用方差分析对年龄和地区间的差异进行统计学检验；对于不符合正态分布的资料，采用百分位数对其进行统计描述，采用Mann-Whitney U检验对性别间差异进行统计学分析, 采用Kruskal-Wallis H检验对年龄和地区间差异进行统计学分析。

2 结果 2.1 质量控制结果

本次共测定47个sero-L-2质控样，铜和锌的测定结果均位于证书给定的参考值范围之内。其中铜的证书标准值为1 925 μg/L，参考值范围为(1 538~2 312) μg/L。质控样中铜的测定结果在(1 684~2 022) μg/L之间，平均值为1 842 μg/L；锌的证书标准值为1 532 μg/L，参考值范围为(1 223~1 840) μg/L。质控样中锌的测定结果在(1 491~1 817) μg/L之间，平均值为1 678 μg/L。

2.2 血浆铜的分布特征

调查对象血浆铜中位数为923 μg/L，P_2.5和P_97.5分别为612和1 355 μg/L。男性血浆中铜浓度的中位数为903 μg/L，女性血浆中铜浓度的中位数为935 μg/L，差别有统计学意义，女性高于男性(表 1)。不同年龄组血浆铜差异有统计学意义，其中(46~60)岁年龄组最高(中位数1 003 μg/L)，(17~20)岁年龄组最低(中位数810 μg/L)。分别将各年龄组按性别分组后发现，(17~20)岁年龄组和(21~30)岁年龄组性别间差别有统计学意义，女性高于男性，其余各年龄组性别间均无显著性差别(表 1)。河南省濮阳、焦作和平顶山三市一般人群血浆铜中位数分别为923、933、893 μg/L，差异有统计学意义(表 1)。

2.3 血浆锌的分布特征

调查对象血浆锌中位数为859 μg/L，P_2.5和P_97.5分别为618和1 217 μg/L。男性血浆中锌浓度的中位数为904 μg/L，女性血浆中锌浓度的中位数为832 μg/L，差别有统计学意义，男性高于女性(表 2)。不同年龄组血浆锌差异有统计学意义，其中(21~30)岁年龄组最高(中位数934 μg/L)，(13~16)岁年龄组最低(中位数805 μg/L)。分别将各年龄组按性别分组后发现，除(17~20)岁年龄组性别间无差异外，其余各组性别间均有显著性差异。其中(6~12)岁年龄组表现为女性高于男性，其余各年龄组均表现为男性高于女性(表 2)。河南省濮阳、焦作和平顶山三市一般人群血浆锌中位数分别为887、884和801 μg/L，差异有统计学意义(表 2)。

2.4 血浆Cu/Zn比值

调查对象血浆Cu/Zn比值中位数为1.06，P_2.5和P_97.5分别为0.64和1.67。男性血浆中Cu/Zn比值中位数为0.99，女性血浆中Cu/Zn比值中位数为1.13，差别具有统计学意义，女性高于男性(表 3)。不同年龄组血浆Cu/Zn比值差异有统计学意义，其中(6~12)岁年龄组最高(中位数1.19)，(20~30)岁年龄组最低(中位数0.97)。分别将各年龄组按性别分组后发现，各年龄组性别间均有显著性差异。其中(6~12)岁年龄组表现为男性高于女性，其余各年龄组均表现为女性高于男性(表 3)。河南省濮阳、焦作和平顶山三市一般人群血浆Cu/Zn中位数分别为1.05、1.04和1.12，差异有统计学意义(表 3)。

3 讨论

铜、锌是人体必需的微量元素，不能自身合成，只能通过食物摄取。人体吸收的元素主要跟随血液运送到身体各个组织和器官，进入血液的金属元素，能立即在血浆中得到显示。血浆中金属元素的含量可以为人体的营养水平和环境暴露(职业暴露)水平提供一个基础的参考。欧盟国家针对一般人群微量元素的研究开展较早且研究较多^[13-16]，而我国目前对一般健康人群的研究主要集中于特殊人群。本研究通过对河南省三个城市一般人群血浆中铜、锌含量进行检测分析，反应该地区一般人群血浆中铜、锌负荷水平。

本研究调查显示，河南省一般人群血浆铜中位数为923 μg/L，这与瑞典^[17]、德国^[18]、伊朗^[19]以及我国济南^[20]等国家和地区的研究结果相似，但低于另外一些国家：较希腊^[21]一般人群低21%，丹麦^[22]低22%，西班牙安达卢西亚^[23]低33%。河南省女性血浆铜含量大于男性，差别有统计学意义。这与巴西里约热内卢^[24]的研究结果不同，该研究显示血浆在性别间无差别。但和国外大多数研究^{[19, 21, 23, 25-26]}相一致，国外大多数研究均显示女性血浆铜显著高于男性。

河南省一般人群血浆锌中位数为859 μg/L，与伊朗^[19]、挪威^[26]等地研究结果相似，但明显低于德国^[18]及我国济南^[20]等地区的研究结果。河南省男性血浆锌含量显著高于女性，这与国外大多数研究结果一致，但与挪威^[26]、加拿大^[27]、西班牙加纳利群岛^[28]等地区的研究结果不一致，以上地区研究均显示男女间血浆锌差别无统计学意义。

对河南省三个地级市血浆铜、锌分析发现，不同地区之间均存在显著性差异，这可能是由于不同地区间环境本底值不同以及生活习惯不同所致。

铜和锌均作为重要成分参与体内生理活动，铜和锌的平衡对维持机体正常运转有着重要作用。有许多研究表明，在一些恶性肿瘤及慢性病中，如膀胱癌、胆囊癌、内源性哮喘、病毒性肝炎、风湿性关节炎及糖尿病中，血清铜明显升高，血清锌则降低，由此导致血浆Cu/Zn比值升高。因此可以考虑将血浆Cu/Zn比值作为某些疾病的生物标志。本研究显示，河南省一般人群血浆Cu/Zn比值中位数为1.06，女性显著高于男性，不同年龄组中，除(6~12)岁年龄组外，(45~60)岁年龄组血浆Cu/Zn比值高于其他年龄组。本研究属于现况调查，只能对河南省一般人群血浆Cu/Zn比值进行客观描述，以此为之后的研究提供基础参考数据。