瑞舒伐他汀钙(rosuvastain calcium,RSC)为新一代3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A (HMG-CoA)还原酶抑制剂，被称为“超级他汀”，具有强大的降低总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇能力，能很好地降低总三酰甘油水平，还能较好地升高高密度脂蛋白胆固醇，临床上用于高脂血症和高胆固醇血症的治疗^[1]。本研究通过制剂处方和工艺的筛选，考察处方工艺对颗粒性质、压片特性和溶出度的影响，以期获得重现性好、批次稳定的处方和工艺。

MiNi PRESS-11SF智能感应压片机(RIMEK，印度Karnavati公司)；PMA-1 制粒机(GEA,德国)；Glatte 沸腾制粒机(Glatte,德国)；LB-2D型智能崩解时限测定仪(上海黄海药检仪器厂)；TBH-420300 TD型硬度测定仪(德国Erweka公司)；TAR200型脆碎度测定仪(德国Erweka公司)；TD2堆密度仪(瑞士Sotex公司)；AT7 smart型溶出仪(瑞士Sotex公司)；MA45型水份测定仪(德国Sartorius)；Agilent 1100型高效液相色谱仪(惠普公司)；WQS振动筛(上海精密科学仪器有限公司)。

RSC原料(上海信谊药厂，含量99.4%)；RSC标准品及异构体(上海信谊药厂)；Crestor (批号FP557，阿斯利康公司)；乳糖(新西兰乳糖公司)；交联聚维酮(PVPP-XL，湖州展望药业有限公司)；无水乳糖(Cellactose 80，美国KERRY)；淀粉(湖州展望化学药业有限公司)；淀粉1500 (卡乐康公司)；硬脂酸镁(MS，山东聊城阿华制药公司)；微晶纤维素 (MCC PH-112，日本旭化成株式会社)；欧巴代Ⅱ溶液(卡乐康公司)；乙腈等试剂为色谱纯。

取供试品10片，研细后用水转移至500 mL容量瓶中，超声并加水稀释至刻度，12 000×g离心5 min，取上清液作为供试品溶液；精密量取1 mL，用水稀释至100 mL，作为对照溶液。照有关物质检查的色谱条件，取对照溶液50 mL注入HPLC，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高为满量程的20%；再取供试品溶液50 mL注入HPLC，记录色谱图，若供试品溶液的色谱图上显杂质峰，量取各杂质峰的峰面积之和，与对照溶液主峰面积相比较不得超过1.5%。有关物质测定色谱条件如下，色谱柱：Agilent Hypersil C₁₈ (250 mm×4.6 mm,5 μm,Agilent公司)；流动相：20 mmol/L乙酸铵缓冲液(以冰乙酸调pH 4.0)-乙腈(50∶50,v/v)；流速：1.0 mL/min；检测波长：242 nm；进样量：50 μL；柱温：30℃。RSC主峰(6.36 min)与各降解产物均分离良好，分离度大于1.5，说明该色谱条件可较好地检测出降解产物。

取供试品10片，置研钵中研细，称取细粉适量(约相当于RSC 10 mg)置50 mL 量瓶中，超声并加无水乙醇(含0.1%三氟醋酸)稀释至刻度，摇匀，12 000×g离心5 min，取上清液作为供试品溶液；另取RSC与非对映异构体(混合物)、RSC与对映异构体(混合物)适量，制成适当浓度的溶液，作为对照溶液(1)和(2)。取对照溶液(1)和(2)各10 μL分别注入高效液相色谱仪，调节流动相比例，使对照溶液中RSC与其各异构体的分离度均大于1.5，对映异构体的保留时间为RSC的0.9倍，非对映异构体的保留时间为RSC的1.1倍。供试品溶液10 μL注入HPLC，记录色谱图。供试品溶液的色谱图上如显各异构体的色谱峰，量取各异构体峰的峰面积之和，以面积归一化法计算不得超过主峰面积的0.5%。异构体检测色谱条件如下。色谱柱：Chiralpak AD-H柱 (250 mm×4.6 mm,5 μm,Daicel Chemical Industries,LTD.)；流动相：正己烷-异丙醇(含0.1 %三氟醋酸，90∶10)；流速：1.0 mL/min；检测波长：242 nm；进样量：50 μL；柱温：室温。该色谱条件确保RSC与其各异构体的分离度均大于1.5，可较好地检测异构体。

取本品，照溶出度检查法 (美国药典30/NF25第1法)^[2]，以水900 mL为溶剂，转速为50转/分，依法操作，分别于5、10、15和30 min时取溶液10 mL，以0.8 μm的微孔滤膜过滤，取续滤液高速离心5 min，移取上清液，HPLC进样，于242 nm下测定光密度，计算含量；另取RSC对照品适量，精密称定，用水溶解并制成每1 mL约含10 μg的对照品溶液，同法测定，按外标法计算出每片的溶出量。30 min溶出度不得小于85%。溶出测定的色谱条件如下。色谱柱：Agilent Hypersil C₁₈ (250 mm×4.6 mm,5 μm,Agilent公司)；流动相：20 mmol/L乙酸铵缓冲液(以冰乙酸调pH 4.0)- 乙腈(50∶50,v/v)；流速：1.0 mL/min；检测波长：242 nm；进样量：50 μL；柱温：30℃。对溶出度色谱条件进行了方法学验证，结果表明，系统精密度RSD为0.31%，日内RSD为0.24%，日间RSD为0.55%，平均回收率为99.43%，RSD为0.956%，浓度线性范围为2.0~40.0 μg/mL。

设计6个处方，从颗粒的流动性、可压性、吸湿性、药片的崩解性和溶出度等方面进行考察，处方设计见表 1。其中每个处方的RSC活性成分为10 mg，粘合剂为6%的淀粉浆(适量)，润滑剂为3 mg的硬脂酸镁，包衣液为浓度15%欧巴代Ⅱ包衣液，增重为3%。

表 1 Table 1

表 1 处方筛选对颗粒性质及压片的影响 考察项目 处方1 处方2 处方3 处方4 处方5 处方6 乳糖m/mg 75 75 75 75 75 75 微晶纤维素m/mg 45 45 90 90 90 淀粉m/mg 121 121 151 106 111 116 交联聚维酮m/mg 15 15 10 5 淀粉 1500 m/mg 90 45 休止角 (°) 31 30 30 30 28 29 可压性 m/kg 4～6 5～7 5～7 8～11 9～12 9～12 外观 光滑圆整 光滑圆整 光滑圆整 光滑圆整 光滑圆整 光滑圆整 崩解时限 t/min 10～14 8～10 3～5 2～4 3～5 6～8 吸水性 (%) 4.6 4.5 3.1 2.8 溶出度 (%) 10 min 85.39 90.03 91.48 91.25 30 min 102.47 102.57 102.65 103.17

表 1 处方筛选对颗粒性质及压片的影响

分别采用高速搅拌制粒以及沸腾床制粒两种工艺进行颗粒的制备，其工艺流程和参数见下。

高速搅拌制粒：将RSC、PVPP-XL、MCC、淀粉及乳糖分别过60目筛，置于高速搅拌制粒锅内，开动搅拌制粒刀(500转/分)，剪切刀慢档，混合5 min后，在剪切刀快档下，加入6% 淀粉浆，制软材继续搅拌10 min,取出样品，过24目整粒，60℃烘干后用20目筛整粒，加入过60目筛的硬脂酸镁混合5 min后压片、包衣即可。

沸腾床制粒：将RSC、PVPP-XL、MCC、淀粉及乳糖分别过60目筛，置于沸腾床制粒机内，启动沸腾，混合物料5 min，喷入6%淀粉浆，控制进风温度60℃，出风温度40℃，继续制粒、烘干20 min，取颗粒冷却至室温，用20目筛整粒，加入过60目筛的硬脂酸镁混合5 min后压片、包衣即可。

按照确定的处方和工艺参数，进行3批中试样品 (10万片/批) 的制备，并对产品进行质量评价。

照《中国药典》对中试样品进行影响因素考察，将样品分别在强光 (4 500 lx)、高温(60℃)、高湿(相对湿度75%)条件下放置10 d，于第5、10天分别取样检查外观，并测定标示量、溶出度、降解产物及异构体。

按《中国药典》对中试样品进行长期稳定性考察，将包装后的样品分别在常温(25℃)、相对湿度60%条件下放置2年，于第6、12和24个月分别取样检查外观，并测定标示量、溶出度、降解产物及异构体。

结果见表 1。分别以PVPP-XL和淀粉1500作崩解剂，PVPP-XL崩解效果更好，淀粉1500虽能改善崩解，但在本研究中效果不明显，因而在处方筛选时选用PVPP-XL作崩解剂；此外，随着PVPP-XL含量的增加，崩解时间减少，但颗粒吸湿性增加，故应控制用量。采用乳糖、MCC及淀粉混合物为稀释填充剂，其中MCC明显改善了颗粒的可压性，且随着MCC增加可压性增加。乳糖作为稀释填充剂，同时具有两方面的作用，一方面改善片剂的外观，增加片面的光洁度，另一方面因其溶解性好，有助崩解作用。 处方4和5产生的颗粒有较好的崩解性、流动性、可压性和溶出度，但处方4吸湿性比处方5大，因而选择处方5。

高速搅拌制粒与沸腾床制粒所得颗粒的性质以及压片效果见表 2。结果显示，沸腾床制备的颗粒，颗粒密度小，可压性稍差。而高速搅拌制粒机制备的颗粒，颗粒密度大、流动性好，压缩系数和豪森系数分别为16.02和1.16，可压性好。此外，两种方法所得的片剂引湿性和溶出度差异不大。最终工艺选择高速搅拌制粒法。

表 2 Table 2

表 2 两种制粒工艺对颗粒和片剂性质的影响 指标 高速搅拌制粒 沸腾床制粒 堆密度 ρB/(mg·mL-1) 0.462 0.357 实密度ρB/(mg·mL-1) 0.566 0.432 压缩系数(%) 16.02 26.61 豪森系数 1.16 1.266 吸水性(%) 3.2 3.5 溶出度(%) 10 min 90.03 93.48 30 min 100.33 102.65

表 2 两种制粒工艺对颗粒和片剂性质的影响

3批中试样品 (10万片/批) 的颗粒重现性、片剂参数的质量评价结果见表 3、表 4。结果表明，该工艺具有较好的重现性和耐受性，产品符合质量标准，可用于工业化生产。同时，将以上3批样品进行溶出度考察，并与进口参比制剂“Crestor”对比，结果表明，3批样品间重现性好，与“Crestor” 体外溶出行为相似，10 min 内均达到90%以上，且每批样品各片之间的溶出均一性较好(表 5)。

表 3 Table 3

表 3 三批样品颗粒参数的重现性 指标 批号：050501 批号：050502 批号：050503 粒度分布(%) ≤24目 0.13 0.18 0.06 24～80目 42.36 48.20 34.11 80～120目 27.15 25.31 37.67 ≥120目 30.43 26.90 28.78 堆密度ρB/(mg·mL-1) 0.452 0.437 0.420 实密度ρB/(mg·mL-1) 0.523 0.502 0.485 可压性(%) 15.71 14.87 15.47 豪森系数 1.16 1.15 1.15 吸水性(%) 3.0 3.3 3.1

表 3 三批样品颗粒参数的重现性

表 4 Table 4

表 4 三批样品压片参数的重现性 n=20 指标 批号：050501 批号：050502 批号：050503 片重 均值 m/g，x ±s 0.305 9±0.001 0 0.308 6±0.002 0 0.305 5±0.001 0 片重差异 (%) 0.51 1.2 0.51 厚度 均值 d/mm，x ±s 4.31±0.02 4.50±0.04 4.65±0.03 RSD (%) 0.37 0.89 0.63 硬度 均值 (F/N)，x ±s 67.40±3.37 44.30±5.12 22.20±4.37 RSD (%) 5.00 11.56 19.67 片径 均值 d/mm，x ±s 9.56±0.01 9.58±0.01 9.61±0.01 RSD (%) 0.08 0.11 0.11 脆碎度 (%) 0.018 0.034 0.29 崩解时限 2′50″～3′25″ 2′45″～3′07″ 1′40″～2′30″

表 4 三批样品压片参数的重现性

表 5 Table 5

表 5 自制样品及原研参比制剂的溶出度 %,n=6,x ±s 批号 5 min 10 min 15 min 30 min 050501 95.57±1.38 97.77±1.24 102.4±0.71 103.4±0.82 050502 95.75±1.49 98.58±0.81 101.9±1.40 103.2±1.51 050503 94.65±1.46 97.30±1.48 101.4±1.79 102.3±1.45 Crestor(参比) 92.42±1.74 95.32±0.76 99.65±1.49 101.5±1.47

表 5 自制样品及原研参比制剂的溶出度

结果见表 6。本品在强光(4 500 lx) 下，10 d后右旋体及降解产物增加，提示本品应避光保存。高湿(相对湿度75%)条件下放置10 d，吸湿性显著下降，有关物质和右旋体明显增加，药片崩解时间延长(崩解时间5～8 min)，30 min内溶出度下降。高温(60℃)条件下异构体和降解产物有所增加。综上所述，片剂对光、湿及温度均有敏感性，在生产、包装中要避免光照、潮湿及高温，故采用双铝箔包装。

表 6 Table 6

表 6 片剂影响因素实验 (%) 条件 含量 溶出度 异构体 杂质 水分 0 d 103.7 103.9 未检出 0.11 - 4 500 lx 5 d 103.0 103.0 未检出 0.13 - 4 500 lx 10 d 103.8 102.8 0.15 0.21 - 60℃ 5 d 103.2 104.0 0.01 0.22 - 60℃ 10 d 102.3 104.3 0.35 0.70 - 75% RH 5 d 102.2 102.2 0.39 0.30 2.0 75% RH 10 d 102.6 91.91 1.14 0.69 4.5

表 6 片剂影响因素实验

对包装后的中试样品进行长期稳定性考察，数据见表 7。结果显示，3批样品在24个月内，降解产物及异构体有所增加，但仍在质量标准控制范围内。说明该片剂稳定性良好。

表 7 Table 7

表 7 片剂长期稳定性考察 (%) 批号 时间t/month 含量 溶出度 异构体 杂质 050501 0 101.4 103.4 未检出 0.77 6 102.6 103.8 0.23 0.73 12 101.8 104.1 0.29 0.76 24 101.3 102.7 0.32 0.80 050502 0 101.4 103.2 未检出 0.74 6 101.1 103.5 0.28 0.71 12 100.8 103.7 0.33 0.75 24 101.4 104.2 0.34 0.80 050503 0 100.9 102.3 未检出 0.76 6 101.7 101.6 0.26 0.77 12 100.5 101.1 0.32 0.69 24 100.9 102.6 0.36 0.78

表 7 片剂长期稳定性考察

RSC是一个单对映体(3R，5S)羟酸钙盐，其原料结构中有2个手性中心，因而采用正相手性柱(以多糖衍生物为固定相)进行RSC片剂的异构体检查，对检测方法进行了方法学研究，结果表明该色谱条件满足异构体检测。此外，有关物质、含量等HPLC方法均已进行方法学验证，结果表明可用于片剂的质量检测。

本研究曾分别以900 mL水、0.1 mol/L盐酸溶液、pH 6.8磷酸盐缓冲液为溶出介质，对进口和自制样品的溶出度进行考察，结果显示：在3种介质中，进口和自制样品在15 min 内溶出度均达到90%以上；进口和自制样品在水和 pH 6.8磷酸盐缓冲液两种介质中的溶出度无差异；在酸性介质中，进口和自制样品的溶出度在30 min 内比水中溶出度均有所下降 (2.8%～5.4%)，由于RSC原料在酸中会出现降解^[3]，故不选择以酸为溶出介质，而采用水做溶出介质。

RSC微溶于水，在盐酸溶液中几乎不溶^[4]，这可能与原料的晶型有关。本原料采用无定型，在溶出介质中有好的溶出度。根据美国食品药品监督管理局颁布的溶出度比较原则^[5]：15 min内溶出度达到85%以上，属于极快速释放体系，不需要用f2因子进行计算。本品与原研制剂“Crestor”在15 min内溶出度均达90%以上，因而可认为本品与“Crestor”溶出行为一致。

3批样品重现性实验中，硬度差异有些偏大，可能是压片过程中压片机松弛，导致压片力大小不均引起，由于未影响片剂的整体质量，因而判定在合格范围之内。

影响因素实验表明，片剂受强光、高湿和高温影响，降解产物和异构体增加，提示片剂应避光、去湿，并避免高温。高湿(相对湿度90%)条件下放置5 d吸潮发生膨胀、颜色变浅，增重超过5.0%，故改为相对湿度75%条件下做高湿实验。本品选用具有避光防潮功能效果佳的欧巴代Ⅱ溶液进行包衣,并采用双铝箔包装，确保RSC片剂有效避光、去湿。

本研究进行了24个月长期稳定性实验，结果表明，所选择的处方和工艺质量稳定，有效期可达2年。