环境科学学报  2017, Vol. 37 Issue (9): 3335-3341
引用本文
褚其英, 金小君, 叶杰旭, 等. 2017. 高效降解1, 4-二烷的固态菌剂制备及其性能研究[J]. 环境科学学报, 37(9): 3335-3341.
Chu Q Y, Jin X J, Ye J X, et al. 2017. Preparation and characterization of a solid composite microbial inoculant for 1, 4-dioxane biodegradation[J]. Acta Scientiae Circumstantiae, 37(9): 3335-3341.
高效降解1, 4-二烷的固态菌剂制备及其性能研究    [PDF全文]
褚其英 , 金小君 , 叶杰旭 , 陈建孟 , 陈东之     
浙江工业大学环境学院, 浙江省工业污染微生物控制技术重点实验室, 杭州 310032
收稿日期: 2017-02-13; 修回日期: 2017-03-21; 录用日期: 2017-03-21
基金项目: 国家自然科学基金（No.21477116）；浙江省自然科学基金（No.LY17E080019）
作者简介: 褚其英(1992—), 女, E-mail：cqy@zjut.edu.cn
通讯作者（责任作者）: 陈东之, E-mail：cdz@zjut.edu.cn
摘要: 1，4-二烷污染的生物修复效果很大程度上取决于其降解菌的活性和数量.本研究在前期获得1，4-二烷高效降解菌Xanthobacter flavus DT8的基础上，研究了该菌的扩大培养方法，并制备了易于贮藏和运输的固态菌剂，考察了菌剂的性能.实验结果表明，菌株X. flavus DT8可在富营养培养基中培养，较优的培养基配方为：Na2HPO4·12H2O 1.0 g·L-1，NH4Cl 1.0 g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2 g·L-1，酵母粉5.0 g·L-1，蛋白胨1.0 g·L-1，丙酮酸钠1.0 g·L-1，pH 7.0~7.2.X. flavus DT8经发酵罐中扩大培养后，以草炭、硅藻土为载体，经进一步固态发酵制备了固态菌剂，微生物含量为2.17×1011 CFU·g-1，对1，4-二烷的降解效果明显优于活菌液.该菌剂具有良好的贮藏稳定性，4℃保藏90 d后对100 mg·L-1的1，4-二烷48 h内去除率为63%；同时具有良好的底物广谱性，对醇类、苯系物和醚类物质也有很好的降解能力.
关键词: 1, 4-二烷     Xanthobacter flavus DT8     降解性能     菌剂     贮藏    
Preparation and characterization of a solid composite microbial inoculant for 1, 4-dioxane biodegradation
CHU Qiying, JIN Xiaojun, YE Jiexu, CHEN Jianmeng, CHEN Dongzhi    
College of Environment, Zhejiang University of Technology, Key Laboratory of Microbial Technology for Industrial Polltuion Control of Zhejiang Province, Hangzhou 310032
Received 13 February 2017; received in revised from 21 March 2017; accepted 21 March 2017
Supported by the National Natural Science Foundation of China (No.21477116) and the Natural Science Foundation of Zhejiang Province (No. LY17E080019)
Biography: CHU Qiying(1992—), female, E-mail:cqy@zjut.edu.cn
*Corresponding author: CHEN Dongzhi, E-mail: cdz@zjut.edu.cn
Abstract: The efficiency of 1, 4-dioxane bioremediation largely depends on the activity and number of its degrader. In this study, the method of enriching the efficient 1, 4-dioxane-degrading bacterium, Xanthobacter flavus DT8, was investigated. A solid composite microbial inoculant was prepared based on the 1, 4-dioxane degradation performance. Results indicated that X. flavus DT8 could be enriched in nutrient culture medium, with optimal components as follows:Na2HPO4·12H2O 1.0 g·L-1; NH4Cl 1.0 g·L-1; MgSO4·7H2O 0.2 g·L-1; yeast extract 5.0 g·L-1; tryptone 1.0 g·L-1; sodium pyruvate 1.0 g·L-1; pH 7.0~7.2. After cultivation in a fermenter, the solid-state fermentation of X. flavus DT8 was carried out to prepare the solid composite microbial inoculant by adding peat and diatomite as carriers. The biomass concentration of this solid inoculant was 2.17×1011 CFU·g-1. After stored at 4℃ for 90 d, the microbial inoculant could remove 63% of 1, 4-dioxane within 48 h when the initial substrate concentration was 100 mg·L-1, showing a highly desirable storage stability. It also exhibited excellent degradation ability to alcohols, BTEX and other ethers.
Key words: 1, 4-dioxane     Xanthobacter flavus DT8     biodegradability     microbial inoculant     storage    
1 引言(Introduction)

1, 4-二烷是一种水溶性大的环醚, 被广泛应用于有机化学产品的生产过程, 如染料、树脂和塑料等；也存在于日用品中, 如洗发水、洗涤剂和化妆品等(Wang et al., 2015).Sei等(2013)报道指出美国地下水中的二烷含量曾高达220 mg·L-1, 日本工业废水和垃圾填埋场渗滤液中的二烷分别达到4020和2020 μg·L-1.随着1, 4-二烷在化工领域应用机会的增多、用量的增加, 其对水体生态系统和人类健康构成了巨大威胁(Choi et al., 2015).动物实验则表明, 1, 4-二烷可导致肾衰竭和肝损伤, 甚至对肝脏有致癌活性(Stickney et al., 2003; Zenker et al., 2003).另有数据显示, 当1, 4-二烷在水中的浓度达到0.3 mg·L-1时, 终身癌症的风险达到万分之一(Epa, 2012).因此, 美国环保署(U.S. EPA)和国际癌症研究机构(IARC)先后将1, 4-二烷列为可能的人类致癌物(Stickney et al., 2003).

常见的1, 4-二烷废水处理方法主要有：吸附法(Johns et al., 1998)、高级氧化法(Son et al., 2009)和生物法(Inoue et al., 2016)等.吸附法、高级氧化法虽能有效去除二烷, 但运行费用高且容易产生二次污染；生物处理法具有投资少、环保和无二次污染等优点, 因而受到越来越多研究者的关注.然而, 二烷属于“异生型”化合物, 生物阻抗性较强, 迄今已报道的降解菌仅有几株(Inoue et al., 2016; Mahendra et al., 2006; Nakamiya et al., 2005; Parales et al., 1994; Sei et al., 2013).本课题组之前筛选了一株1, 4-二烷高效降解菌X. flavus DT8, 可以将污染物矿化为CO2和H2O(金小君等, 2012).此外, 该菌株还能降解四氢呋喃和1, 3-二烷, 在环醚类污染物的生物修复中具有重要作用.尽管如此, X. flavus DT8的大规模应用还存在以下瓶颈：① 大规模培养较难, 前期培养菌体均以1, 4-二烷为唯一碳源生长, 所获得的菌体量较少；② 保藏条件要求较高(低温), 降解活性在实际运输和贮藏过程中容易丧失.

本研究探索了X. flavus DT8的扩大培养方法, 制备了固态菌剂, 考察了菌剂的贮藏稳定性和降解性能, 为生物法降解含1, 4-二烷废水的工程应用提供了技术支撑.

2 材料与方法(Materials and methods) 2.1 培养基

无机盐培养基(BSM)：Na2HPO4·12H2O 4.50 g·L-1；KH2PO4 1.00 g·L-1；NH4Cl 1.50 g·L-1；MgSO4·7H2O 0.20 g·L-1；CaCl2 0.023 g·L-1；微量元素母液(金小君等, 2012)1 mL·L-1；溶剂为水, pH 7.0~7.2.

R2A液体培养基：酵母粉0.50 g·L-1；胰蛋白胨0.50 g·L-1；酪蛋白酸水解物0.50 g·L-1；葡萄糖0.50 g·L-1；可溶性淀粉0.50 g·L-1；丙酮酸钠0.30 g·L-1；KH2PO4 0.45 g·L-1；MgSO4 0.05 g·L-1；溶剂为水, pH 7.2.

基础培养基: Na2HPO4·12H2O 1.0 g·L-1；NH4Cl 1.0 g·L-1；MgSO4·7H2O 0.2 g·L-1；pH 7.0~7.2.

2.2 菌种来源

降解菌株来源于本实验室分离和保藏的1, 4-二烷降解菌X. flavus DT8 (CCTCC NO：M 2010225), 其能高效降解1, 4-二烷(金小君等, 2012).

2.3 X. flavus DT8富集培养基的选择

为快速获得较高浓度的菌体细胞, 选择多种细胞可利用碳源优化细胞富集培养基.根据菌株X. flavus DT8对碳源的利用情况, 分别选择丙酮酸钠、柠檬酸和谷氨酸钠作为单一碳源, 并选择常见的酵母粉和蛋白胨作为复合碳源.将上述碳源分别加入到基础培养基中, 培养基的优化步骤如图 1所示, 共获得12种优化培养基(优培).

图 1 培养基的优化 Fig. 1 Optimization of culture medium

接种X. flavus DT8菌悬液(OD600为0.01) 到不同培养基中, 30 ℃摇床160 r·min-1培养24 h和48 h, 检测菌体生长浓度(以OD600计).用上述各优培菌体进行1, 4-二烷降解性能研究, 1, 4-二烷的初始浓度为300 mg·L-1时, 接种的初始菌体浓度仍为0.01(以OD600计).

初步碳源确定后, 研究不同浓度的丙酮酸钠对细胞生长的影响.丙酮酸钠浓度分别为0、0.5、1.0、2.0和5.0 g·L-1, 其它培养基成分固定不变为：Na2HPO4·12H2O 1.0 g·L-1；NH4Cl 1.0 g·L-1；MgSO4·7H2O 0.2 g·L-1；酵母粉5.0 g；蛋白胨1.0 g；pH调至7.0~7.2.观察细胞生长及菌体浓度.

2.4 固、液态菌剂制备

采用优化获得的最优培养基进行扩大化培养菌株X. flavus DT8.首先, 从斜面接种菌株至灭菌的含50 mL的最优培养基中培养12 h至对数生长期作为一级种子液；然后转接一级种子液至灭菌的含100 mL的最优培养基中培养24 h作为二级种子液；最后将二级种子液接种至灭过菌的含3.5 L培养基的发酵罐中, 发酵培养48 h.

收集上述菌体细胞用于菌剂的制备.液态菌剂的制备过程为：将含X. flavus DT8菌的细胞发酵液经过离心浓缩菌体后用BSM培养基重悬浮, 得到的菌悬液即是液态菌液；固态菌剂的制备过程如图 2所示.首先草炭(有机质含量64%, 矿质25%, pH值5.6, 颗粒细度60目)和硅藻土(SiO2含量大于90%, 松散密度0.6 g·cm-3, 颗粒细度150目)按质量比9:1混合后加5%的CaCO3中和草炭酸度, 后以质量比1:2的比例加入蒸馏水, 混合均匀即为菌剂载体, 灭菌备用；将与液态菌剂等浓度的10 mL细胞加入到灭过菌的10 g·瓶-1菌剂载体容器中, 再加入10 mL最优培养基作为营养液, 搅拌混匀后30 ℃发酵48 h, 置于30 ℃恒温干燥, 即获得固态菌剂.

图 2 微生物菌剂制备示意图 Fig. 2 Preparation of microbial agent
2.5 菌剂降解性能考察

分别取50 μL液态菌剂和0.13 g的固态菌剂接种于50 mL的BSM培养液中, 并以X. flavus DT8的活菌液(OD600为0.01) 作为对照, 测定它们对于1, 4-二烷的降解效果, 底物初始浓度为100 mg·L-1.密封后置于30 ℃摇床160 r·min-1培养, 定时取样, 检测底物浓度.

2.6 菌剂贮藏稳定性能考察

将制备获得的液态菌剂和固态菌剂在室温(25±5) ℃和4 ℃的冰箱中保存, 分别测试放置0、10、30、60和90 d的菌剂的降解活性.取50 μL液态菌剂或者0.13 g固态菌剂加入到50 mL BSM培养基中培养, 加入底物1, 4-二烷浓度为100 mg·L-1, 检测培养48 h时底物降解情况, 考察菌剂的贮藏稳定性.

2.7 固态菌剂对不同有机污染物的降解能力

向50 mL已灭菌的BSM培养基中加入0.13 g固态菌剂, 分别加入甲醇、乙二醇、苯、甲苯、1, 3-二烷、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、环己烷、正己烷、乙醛、二氯甲烷、三氯甲烷等工业中常见的有机污染物作为唯一碳源, 各底物初始浓度均为100 mg·L-1, 同时设置不加固态菌剂的空白对照, 密封后置于160 r·min-1、30 ℃的摇床中培养.定时取样, 检测底物浓度和菌体浓度.

上述菌剂性能实验均设置3个平行样.

醚类物质、卤化物及苯系物的测定：采用Agilent 6890气相色谱仪(Agilent, 美国)定量分析气相中醚类物质、卤化物及苯系物的浓度.色谱柱为HP-Innowax硅胶毛细管柱(30 m × 0.32 mm × 0.5 μm).气相色谱条件：进样口、检测器温度(FID)和柱温分别为200、90和250 ℃, 柱流量为1 mL·min-1, 分流比为5:1, 进样体积为400 μL.

高沸点有机物采用HPLC分析, 取1 mL培养液至离心管中, 经12000 r·min-1离心10 min后取上清液, 用于HPLC检测.采用C18柱, 规格为4.6 mm× 250 mm, 柱温25 ℃, 检测波长UV为210 nm, 进样量20 μL, 流动相为磷酸二氢钾和乙腈, 体积比为95:5, 流速0.5 mL·min-1.采用外标法建立各检测的浓度与液相峰面积的关系图.

菌体浓度的测定：采用日立U-2910双光束光度计(Hitachi High Technologies, Tokyo, Japan), 于600 nm波长下测定菌体的吸光度(OD600), 并根据细胞干重OD600的关系式y=381.4x+0.549(x为吸光度, y为细胞干重), 将其转换为细胞干重(mg·L-1).

3 结果与讨论(Results and discussion) 3.1 菌株X. flavus DT8的培养策略

由于菌株X. flavus DT8无需诱导就能直接降解1, 4-二烷, 为了实现其扩大化培养, 研究培养基成分对其细胞生长速率的影响.在之前的研究中, 已经发现含有丰富蛋白质、维生素、多糖和矿物质等元素的酵母粉对菌株X. flavus DT8的生长及降解1, 4-二烷有促进作用(金小君等, 2012).而富含有机氮化合物的蛋白胨中的氮可能成为构成微生物细胞蛋白质和核酸的重要元素, 对细胞的生长起着重要作用(李俊霞等, 2009).丙酮酸钠、柠檬酸和谷氨酸钠是3种能够被菌株X. flavus DT8利用的碳源, 可能对细胞生长也有一定的促进作用.因此, 选择图 1所示的12种优化培养基进行细胞培养, 比较不同预培养条件下细胞对1, 4-二烷的性能.

观察不同优化培养下, 24和48 h后的生物量变化, 结果如表 2所示.分别以谷氨酸钠和柠檬酸钠为碳源的优培9和11, 菌株X. flavus DT8培养48 h后的生物量不增反而减少了, 说明菌株X. flavus DT8对谷氨酸钠和柠檬酸钠的利用率低, 两者均不适合用于X. flavus DT8细胞的富集培养.而对比优培1和3, 发现在短期内酵母粉更易于被菌株X. flavus DT8利用, 从而促进X. flavus DT8细胞的生长.对比优培6和8, 可见丙酮酸钠的加入大大提高了细胞的生长速率.同时发现12种优化培养基中只有优培1和优培8中的菌体生长能力优于R2A培养基, 且两培养基预培养的菌体对1, 4-二烷的降解性能较R2A预培养的菌体有一定优势.其中生长能力最好的为优培8, 经过24 h菌体OD600能达到0.753, 对1, 4-二烷的比降解速率为0.038 h-1左右.这可能是由于外加的丙酮酸钠不仅为细胞生长提供碳源, 还可作为电子供体加速基质代谢脱氢酶的释放(万金泉等, 2013), 从而促进X. flavus DT8对有机物的利用能力.

表 1 菌株X. flavus DT8在不同培养基中的生长情况 Table 1 The growth of cells on different medium

表 2 丙酮酸钠含量对细胞生长的影响 Table 2 Effects of different concentration of sodium pyruvate on cell growth

显然, 丙酮酸钠的添加对菌株X. flavus DT8的生长和降解底物性能均有促进作用, 因此, 研究不同浓度的丙酮酸钠对细胞菌体生长的影响.在其他培养基成分固定的情况下, 提高培养基中丙酮酸钠的含量, 结果如表 2所示.培养48 h后, 各培养基中细胞浓度均呈上升趋势, 但就丙酮酸钠的利用率而言, 丙酮酸钠浓度为1 g·L-1时的利用率最高, 每g丙酮酸钠可对应获得169.891 g生物量.此时, 该培养基获得的细胞浓度较R2A培养基提高约3倍,

OD600可达到1.383.因此, 得到较适宜细胞生长的最优培养基配方为：Na2HPO4·12H2O 1.0 g·L-1；NH4Cl 1.0 g·L-1；MgSO4·7H2O 0.2 g·L-1；酵母粉5.0 g·L-1；蛋白胨1.0 g·L-1；丙酮酸钠1.0 g·L-1；pH 7.0~7.2.

用优化获得的最优培养基于发酵罐中扩大化培养菌株X. flavus DT8, 结果如图 3所示.经过短暂的停滞期后, X. flavus DT8细胞迅速进入对数生长期, 细胞个数以指数增长, 经过36 h后进入稳定期, 此时获得菌体生物量最大, 约为1.67(OD600).收集该时刻的菌体离心浓缩, 用BSM培养基重新悬浮制备成菌悬液, 得到的生物量OD600约为10, 即为液态菌剂, 菌剂中含有细胞数5.47×1014 CFU·L-1.固态菌剂如图 4所示, 由混合均匀的草炭-硅藻土载体和离心浓缩菌体于30 ℃发酵48 h, 30 ℃恒温干燥获得, 菌剂中含有细胞数2.17×1011 CFU·g-1.

图 3 发酵罐中细胞浓度的变化 Fig. 3 The change of cell concentration in the fermentation tank

图 4 X. flavus DT8固态菌剂 Fig. 4 A solid microbial inoculant of strain X. flavus DT8
3.3 菌剂降解性能考察

对制备获得的菌剂进行降解效果测试, 结果如图 5所示.培养24 h时, 活菌液组对1, 4-二烷的去除率仅为10%, 液态菌剂对1, 4-二烷的去除率达到77%, 而固体菌剂能够在18 h内将100 mg·L-1的1, 4-二烷去除.结果显示, 固态菌剂和液态菌剂体现出比活菌液更优的1, 4-二烷降解性能.该结果可能与固、液态菌剂中含有外加有机物有关, 因为菌株X. flavus DT8降解1, 4-二烷的酶属于组合型酶(Cheng et al., 2016).很多菌株纯培养的研究也发现, 外加C、N源能够促进菌株对有机污染物的降解能力(Fakhruddin et al., 2007; 孙凯等, 2014).Hatzinger等(2001)发现的一株黄色噬氢菌(Hydrogenophaga flava ENV735), 在外加酵母粉条件下, 能够促进其对甲基叔丁基醚的降解能力.可见, 本研究制备获得的以菌株X. flavus DT8为主固态菌剂对1, 4-二烷的去除有明显的促进效果.

图 5 菌剂与活菌液降解性能的比较 Fig. 5 Degradation performance between agent and suspension
3.4 菌剂贮藏稳定性考察

菌剂性能, 特别是贮藏稳定性直接关系到菌剂的使用、储存及运输, 对于菌剂在实际中的推广使用至关重要(叶峰等, 2009).图 6考察了不同贮藏时间和温度条件下, 菌剂对1, 4-二烷的降解性能.常温贮藏30 d时, 液态菌剂对1, 4-二烷的去除率迅速下降到10%.而固态菌剂在常温下贮藏10、30、60和90 d时, 48 h内其对1, 4-二烷的去除率分别为100%、92%、68%、32%, 也是随着贮藏时间的延长降解性能变差, 但降解性能维持效果较液态菌剂好.4 ℃贮藏90 d时, 无论是液态菌剂还是固态菌剂其对底物去除率同比常温贮藏均有提高, 分别提高到21%、63%.

图 6 菌剂的贮藏稳定性 Fig. 6 The storage activity of microbial agent

结果表明以菌株X. flavus DT8为主体的菌剂更适合在4 ℃贮藏.常温贮藏时, 由于液态菌剂中的碳源含量少, 菌株内源呼吸造成生物量减少(Chesbro et al., 1990; Lopez et al., 2006), 导致其降解性能随着贮藏时间的延长迅速下降.而固态菌剂的贮藏性能稳定性比液态菌剂好, 这应该与草炭-硅藻土载体有关.草碳-硅藻土载体的存在可以为微生物生长提供空间, 同时也可以为其提供营养物质.关于菌剂适宜的贮藏时间和贮藏温度, 不同报道的结果各不相同(Cheng et al., 2016; Wang et al., 2014; 叶峰等, 2009; 朱勤勤等, 2016), 这可能与菌剂中碳源含量、底物性质、菌剂微生物自身性质等因素有关(贺金梅等, 2012).总的来说, 本研究制备的固态菌剂在4 ℃条件下贮藏90 d内仍能维持较高的活性, 有进一步研究的价值.

3.5 固态菌剂底物广谱性分析

工业产生的三废中往往含有许多污染物, 而筛选得到的菌株对底物具有较强的专一性, 使得生物法处理废气或废水受到巨大的限制.因此筛选能同时降解多种有机物的优良菌株已成为目前发展的主要趋势, 若此类菌株被制备成菌剂后, 上述性能不变或有所强化, 则将为其工业化应用带来巨大的优势.表 3考察了制备的固态菌剂对环境中常见的有机污染物降解能力.

表 3 固态菌剂的底物广谱性

由表 3可见, 固态菌剂不仅能迅速降解甲醇、乙二醇等小分子有机醇, 而且能够很好的代谢乙醛、苯及多数环醚类物质, 甚至能不同程度地代谢甲苯、正己烷等碳氢化合物, 具有良好的底物广谱性.微生物对有机污染物的降解能力一般取决于有机物污染物的分子结构及其失电子或得电子的能力(Raymond et al., 2001).由于乙醛、苯、甲苯、乙苯、正己烷、环己烷、醚类物质中或含有醚键或呈环, 与1, 4-二烷结构类似, 以菌株X. flavus DT8为主的固态菌剂中含有降解此类物质的相关酶系, 因而能够不同程度地降解这些物质.对于二氯甲烷、三氯甲烷等卤代烃, 固态菌剂无法将其代谢, 这可能与这类物质对称的结构、氯代程度过高有关, 使得这些物质不易被生物降解.为了应对此类污染物, 可以尝试做复合菌剂, 即用菌体X. flavus DT8和卤代烃降解菌复合构建菌剂, 但是由于复合菌剂组分复杂多样, 其更容易受到群体结构和环境的影响而导致保质期和作用效果变化(文娅等, 2011), 所以对于复合菌剂的研究需要深入探究其作用机理.当1, 4-二烷与上述可降解性底物共存时, 不同物质对1, 4-二烷降解速率有不同程度的影响, 但1, 4-二烷最终均可实现降解(数据略).如在四氢呋喃共存情况下, 固态菌剂对1, 4-二烷的降解速率更高；1, 3-二烷并不影响菌剂对1, 4-二烷的降解；正己烷存在时1, 4-二烷的降解延滞期稍有延长.多底物共存情况下1, 4-二烷的生物降解是一个复杂的过程, 酶促反应动力学会因为共存物的添加而发生变化(戚以政等, 2001), 但是这对于实际污染物的处理具有重要意义.共存污染物可能为微生物的代谢提供能量, 从而促进目标污染物的降解, 也可能与目标污染物共同竞争有限的酶活性中心, 从而产生一定的抑制作用.相关的促进或抑制机理, 有待我们进一步深入研究与分析.

4 结论(Conclusions)

1) 适合菌株X. flavus DT8扩大化培养的培养基配方为：Na2HPO4·12H2O 1.0 g·L-1；NH4Cl 1.0 g·L-1；MgSO4·7H2O 0.2 g·L-1；酵母粉5.0 g·L-1；蛋白胨1.0 g·L-1；丙酮酸钠1.0 g·L-1；pH 7.0~7.2.

2) 发酵浓缩获得的液态菌剂和以草炭-硅藻土为载体制备的固态菌剂对1, 4-二烷具有良好的降解性能, 其降解效果：固态菌剂 > 液态菌剂 > 活菌液.

3) 菌剂在4 ℃下贮藏效果优于常温贮藏, 且固态菌剂对1, 4-二烷的降解效果明显优于液态菌剂.固态菌剂具有更好的贮藏稳定性, 其在贮藏10、30、60和90 d后能在48 h内对初始浓度为100 mg·L-1的1, 4-二烷的去除率到达100%、97%、89%和63%.

4) 以菌株X. flavus DT8为主体制备获得的固态菌剂能够降解醇类、苯系物、醚类等常见的有机污染物, 具有良好的底物广谱性.

参考文献
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