放置在商场、电影院内的迷你唱吧成为人民群众利用碎片时间休闲娱乐的消费方式，与传统KTV不同，顾客使用迷你唱吧时需要同时使用耳机、话筒，使用后没有更换或采取其他卫生处理措施，下一批顾客直接使用, 话筒和耳机成为直接接触消费者口唇和皮肤的公共用具。为了解其微生物污染状况，对北京市的迷你唱吧进行了微生物污染状况调查，并对结果进行分析评价。

1 材料与方法 1.1 研究对象

随机选取北京市城区范围内迷你唱吧37个房间进行采样，涵盖两大迷你唱吧品牌。

采样项目包括：室内空气中菌落总数、温度和相对湿度；耳机话筒表面的细菌总数、真菌总数、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌；对个别装有话筒消毒装置的设备进行紫外线照度检测。

1.2 设备与耗材

Air ideal空气微生物采样器(法国梅里埃公司)、恒温培养箱(德国Binder公司)、霉菌培养箱(德国Binder公司)，JWS-A5(北京市亚光仪器公司)、紫外辐射照度计(LANCAN，北京昌联卫生消毒用品有限公司)、灭菌棉拭子、营养琼脂培养基和沙氏琼脂培养基、大肠埃希菌快速检测测试片(美国3 M公司)、金黄色葡萄球菌快速检测测试片(美国3 M公司)、生理盐水。

1.3 采样与培养方法

1.3.1 唱吧内空气

参照《室内空气质量标准》(GB/T 18883-2002)^[1]进行采样。将空气微生物采样器置于迷你唱吧房间中央，采样高度根据顾客使用迷你唱吧时的呼吸带定为1.2 m，采集200 L室内空气于营养琼脂平板。将带菌营养琼脂平板置36±1℃培养48 h，计数菌落数，根据流量换算成每立方米空气中的菌落数，以CFU/m³报告结果。

1.3.2 话筒

依据《公共场所卫生检验方法》(第四部分：公共用品用具微生物)^[2]进行采样。使用灭菌棉拭子，于10 mL灭菌生理盐水采样液内浸润后，在话筒顶端(约25 cm²)处来回均匀涂抹，再用灭菌剪刀剪去棉拭子手接触部分并放入采样液中。将含有棉拭子的采样液分别吸取1 mL接种大肠埃希菌快速检验测试片和金黄色葡萄球菌快速检验测试片，按测试片要求的温度和时间培养并记录结果。另分别吸取1 mL进行细菌总数、真菌总数的计数，以CFU/25 cm²报告结果。

1.3.3 耳机

依据《公共场所卫生检验方法》第四部分：公共用品用具微生物^[2]进行采样。使用灭菌棉拭子，于10 mL灭菌生理盐水采样液内浸润后，在耳机左右海绵处(共80 cm²)来回均匀涂抹，再用灭菌剪刀剪去棉拭子手接触部分并放入采样液中。检测项目与培养方法与话筒样品相同。

1.3.4 紫外线照度

参照《消毒技术规范》(2002年版)^[3]使用紫外辐射照度计在消毒设备的光源下5 cm处(话筒网头位置)检测照度并记录结果。

1.4 统计分析

用SPSS 18.0统计软件对两品牌迷你唱吧进行独立样本t检验，分析两类包房的室内空气菌落数、两款耳机表面细菌真菌总数和两款不同材质话筒表面细菌真菌总数的差异，以P＜0.05为差异有统计学意义。由于微生物在环境中分布的特殊性，导致微生物实验的原始检测结果不符合正态分布，但当检验结果取对数后，所得数值近似接近于正态分布^[4]。因此，将各培养基计数结果分别取其常用对数后，再进行独立样本t检验。

1.5 质量控制

实验所需试剂均在保质期内，所用仪器均为年检合格产品。

2 结果 2.1 包房内空气微生物情况

经独立样本t检验，两组数据方差齐性(F=2.736，P=0.107＞0.05)，两组之间室内空气细菌总数比较差异无统计学意义(t=0.636，P=0.529＞0.05)(表 1)。

2.2 耳机和话筒表面微生物污染状况检测结果

耳机表面细菌总数检出率为93.24%，真菌检出率为100%。话筒表面细菌总数检出率为79.73%，真菌检出率为91.89%(表 2)。采用快速检测测试片，在耳机和话筒表面均检出金黄色葡萄球菌，阳性检出率分别为4.05%和5.40%，大肠埃希菌未检出(表 3)。

2.3 迷你唱吧两种类型耳机表面微生物污染状况结果比较

经独立样本t检验，耳机细菌总数比较两组数据方差齐性(F=1.705，P=0.196＞0.05)，差异无统计学意义(t=-1.738，P=0.173＞0.05)；耳机真菌总数比较两组数据方差齐性(F=0.000，P=0.993＞0.05)，差异无统计学意义(t=0.063，P=0.950＞0.05)(表 4)。

2.4 迷你唱吧两种材质话筒表面微生物污染状况结果比较

经独立样本t检验，话筒细菌总数比较两组数据方差齐性(F=0.247，P=0.620＞0.05)，差异有统计学意义(t=-2.865，P=0.005＜0.05)，乙类高于甲类；话筒真菌总数比较两组数据方差齐性(F=2.928，P=0.091＞0.05)，差异有统计学意义(t=-3.458，P=0.001＜0.05)，乙类高于甲类(表 5)。

3 讨论

迷你唱吧的包房作为新兴的娱乐场所，其特点是：空间狭小(最多容纳两人)；因隔音要求导致在使用过程中空间非常密闭；人员流动性大，设备与皮肤直接接触且不经消毒重复使用。

室内空气中的菌落总数除与理化因素有关外，还与室内卫生状况、人员数量、活动方式及空气污染程度有关^[5]。此次调查的所有包房均设置在大型商场或电影院内，不直接与外环境相通。包房内整洁干净，无垃圾遗留，去包房里唱歌的人进入包房后即坐在屏幕前至娱乐结束，无来回走动等会引起空气中带菌微粒增加的行为。虽然唱歌、说话等行为也会引起空气中带菌微粒的增加，但本次试验为不影响顾客使用，采样均在无人使用状态下进行，因此所有包房中空气菌落总数指标均符合国家标准^[1]，且数值与限值相距较远。两种包房室内陈设不同，但面积相近，故室内空气中的菌落总数无显著差异。

因迷你唱吧为新生事物，因此，器材表面的微生物污染状况未找到与之相对应的国家卫生标准对结果进行判读，暂参照《旅店业卫生标准》(GB 9663-1996)^[6]对耳机和话筒表面的细菌总数进行评价，希望能为新标准在实施前提供一定的数据参考。由表 2可见，迷你唱吧中耳机话筒的表面细菌总数检出率较高且合格率较低，真菌的检出率则分别达到100%和91.89%。话筒的细菌总数最高值比耳机的最高值高四倍余，与话筒网状面凹槽内容易残留使用者边唱歌边吃零食(如薯片等膨化食品)的残渣，引起细菌滋生有关，在采样过程中也见到顾客携带饮料和食物进入包房并在唱歌间歇食用。

金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌检出提示存在健康风险。在无芽孢细菌中，葡萄球菌对外界环境的适应力、抵抗力最强，广泛分布于自然界(如空气、水、土壤以及人的皮肤和与外界相通的腔道中^[7]。而其中毒力最强的金黄色葡萄球菌可通过直接接触和接触污染物传染，皮肤外伤、个人卫生状况不佳、抵抗力低下及慢性病等均可成为人群在公共场所感染金黄色葡萄球菌的易感因素^[7]，有文献报告在公共场所用品中分离出的金黄色葡萄球菌对氨苄青霉素和青霉素G耐药率达80%以上^[8]。寄生于正常人鼻腔和皮肤等处的金黄色葡萄球菌，在娱乐唱歌时随着呼出的气体或直接接触沾染至耳机和话筒表面，易引起敏感人群的特应性皮炎^[9]或吸入性金黄色葡萄球菌肺炎^[10]。本次调查，在耳机和话筒表面，均有金黄色葡萄球菌检出，虽然平均检出率并不算高(4.73%)，但是在其中一只话筒上检出的金黄色葡萄球菌数量高达1 140 CFU/25 cm²(表 3), 存在较高的感染风险。大肠埃希菌可成为条件致病菌引起肠外感染，且呼吸道标本分离出的大肠埃希菌对青霉素、头孢菌素类的耐药率明显高于其他标本分离株^[11]。此前有文献报道在2003年歌舞厅话筒上大肠菌群检出率为30%^[12]，本次调查特在此基础上针对大肠菌群中的大肠埃希菌进行检测且未检出，虽然检测方法检测指标不同，但也从一定程度上反映了社会的进步，人民卫生状况的改善。

统计结果表明，两种类型的耳机表面因材质相似，细菌总数和真菌总数无统计学差异。乙类话筒表面的细菌总数、真菌总数高于甲类话筒，具有统计学意义。在不考虑使用频率、使用人员差异影响的情况下，应与其网头的材质有关，甲类话筒网头为银色电镀抛光金属材质，网丝光滑，乙类话筒网头为黑色镀膜材质，网丝光滑度不及甲类，造成其存留更多微生物。

紫外线消毒是常用的物理消毒方法。消毒使用的紫外线为C波紫外线，杀菌作用最强的波段是(250~270)nm，辐照度和辐照时间是影响紫外消毒效果的重要因素，且针对不同的目标微生物应设计不同的辐照剂量，在目标微生物不详时，照射剂量不应低于10 000 μW·s/cm^2[13-14]。采样时发现，在某些包房内放置麦克风的位置上方安置了紫外消毒灯，可见其话筒的卫生问题已得到商家的关注。但使用紫外辐照照度仪对消毒灯照度进行检测却发现照度均为0 μW/cm²。可见商家未采用有消毒作用的紫外灯，其消毒措施形同虚设。若以后改进为真正有消毒效果的紫外灯，除应继续关注其辐照剂量能否达到消毒效果外，因其会对人的眼睛和皮肤造成伤害，还应对其使用的安全性做进一步调查评估。

迷你唱吧作为新消费项目，其中的卫生隐患在本文的提示下亦应引起重视，尽快起草相关文件及标准，并加强针对迷你唱吧的环境卫生监督管理，消除隐患，切实保障人民健康。