病理切片的质量控制是病理科质量管理工作的重要组成部分^[1-3]，病理切片质量会直接影响病理科医师诊断疾病的准确性^[4]，进而影响临床医师的诊断和治疗。常规制片步骤非常复杂和烦琐，石蜡切片步骤是常规制片的关键环节之一。切片石蜡的熔点为58~60 ℃，石蜡在常温时的硬度不够，不利于切片，需稍加冷冻使石蜡和组织硬度适当增加后才能用于制片。许多病理科室在切片过程中采用自行制作的冰块或冷冻台冷冻蜡块。我们在实践过程中发现，用自制冰块或冷冻台冷冻的蜡块切片效果不太理想，因此我们根据常规石蜡切片的特点研制了一种石蜡切片的降温组件(专利号：ZL201320584259.6)^[5]，现对应用该降温组件进行石蜡切片的切片质量、切片时效性及成本投入等作一介绍。

1 材料和方法 1.1 材料

收集我院病理科接收的各类临床组织标本，将其制作成蜡块后随机选取100个蜡块(包括胃镜小标本、宫内物、子宫肌瘤、宫颈组织、乳腺组织、脂肪组织、淋巴结等)。由病理科技术人员先将这100个蜡块进行粗修备用。

1.2 仪器与设备

PELORISⅡ快速脱水机、EG1150C组织包埋机、RM2245切片机(德国Leica公司)，摊烤片一体机(孝感市亚光医用电子技术有限公司)，自动染色机(日本樱花株式会社)，一次性切片刀，科室自制冰块(图 1A)和冷冻台(图 1B)。石蜡切片降温组件(图 1C)：由①、②两件组成，①件为不锈钢正方体，长1.5~2.5 cm，上接一金属把手，把手外套一塑料套以防止操作者的体温经手传给①件；②件为不锈钢方形盘，长30 cm、宽20 cm、高5 cm。事先用②件装4 cm深的水后速冻成冰。

1.3 主要试剂

10%中性甲醛、乙醇、二甲苯、石蜡、Harris苏木精、盐酸乙醇、伊红。

1.4 常规制片流程

取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→捞片→贴片→烤片→染色→封片→贴标签^[6]。

1.5 切片制作方法

甲组：技术人员先从冰箱速冻柜中取出冷冻好的大冰块和小冰块，再将粗修好的100个蜡块和小冰块置于大冰块上，然后开始切片。在切片过程中，蜡块与刀片摩擦时会发热，使蜡片皱缩而难以成功展片，因此技术人员需要手持自制小冰块来冷冻蜡块，然后再继续切片。100个蜡块全部切完后，将蜡块置于常温中备用。切片、烤片结束后放入自动染色机，选择预先设置好的程序进行H-E染色。

乙组：技术人员将切完甲组切片的100个蜡块置于预先开机的冷冻台上开始切片，在切片过程中蜡块与刀片摩擦发热难以展片时，将蜡块从切片机上卸下，重新放在冷冻台上冷却后再继续切片。100个蜡块全切完后将蜡块置于常温中备用。切片染色方法与甲组相同。

丙组：技术人员先从冰箱速冻柜中取出石蜡切片降温组件中的②件，将切完乙组切片的100个蜡块与降温组件的①件放置于②件的冰面上降温，然后开始切片。在切片过程中，蜡块与刀片摩擦发热时技术人员手持①件把手，以①件的底平面接触蜡块组织面，待蜡块降温后再继续切片。给一块蜡块降温后将①件重新放回②件的冰面上，即可再给下一块蜡块降温。切片染色方法与甲组相同。

1.6 切片质量评估

切片厚薄均匀、无皱褶、无裂隙则各记10分。若切片中厚薄不均匀、有皱褶或有裂隙的组织面积占总面积的N%，则该切片相应指标得分为(10－N/10)分，如：某切片中组织厚薄不均匀的面积占20%，则该切片厚薄均匀指标得分为(10－20/10)分，即8分。由2名质量控制师进行双盲评片，结果以x±s表示。

1.7 切片时效性评估

切片时间均从第1个蜡块启动切片时开始计时，待第100个蜡块切片完成时计时结束，进行10组测试，结果以x±s表示。

1.8 成本投入

计算自制冰块、冷冻台及降温组件的各自成本，均按6年折算成本。

1.9 统计学处理

应用SPSS 19.0软件进行数据处理。对甲、乙、丙3组的切片质量及切片时效性分别进行比较，3组间的比较采用单因素方差分析，任意两组间的比较采用t检验。检验水准(α)为0.05。

2 结果 2.1 3组切片质量比较

甲组切片厚薄均匀、无裂隙、有皱褶(图 2A)；乙组切片厚薄不均、无裂隙、有皱褶(图 2B)；丙组切片厚薄均匀、无裂隙、无皱褶(图 2C)。不同冷冻蜡块方法所制的切片在厚薄均匀、无皱褶、无裂隙这3项评价指标方面的得分情况见表 1。甲组、丙组的切片厚薄均匀、无皱褶、无裂隙得分均高于乙组，差异均有统计学意义(t＝13.86、15.17，13.77、20.68，15.73、15.84；P均＜0.01)；甲组切片无皱褶得分低于丙组，差异有统计学意义(t＝2.917，P＜0.01)，而两组切片厚薄均匀、无裂隙得分差异均无统计学意义(P均＞0.05)。

2.2 3组切片时效性比较

甲组[(65.30±1.44)min]、丙组[(62.50±2.17)min]每切100个蜡块的平均耗时均短于乙组[(79.80±1.95)min]，差异均有统计学意义(t＝5.977、5.930，P均＜0.01)；而甲组与丙组平均耗时的差异无统计学意义(t＝1.007，P＞0.05)。

2.3 3组成本投入比较

设备按6年折旧，乙组每台冷冻台的成本约为7 000元；甲组自制冰块6年的总成本约为3 500元(1台冰箱、1个不锈钢盘及盛放的水)；丙组石蜡切片降温组件的成本与甲组的成本相当，但少于乙组。

3 讨论

组织石蜡切片是进行常规组织病理学形态观察和疾病诊断的基础，是取得准确科研结果的先决条件^[7]。一张质量好的切片可以全面观察组织的病理变化，并提供准确、可靠的诊断依据和研究结论。

病理石蜡切片技术是病理科最基本、最重要的技术^[8]，对诊断患者病情有重要意义^[9]。切片质量至关重要，下一步的检查项目如免疫组织化学染色、特殊染色、原位杂交等均需要一张厚薄均匀、无裂隙、无皱褶的优质切片。只有把好切片质量关，才会不影响其他检查的结果，从而为病理医师的精准诊断提供保障^[10]。

在切片过程中，蜡块与刀片摩擦时会发热，使蜡片皱缩而难以成功展片。甲组技术人员需要手持自制小冰块来冷冻蜡块，然后再继续切片，在此过程中冰块容易受热融化变形，手拿不方便，且不能全面、简便、有效、反复为蜡块降温。乙组技术人员将蜡块从切片机上取下，重新放在冷冻台上冷却后再切片，这样反复操作不仅耗时，而且放在冷冻台上的组织又太干，切片易呈粉末状，冷冻效果不佳，影响切片质量和速度，进而影响出片时间。丙组技术人员则手持石蜡切片降温组件中①件把手，以①件的底平面接触蜡块组织面，即可迅速、有效地给蜡块降温，有利于切出理想的石蜡切片。给一块蜡块降温后将①件重新放回②件的冰面上，即可再给下一块蜡块降温。①件是不锈钢块，不会融化变形，操作方便，且能反复使用，表面平整，能全面、有效地达到为整个蜡块降温的目的。

甲组和丙组制作的切片在质量上，如厚薄均匀、无裂隙、无皱褶3个指标方面均优于乙组；甲组和丙组切片耗时短于乙组，资金投入也少于乙组。一般规模较大医院病理科的标本数量多，病理科医师所取的蜡块也相应增多，病理技术人员利用石蜡切片降温组件可以提高工作效率，减少不必要的重复动作，从而可以更快地完成石蜡切片的制作，且制得的切片质量好，为后续工作提供了保障。

为了制备一张高质量的合格切片，在切片过程中我们还需要注意以下几点：(1)在切片前应将切片机的各个部件固定好，防止刀座等松动使切片出现颤痕。(2)在切片过程中如果切片有明显刀痕应及时更换一次性刀片，否则会影响切片质量。(3)展片的水温不能太高，特别是含脂肪多的组织，一般水温控制在45~48 ℃，以防切片散开。(4)捞片后的切片不能立即放到烤片机上烤片，应该等水分沥干后再烤片，特别是穿刺组织及胃镜取材组织等小标本，因为未沥干水分烤片会使组织顺着水流的方向移动，使原有组织的形状发生改变。(5)切完切片后应及时将切片机清理干净，做好保养及维护，并定期校验^[11]，以确保切片机的性能稳定。

综上所述，在病理常规石蜡切片过程中，应用石蜡切片降温组件对蜡块进行冷却后切片，有切片质量好、效率高、操作简便等优点，值得推荐。