环境科学学报  2019, Vol. 39 Issue (8): 2754-2763
引用本文
施丽丽, 董晶剑, 王凤华, 等. 2019. 围产期二噁英暴露对学龄前儿童类固醇激素的影响[J]. 环境科学学报, 39(8): 2754-2763.
Shi L L, Dong J J, Wang F H, et al. 2019. Effects of perinatal dioxin exposure on steroid hormones in preschool children[J]. Acta Scientiae Circumstantiae, 39(8): 2754-2763.
围产期二噁英暴露对学龄前儿童类固醇激素的影响    [PDF全文]
施丽丽1 , 董晶剑1 , 王凤华1 , 潘益华1 , 陈轲君1 , 凌慧颖1 , 陈志鑫1 , 汤晨昱1 , 罗挺1 , 城户照彦2 , 孙献亮1,2     
1. 嘉兴学院医学院, 嘉兴 314001;
2. 日本金泽大学医药保健学院保健学系, 金泽 9208640
收稿日期: 2019-01-02; 修回日期: 2019-02-20; 录用日期: 2019-02-20
基金项目: 浙江省基础公益研究计划项目（No.LGF18H260008）；嘉兴学院科研启动项目（No.70515025）；嘉兴学院大学生研究训练计划项目（No.85178552）
作者简介: 施丽丽(1990-), 女, E-mail:953291013@qq.com
通讯作者（责任作者）: 孙献亮(1984—), 男, 博士, 讲师, 主要从事环境毒理与环境卫生流行病学的研究.主持及参与国家级项目2项, 省部级项目2项, 发表研究论文10余篇. E-mail:syh9012881999@163.com
摘要: 为揭示围产期二噁英（PCDD/DFs）暴露对学龄前儿童类固醇激素水平的影响.采用液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）及高分辨气相色谱法/高分辨质谱联用法（HRGC/HRMS）分析二噁英污染地区5岁儿童（n=37）及非污染地区5岁儿童（n=44）血清中8种类固醇激素水平及母乳中17种二噁英同系物浓度.结果显示污染地区男孩血清中睾酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮的水平明显低于非污染地区（p < 0.05）.污染地区女孩血清中睾酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、17α-羟孕酮、孕酮的水平明显低于非污染地区（p < 0.05）.上述类固醇激素与部分二噁英同系物浓度存在显著性负相关.以上结果表明围产期二英暴露导致学龄前儿童类固醇激素水平降低.
关键词: 围产期     二英     血清     类固醇激素     学龄前儿童    
Effects of perinatal dioxin exposure on steroid hormones in preschool children
SHI Lili1, DONG Jingjian1, WANG Fenghua1, PAN Yihua1, CHEN Kejun1, LING Huiying1, CHEN Zhixin1, TANG Chenyu1, LUO Ting1, KIDO Teruhiko2, SUN Xianliang1,2    
1. Department of public health, School of Medicine, Jiaxing University, Jiaxing 314001;
2. Faculty of Health Sciences, Institute of Medical, Pharmaceutical, and Health Sciences, Kanazawa University, Kanazawa 9208640
Received 2 January 2019; received in revised from 20 February 2019; accepted 20 February 2019
Abstract: In order to investigate impacts of perinatal dioxin exposure on serum steroid hormones in preschool children. 17 dioxin congeners of polychlorinated dibenzodioxins (PCDDs), polychlorinated dibenzofurans (PCDFs) in maternal breast milk and 8 steroid hormones in the serum were analyzed in 37 and 44 mother-child(5-year-old) pairs from dioxin polluted area and non-polluted area, respectively by HRGC/HRMS and LC-MS/MS. The results showed that testosterone, A-dione, Progesterone, dihydrotestosterone (DHT), and dihydroepiandrosteron (DHEA) levels were significantly lower in the dioxin polluted area than in the non-polluted area in boys(p < 0.05). In girls, levels of testosterone, DHT, DHEA, Progesterone, and 17-α-hydoxy progesterone were significantly lower in the dioxin polluted area than in the non-polluted area (p < 0.05). These steroid hormones levels were significantly negatively correlated with the concentration of several dioxin congeners. Our findings suggest that dioxin exposure during perinatal can lead to abnormal changes in steroid hormones in preschool children.
Keywords: perinatal     dioxin     serum     steroid hormones     preschool children    
1 引言(Introduction)

在过去几十年内, 人们在内分泌干扰物(EDCs)对健康的影响的研究方面越来越感兴趣. (EDCs)是一类存在于环境中能够干扰生物体正常内分泌功能的外源性物质(陈玫宏等, 2017).已有毒性研究表明EDCs能够干扰生物体生殖系统、胚胎发育、机体代谢等生理功能(Tabassum et al., 2017).二英作为典型的环境内分泌干扰物已经引起了国内外广泛关注(Li et al., 2018; Chen et al., 2018; 俞明锋等, 2018).二英是一种持久性环境污染物, 其来源包括焚烧、纸张的氯漂白和纸浆、生产或处置含氯产品以及一些杀虫剂、除草剂和杀真菌剂的制造, 也可由森林火灾造成(Rahbar et al., 2017; 俞明锋等, 2018).二英具有亲脂性及高度稳定性, 在人体中的半衰期为7~11年, 可从母乳排泄(Chen et al., 2018).在怀孕期间, 二英可通过胎盘或脐带从母体传给胎儿, 婴儿出生后, 亦可以通过母乳喂养传递二英(Suzuki et al., 2005).早期接触二英(宫内或母乳喂养)可对儿童健康造成各种不利影响.已有文献指出, 围产期接触二英/多氯联苯可导致宫内或产后儿童发育迟缓、免疫毒性神经发育缺陷、以及认知和运动发育延迟等(Tran et al., 2016).Meyer等(2018)发现在雄性斑马鱼的生殖腺中, 祖代暴露二英类物质中毒性最强的四氯二苯并二英(TCDD)会引起多代的组织学和转录改变.胎儿暴露于EDCs已经与整个寿命期的不良神经行为结果相关, 并可能持续多代后代(Xin et al., 2018).

越南战争期间, 美军大量使用含有二英的枯叶剂, 被污染最严重的3个地区分别是Bien Hoa、Phu Cat和Da Nang (Dwernychuk et al., 2005).虽然过去40多年来热带降雨、侵蚀和化学破坏的影响, 目前污染地区二英浓度已大幅降低.然而, 上述污染地区的母乳中和男性血清中的二英水平仍比非污染地区Kim Bang高3~5倍(Hue et al., 2014; Manh et al., 2014).研究表明即使是低剂量的二英也可能对人类健康造成不利影响(Vandenberg et al., 2012).我们在前期的流行病学队列研究中发现, 围产期二英暴露导致1岁儿童唾液中的脱氢表雄酮水平降低, 3岁时该类固醇激素水平升高(Kido et al., 2016; Anh et al., 2017).为进一步阐明二英对儿童(从喷洒除草剂/二英开始的第三代)体内类固醇激素的影响, 本研究于2012—2013年对二英污染地区的37名5岁儿童及非污染地区44名5岁儿童的血清中8种类固醇激素和母乳中17种二英同系物进行了调查分析.

2 材料与方法(Materials and methods) 2.1 研究区域

本研究所选择的二英污染区域为越南Bien Hoa地区, 在越南战争期间该地区存放了大量农药并大量喷洒.二英非污染区域为Kim Bang地区, 其位于越南北部.污染地区的母乳中和男性血清中的二英水平比非污染地区Kim Bang高3~5倍(Hue et al., 2014; Manh et al., 2014).污染地区土壤的二英浓度(3300 pg-TEQ·g-1)远高于其他国家规定的标准(1.000 pg-TEQ·g-1)(Huyen et al., 2015).研究区域详见图 1.

图 1 研究区域示意图 Fig. 1 Map of Vietnam and study areas
2.2 样品采集 2.2.1 母乳样本的采集

二英污染地区的37名哺乳母亲及其婴儿和非污染地区的44名哺乳母亲及其婴儿参加了从2008年9月开始的这项研究.所有母亲都正在给4周大的婴儿哺乳, 并在该地区居住了5年以上.在医护人员解释研究目的后, 参加者同意捐出10~20 mL的母乳样本, 用于分析17种二英同系物的浓度.产后4周母乳中二英的含量被认定为婴儿围产期二英暴露量(Kido et al., 2016; Tran et al., 2016; Anh et al., 2017).

2.2.2 儿童血液样本的采集

在前期研究中我们采取了婴幼儿的唾液并分析其中类固醇激素的水平, 但由于唾液中类固醇激素含量极低很难测定, 因此在儿童1岁和3岁时只测定了脱氢表雄酮和可的松的水平, 并发现围产期二英暴露导致1岁儿童唾液中的脱氢表雄酮水平降低, 3岁时该类固醇激素水平升高(Kido et al., 2016; Anh et al., 2017), 为进一步确认二英对儿童其他类固醇激素的影响, 本研究对上述儿童进行了血液样本的采集.二英污染地区37名儿童(男性儿童21名, 女性儿童16名)及非污染地区44名儿童(男性儿童23名, 女性儿童21名)为受试对象, 所有受试儿童的年龄均为5岁, 出生并居住于调查地.为确保类固醇激素检测的准确性, 所有样品均于上午8:00—10:00进行采集, 血液样本采集量为10 mL, 离心后收集血清于采样小瓶并保存于冷藏盒.采样结束后统一存放于-30 ℃低温冰箱以供分析.

本研究通过了日本金泽大学伦理委员会审查(编号:2011-455), 所有受试者均签署知情同意书.

2.3 样品处理与分析 2.3.1 母乳中二英的测定

在多层硅胶柱和活性炭分散硅胶柱上进行碱消化和色谱纯化操作, 分离和收集PCDD/DFs.使用配备有以选定离子监测模式操作的高分辨率质谱仪(气相色谱高分辨率质谱仪；MS-JMS700, JEOL, 东京, 日本)的气相色谱仪(HP-6980；惠普, Palo Alto, 加利福尼亚, 美国)进行定量.具体分析方法详见参考文献(Kido et al., 2016).PCDD/DFs-TEQ的计算参考世界卫生组织2005年毒性当量因子(Van den Berg et al., 2006).严格按照美国国家环保局EPA1613方法对样品分析过程进行质量控制, 确保数据的准确.采用13C同位素内标稀释定量法对母乳中二英进行定量.背景干扰以扣除实验空白为准.结果表明, 空白实验组的回收率介于33.4%~119%；样品回收率范围：30%~120%, 在EPA检测方法的可接受范围之内.

2.3.2 血清中类固醇激素的测定

① 主要仪器和试剂  API4000 三重四极杆质谱仪(加拿大MDS Sciex公司)；Agilent1100高效液相色谱系统及PTC自动进样器(德国Waldbronn公司)；高速离心机(日本Shimadazu公司)等.

皮质醇、可的松、睾酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、雄烯二酮、孕酮标准品(德国Merck公司)；甲醇(色谱纯, 美国Heneywell公司)；乙酸乙酯、羟胺(色谱纯, 日本Wako公司)等.

② 仪器分析  按文献方法进行混合标准溶液的配置及样品前处理, 随后进行LC-MS/MS检测(沈斌等, 2018).

色谱条件：色谱柱为Phenomenex C18反相色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2.6 μm), Phenomenex C18为预保护柱.流动相A为H2O(含0.1%甲酸), 流动相B为甲醇(含0.1%甲酸).柱温35 ℃, 进样体积为20 μL.

质谱条件：电离方式, ESI源；采用多反应监测(MRM)的质谱扫描模式.喷雾电压(IS)为5500 V; 碰撞气(CAD)为Medium；气帘气(CUR)为40 kPa; 离子源雾化气(GS1)和加热辅助气(GS2)均为60 kPa; 去溶剂温度为550 ℃.

2.4 统计学方法

采用SPSS 12.0软件和JMP @ 9软件包(SAS institute, Cary, NC, USA)进行数据统计分析.本文中数据由均值±标准差或由中位数及四分位数间距来表示.采用Student t检验(正态分布)或Mann-Whitney U检验(非正态分布)进行组间比较.在调整体质指数(BMI)后, 使用多因素非条件logistic回归模型分析两组人群中二英暴露浓度与类固醇激素之间的相关性.

3 结果(Results) 3.1 两地区受试者人群特征比较

本研究随机选取了二英污染地区的37名5岁儿童及非污染地区44名5岁儿童作为受试对象.如表 1所示, 两地区受试男孩及女孩身高、体重、体质指数(BMI)、头围、胸围均存在显著性差异(p < 0.05), 且各指标均为污染地区大于非污染地区.

表 1 两地区受试者人群特征比较 Table 1 Demographic characteristics of participants in the two areas
3.2 两地区母乳中二英水平的比较

表 2是对两个地区母乳中17种二英同系物浓度的比较.从结果可看出, 二英污染地区母乳中的二英同系物中除1, 2, 3, 7, 8-PeCDF、1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDF、2, 3, 4, 6, 7, 8-HxCDF、OCDF外, 其他13种二英同系物浓度及Total PCDDs、PCDFs、PCDD/DFs毒性当量均高于非污染地区, 各差异均具有统计学意义(p < 0.05).其中2, 3, 7, 8-TeCDD、1, 2, 3, 6, 7, 8-HxCDD、1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD、1, 2, 3, 4, 6, 7, 8-HpCDD、OCDD、1, 2, 3, 4, 7, 8-HxCDF、1, 2, 3, 4, 6, 7, 8-HpCDF、1, 2, 3, 4, 7, 8, 9-HpCDF的浓度比非污染地区高3~5倍.Total PCDFs毒性当量比非污染地区高2倍以上, Total PCDDs、PCDD/DFs毒性当量比非污染地区高3倍以上.

表 2 两地区母乳中二英水平比较 Table 2 Comparison of dioxins levels in breast milk from two areas
3.3 两地区受试儿童血清中类固醇激素的比较

两地区受试儿童血清中类固醇激素水平如表 3所示.污染地区男孩血清中睾酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮的水平显著低于非污染地区(p < 0.05).污染地区女孩血清中17α-羟孕酮、睾酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、孕酮的水平显著低于非污染地区(p < 0.05).两地区受试儿童体内皮质醇、可的松、雄烯二酮水平没有显著性差异(p>0.05).

表 3 两地区受试儿童血清中类固醇激素的比较 Table 3 Comparison of steroid hormones levels in serum from two areas
3.4 两个地区受试男孩血清中类固醇激素与二英浓度的相关性

采用多因素非条件logistic回归模型分析两组人群中二英暴露浓度与男孩血清中类固醇激素之间的关联性.由表 4可见, 经体质指数(BMI)调整后, 污染地区男孩睾酮除了与2, 3, 7, 8-TeCDF、1, 2, 3, 7, 8-PeCDF、1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDF、2, 3, 4, 6, 7, 8-HxCDF及OCDF不存在相关性外, 与其他12种二英同系物及Total PCDDs、PCDFs、PCDD/DFs呈负相关.双氢睾酮与1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD、1, 2, 3, 4, 6, 7, 8-HpCDD、OCDD及Total PCDDs、PCDD/DFs呈负相关.脱氢表雄酮与1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD、1, 2, 3, 4, 7, 8, 9-HpCDF及Total PCDD/DFs呈负相关.非污染地区男孩血清中类固醇激素与二英浓度之间无相关性(表 5).

表 4 污染地区男孩类固醇激素与二英的相关性 Table 4 Correlation of steroid hormones and dioxins in boys in polluted area by logistic regression analysis

表 5 非污染地区男孩类固醇激素与二英的相关性 Table 5 Correlation of steroid hormones and dioxins in boys in non-polluted area by logistic regression analysis
3.5 两个地区受试女孩血清中类固醇激素与二英浓度的相关性

采用多因素非条件logistic回归模型分析两组人群中二英暴露浓度与男孩血清中类固醇激素之间的关联性.由表 6可见, 经体质指数(BMI)调整后, 污染地区女孩血清中睾酮除了与2, 3, 7, 8-TeCDD、1, 2, 3, 4, 7, 8-HxCDD、1, 2, 3, 7, 8-PeCDF、2, 3, 4, 7, 8-PeCDF、1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDF、2, 3, 4, 6, 7, 8-HxCDF、1, 2, 3, 4, 7, 8, 9-HxCDF及OCDF不存在相关性外, 与其他9种二英同系物及Total PCDDs、PCDFs、PCDD/DFs呈负相关.双氢睾酮与1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD、1, 2, 3, 46, 7, 8-HpCDD、OCDD、1, 2, 3, 4, 7, 8-HxCDF及Total PCDDs、PCDD/DFs呈负相关.脱氢表雄酮与1, 2, 3, 7, 8-PeCDD及Total PCDD/DFs呈负相关.17α-羟孕酮与1, 2, 3, 7, 8-PeCDD、1, 2, 3, 7, 8-PeCDF、1, 2, 3, 4, 7, 8, 9-HpCDF及Total PCDDs、PCDFs、PCDD/DFs呈负相关.孕酮与OCDD呈负相关.非污染地区女孩血清中类固醇激素与二英浓度之间无相关性(表 7).

表 6 污染地区女孩类固醇激素与二英的相关性 Table 6 Correlation of steroid hormones and dioxins in girls in polluted area by logistic regression analysis

表 7 非污染地区女孩类固醇激素与二英的相关性 Table 7 Correlation of steroid hormones and dioxins in girls in non-polluted area by logistic regression analysis
4 讨论(Discussion)

越南战争期间, 美军大量使用含有二英的枯叶剂, 虽已过去40多年, 本研究发现污染地区女性母乳中二英毒性当量仍比非污染地区高出3倍以上, 表明二英污染具有持久性.母乳是新生儿能量来源, 因此二英不仅直接影响到母体本身健康, 也会对下一代产生影响, 在本研究中, 二英污染地区母乳中二英水平(Total PCDD/DFs, 109.8 pg·lipid-1)比非污染地区(34.4 pg·lipid-1)的样本高出3倍(表 2).因此, 我们假设婴儿每日二英摄入量也是非污染地区的3倍.这一结果与前人的研究基本一致(Hue et al., 2014).

本研究中二英污染地区男孩脱氢表雄酮水平(188 pg·mL-1)明显低于非污染地区(302 pg·mL-1), 脱氢表雄酮与1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD、1, 2, 3, 4, 7, 8, 9-HpCDF及Total PCDD/DFs呈负相关(表 3、4).二英污染地区女孩脱氢表雄酮水平(291 pg·mL-1)明显低于非污染地区(397 pg·mL-1), 脱氢表雄酮与1, 2, 3, 7, 8-PeCDD及Total PCDD/DFs呈负相关. (表 3、6).非污染地区男孩和女孩血清中的二英浓度与脱氢表雄酮水平不相关(表 5、7).人肾上腺由肾小球带(ZG)、束状带(ZF)和网状带(ZR)组成.胎儿肾上腺层在2~3年内分化为ZG、ZF和ZR 3部分, 这三层负责激素的分泌.出生后ZR发生变化, 4~5岁时胎儿ZR退化发育为成人型ZR.新生ZR中胎儿肾上腺皮质区消失, 出生后脱氢表雄酮迅速下降.1年后, 肾上腺皮质分化为3层, 新生的ZR生成脱氢表雄酮(Rege et al., 2012; Voutilainen et al., 2015; Al-Turk et al., 2016).Miyashitad等研究发现, 婴儿脐带血中的脱氢表雄酮水平与母体血液中的二英浓度呈正相关(Miyashita et al., 2018).在前期研究中我们发现围产期二英暴露导致1岁儿童唾液中的脱氢表雄酮水平降低, 3岁时该类固醇激素水平升高(Kido et al., 2016; Anh et al., 2017).结合上述发现, 我们认为在本研究中, 二英可能通过延迟胚胎ZR向肾上腺皮质的分化, 改变胎儿肾上腺带导致儿童脱氢表雄酮水平显著降低.

睾酮是主要的性激素和合成类固醇, 在男性的生活中扮演着重要的角色, 但它实际上存在于两性之间.男性睾酮主要由睾丸和肾上腺皮质分泌(Mooradian et al., 1987).女性睾酮主要来源于外周雄烯二酮的转化, 以及肾上腺皮质和卵巢分泌(Mooradian et al., 1987).本研究发现二英污染地区男孩睾酮水平(22 pg·mL-1)明显低于非污染地区(79 pg·mL-1)(表 3), 12种二英同系物及Total PCDDs、PCDFs、PCDD/DFs呈负相关(表 3、4).二英污染地区女孩睾酮水平(19 pg·mL-1)明显低于非污染地区(84 pg·mL-1)(表 3), 睾酮与9种二英同系物及Total PCDDs、PCDFs、PCDD/DFs呈负相关(表 3、6).男孩和女孩的结果基本一致, 无明显的性别差异.非污染地区男孩和女孩血清中的二英浓度与睾酮水平不相关(表 5、7).因此, 我们认为在围产期暴露于二英, 持续影响肾上腺皮质类固醇激素的合成.我们假设肾上腺皮质中胎儿ZR细胞的结构和功能变化始于子宫和/或围产期.胎儿期器官发育对EDC的暴露高度敏感.然而, 二英对其影响机制尚不明确.EDC暴露可对性腺器官产生毒性, 一些EDC, 如二英, 可直接作用于激素受体或拮抗剂, 或改变性腺组织中激素代谢酶的诱导(Bergman et al., 2013) .在宫内和哺乳期暴露于二英的大鼠后代中, 报告了对前列腺生长和发育的抑制作用而没有减少雄激素产生(Roman et al., 1995).近期的研究发现, 母乳中的二英浓度与婴儿脐带血中的睾酮水平呈负相关(Boda et al., 2018).二英是典型的芳烃受体(AhR)配体, 对前列腺癌细胞体外研究表明雄激素受体(AR)和AhR介导的信号转导通路的相互干扰在二英对前列腺的抑制作用中起重要作用(Jana et al., 1999).据报道, AR位于胎盘中, 与胎儿性别无关, 在妊娠期间胎盘中5α-还原酶将睾酮转化为其生物活性形式的蛋白表达作用会增强(Vu et al., 2009). AR和AhR之间的相互干扰可能是改变暴露于二英的胎儿-胎盘单元中和生长发育相关的睾酮的合成或代谢的重要机制.

在本研究中, 污染地区男孩双氢睾酮水平(0.7 pg·mL-1)明显低于非污染地区(2.7 pg·mL-1), 双氢睾酮与1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD、1, 2, 3, 4, 6, 7, 8-HpCDD、OCDD及Total PCDDs、PCDD/DFs呈负相关(表 3、4).污染地区女孩双氢睾酮水平(0.7 pg·mL-1)明显低于非污染地区(1.9 pg·mL-1), 双氢睾酮与10种二英同系物及Total PCDDs、PCDFs、PCDD/DFs均呈负相关(表 3、6).男孩和女孩的结果基本一致, 无明显的性别差异.非污染地区男孩和女孩血清中的二英浓度与双氢睾酮水平不相关(表 5、7).双氢睾酮的生成途径为睾丸直接生成或通过睾酮与人体内5α-还原酶反应后生成(Parsons et al., 2005).因此, 本研究中双氢睾酮水平降低的原因可能与睾酮相同.

孕酮又称女性激素, 能够促进女性附器官成熟及第二性征出现, 并维持正常性欲及生殖功能的刺激, 也是雄激素、雌激素、肾上腺皮质激素等生物合成的重要中间物质(Baulieu et al., 2000).17α-羟孕酮是在合成糖皮质激素和性类固醇过程中产生的一种C-21内源性孕激素, 由肾上腺皮质及性腺等产生.血清中的17α-羟孕酮主要与性激素共同作用, 促进个体器官的发育, 妊娠时胎儿、胎盘及肾上腺可产生大量17α-羟孕酮(张芹等, 2014).动物实验发现, 二英类物质中毒性最强的四氯二苯并二英(TCDD)通过影响小鼠芳香烃受体(AhR)的表达, 降低类固醇激素孕酮的水平(Karman et al., 2012).细胞生物学研究发现TCDD通过影响黄体细胞的AhR的表达, 降低线粒体酶的活性进而降低黄体细胞的孕酮分泌(Gregoraszczuk et al., 2001).本研究发现, 二英污染地区女孩孕酮(75 pg·mL-1)和17α-羟孕酮(248 pg·mL-1)的水平明显低于非污染地区(291 pg·mL-1、368 pg·mL-1)(表 3).孕酮与OCDD呈负相关(表 6).17α-羟孕酮与1, 2, 3, 7, 8-PeCDD、1, 2, 3, 4, 6, 7, 8-HpCDD、1, 2, 3, 7, 8-PeCDF、1, 2, 3, 4, 7, 8, 9-HpCDF及Total PCDDs、PCDFs、PCDD/DFs呈不相关(表 6).非污染地女孩血清中的二英浓度与孕酮和17α-羟孕酮水平无显著性相关(表 6).因此, 我们认为围产期二英暴露对女孩孕酮及17α-羟孕酮的影响可能与睾酮和脱氢表雄相似, 即二英通过影响肾上腺皮质导致孕酮和17α-羟孕酮合成水平降低.

在前期的研究中, 我们发现污染地区婴幼儿低出生体重的比例明显高于非污染地区, 二英暴露浓度与婴幼儿出生体重呈负相关(Van Tung et al., 2016).然而在本研究中, 污染地区儿童的生长变量(身高、体重、体质指数(BMI)、头围、胸围)显著高于非污染地区(表 1).其他一些研究发现, 二英暴露对不同年龄段儿童生长发育的影响结果不同(Iszatt et al., 2016; Tai et al., 2016).在较大的年龄段, 二英暴露使男性受试者生长指数出现下降的趋势而女性受试者生长指数出现升高趋势(Iszatt et al., 2016; Tai et al., 2016).这与本研究中关于女孩的生长变量变化趋势一致, 然而与男孩的生长变量变化趋势相反.由于本项研究受试者人数与上述研究相比相对较少, 因此该发现需进一步验证.

5 结论(Conclusions)

围产期二英暴露可能通过延迟胚胎ZR向肾上腺皮质的分化, 改变胎儿肾上腺带, 从而导致5岁男孩睾酮(污染地区22 pg·mL-1vs非污染地区79 pg·mL-1)、双氢睾酮(污染地区0.7 pg·mL-1vs非污染地区2.7 pg·mL-1)和脱氢表雄酮(污染地区188 pg·mL-1vs非污染地区302 pg·mL-1)水平降低；5岁女孩睾酮(污染地区19 pg·mL-1vs非污染地区84 pg·mL-1)、双氢睾酮(污染地区0.7 pg·mL-1 vs非污染地区1.9 pg·mL-1)、脱氢表雄酮(污染地区291 pg·mL-1vs非污染地区397 pg·mL-1)、孕酮(污染地区75 pg·mL-1vs非污染地区291 pg·mL-1)和17α-羟孕酮(污染地区248 pg·mL-1vs非污染地区368 pg·mL-1)水平降低.

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