第二军医大学  2014, Vol. 35 Issue (3): 301-304   PDF    
引用本文
闫芳, 刘艳兵, 王军, 张会军, 吕瑛, 董彦博, 李小兵. 巨大房间隔缺损合并重度肺动脉高压患儿血浆偶联因子6含量升高[J]. 第二军医大学学报, 2014, 35(3): 301-304  
YAN Fang, LIU Yan-bing, WANG Jun, ZHANG Hui-jun, LÜ Ying, DONG Yan-bo, LI Xiao-bing. Plasma coupling factor 6 is increased in children with large atrial septal defect and severe pulmonary hypertension[J]. Academic Journal of Second Military Medical University, 2014, 35(3): 301-304 (in Chinese with English abstract)  
巨大房间隔缺损合并重度肺动脉高压患儿血浆偶联因子6含量升高
闫芳1, 刘艳兵2, 王军1, 张会军1, 吕瑛1, 董彦博1, 李小兵1    
1. 河北医科大学第一医院心脏外科, 石家庄 050031;
2. 石家庄市第三医院脊柱外科, 石家庄 050000
收稿日期:2013-7-14     接受日期: 2013-9-25.
作者简介：闫芳，硕士生，主治医师.E-mail：fangfangy83@sina.com
通信作者(Corresponding author)：王军 Tel:0311-85917193, E-mail:wangjunyisheng@sina.com
摘要：目的 探讨偶联因子6（CF6）在先天性心脏病巨大房间隔缺损合并不同程度肺动脉高压中的变化。方法 收集2010年1月至2012年8月160例巨大房间隔缺损患儿资料，患儿4~16（9.7±2.1）个月，体质量3.5~8.3（6.9±2.1）kg。根据合并肺动脉高压情况将160例患儿分为3组：房间隔缺损未合并肺动脉高压组41例为对照组，房间隔缺损合并肺动脉高压但未达到重度肺动脉高压组76例为A组，房间隔缺损合并重度肺动脉高压组43例为B组。应用放射免疫分析法检测不同组别患儿血浆中CF6的含量，比较组间差异，并对CF6含量与肺动脉高压程度的相关性进行分析。结果 对照组、A组和B组CF6含量分别为（198.5±43.7）、（167.7±89.8）、（304.4±80.7）pg/mL，其中B组CF6含量较对照组和A组升高，差异有统计学意义（P<0.01），而对照组与A组之间差异无统计学意义（P>0.05）。重度肺动脉高压患儿肺动脉收缩压/血压收缩压比与血浆中CF6的含量呈正相关（r=0.781，P<0.01）。结论 巨大房间隔缺损合并重度肺动脉高压患儿血浆CF6含量升高，提示其可能是重度肺动脉高压形成的重要因素之一。
关键词： 房间隔缺损     偶联因子6     肺动脉高压    
Plasma coupling factor 6 is increased in children with large atrial septal defect and severe pulmonary hypertension
YAN Fang1, LIU Yan-bing2, WANG Jun1, ZHANG Hui-jun1, LÜ Ying1, DONG Yan-bo1, LI Xiao-bing1    
1. Department of Cardiac Surgery, the First Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050031, Hebei, China;
2. Department of Spinal Surgery, the Third Hospital of Shijiazhuang, Shijiazhuang 050000, Hebei, China
Abstract: Objective To explore the changes of plasma coupling factor 6 (CF6) in children with large atrial septal defect and different degrees of pulmonary hypertension. Methods A total of 160 patients with large atrial septal defect and different degrees of pulmonary hypertension from January 2010 to August 2012 were retrospectively analyzed. The age of the patients ranged from 4 to 16 (mean 9.7±2.1) months old, and the weight ranged from 3.5 to 8.3 (mean 6.9±2.1) kg. The participants were divided into three groups: atrial septal defect without pulmonary artery hypertension (control group, n=41); atrial septal defect with pulmonary artery hypertension, but not to a severe degree (A group, n=76); and atrial septal defect with severe pulmonary artery hypertension (B group, n=43). The plasma CF6 levels were determined and compared by radioimmunoassay between different groups; the relation of CF6 levels with degree of pulmonary artery hypertension was analyzed. Results The plasma CF6 level was (198.5±43.7) pg/mL in the control group, (167.7±89.8) pg/mL in A group, and (304.4±80.7) pg/mL in B group, showing no significant difference between control group and A group (P>0.05), but with that in B group being significantly higher than those of control group and A group (P<0.01). We also found that the ratio of systolic pulmonary artery pressure to systolic blood pressure was positively correlated with plasma level of CF6 in atrial septal defect children with severe pulmonary artery hypertension (r=0.781, P<0.01). Conclusion The plasma CF6 level is obviously increased in children with large atrial septal defect and severe pulmonary artery hypertension. CF6 may be one of the reasons for severe pulmonary artery hypertension.
Key words: atrial heart septal defects     coupling factor 6     pulmonary hypertension    

偶联因子6(CF6)是三磷酸腺苷(ATP)合成酶的一个亚单位,是线粒体内重要的能量传导物质[ 1 ]。CF6除存在于各种细胞的线粒体中外,还可由血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)分泌,是目前发现的唯一内源性抑制前列环素合成的物质,具有升高血压的作用[ 2 ]。本研究通过检测巨大房间隔缺损(atrial septal defect,ASD)合并不同程度肺动脉高压患儿血浆中CF6水平,探讨CF6在巨大ASD合并重度肺动脉高压形成过程中的变化趋势及可能的病理生理意义。

1 资料和方法 1.1 临床资料

选取2010年1月至2012年8月于我院住院确诊并符合纳入标准的巨大ASD患儿160例,其中男性72例、女性88例,月龄4~16个月,平均(9.7±2.1)个月；体质量3.5~8.3 kg,平均 (6.9±2.1) kg；ASD大小(胸骨旁四腔示缺损直径)16.4~32.1 mm,平均(28.1±4.9) mm。纳入标准: (1)年龄<18个月；(2)体质量<10 kg；(3)超声心动图检查为巨大ASD；(4)窦性心律,以左向右分流为主,无并发右室流出道狭窄及肺动脉瓣狭窄；(4)排除其他先天性心脏病。所有患儿术前均行超声心动图检查、心电图、胸部X线检查,并于体外循环前直接测量肺动脉收缩压。肺动脉高压的诊断依据2007年《肺动脉高压筛查诊断与治疗专家共识》[ 3 ],即经胸心脏彩超提示肺动脉收缩压＞30 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)和(或)肺平均动脉压＞25 mmHg。根据心脏超声及体外循环前直接测压结果,肺动脉收缩压/血压收缩压比>0.75为重度肺动脉高压[ 4 ]。将160例患儿根据合并肺动脉高压情况分为3组: ASD未合并肺动脉高压者41例为对照组,ASD合并肺动脉高压但未达到重度肺动脉高压者76例为A组,ASD合并重度肺动脉高压者43例为B组。所有患者术前未出现口唇发绀,但是常合并术前肺部感染,其中18例(对照组2例,A组6例,B组10例)因肺部感染较重入住我科重症监护室(ICU),经治疗好转再行手术治疗。

1.2 血浆CF16含量测定

术前空腹采股静脉血2 mL置于加入含抑肽酶(500 IU/mL)的EDTA-K2(1 mg/mL)溶液的试管中混匀,4℃ 3 000 r/min(离心半径为15 cm)离心10 min,分离血浆,于-80℃保存待检。待测样本经酸化后,用放射免疫法测定CF16含量,具体步骤按试剂盒说明书操作。人CF6放射免疫试剂盒由美国Phoenix Pharmaceuti Cals Inc.提供,IC50为8 pg／管,敏感区为10~100 pg/管,最低可测浓度1 pg／管,批间变异系数<5％,批内变异系数<4％。CF6多克隆抗体与人CF6交叉反应分别为1％和2％,与人内皮素1、血管紧张素Ⅱ、C型钠尿肽22等均无交叉反应。用Wallac1470型γ计数仪测定放射性计数,根据试剂盒说明计算CF16含量。

1.3 统计学处理

采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,计量资料以 ±s表示,组间比较采用两独立样本t检验,双变量相关性分析采用Pearson等级相关法。检验水准(α)为0.05。

2 结 果 2.1 患儿基本资料

如表1所示,3组患儿在年龄、性别、体质量和ASD大小方面差异无统计学意义(P>0.05)。

表 1 三组ASD患儿各项指标比较 Tab 1 Comparison of data among the three groups of ASD children

2.2 CF6测定结果

如表1所示,对照组血浆中CF6含量为(198.5±43.7) pg/mL,A组CF6的含量为(167.7±89.9) pg/mL,B组CF6含量为(304.4±80.7) pg/mL。对照组与A组之间差异无统计学意义(P>0.05),B组CF6含量较对照组和A组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。

2.3

ASD合并重度肺动脉高压与血浆中CF6含量的关系 如图1所示,重度肺动脉高压患儿肺动脉收缩压/血压收缩压比与血浆中CF6的含量呈正相关关系(r=0.781,P<0.01)。

图 1 ASD合并重度肺动脉高压患儿肺动脉收缩压/ 血压收缩压比与血浆中CF6含量的相关性 Fig 1 Association of sPAP/sBP ratio with plasma CF6 level in ASD children with severe pulmonary artery hypertension sPAP: Systolic pulmonary artery pressure; sBP: Systolic blood pressure; CF6: Coupling factor 6
3 讨 论

先天性心脏病巨大ASD常合并肺动脉高压,其贯穿先天性心脏病发展的各个阶段[ 5 ],但合并重度肺动脉高压的巨大ASD是手术相对禁忌证,应及早治疗。为使先天性心脏病患者早期争取到矫治手术机会,又不增加手术病死率,应积极探索先天性心脏病巨大ASD合并肺动脉高压的发病机制,以保证手术的安全,改善患者近期及远期预后。小儿巨大ASD是指按体质量计算,17 kg者缺损直径大于28 mm,12 kg者缺损直径大于24 mm[ 6,7 ]。本组病例患儿平均体质量为(6.9±2.1) kg,而缺损直径为(28.1±4.9) mm,均符合巨大ASD。

CF6是由Osanai等[ 2 ]首次从原发性高血压小鼠心、肝、肾等组织中提取的一种能抑制前列环素2(prostacyclin 2,PGI2)合成的活性物质,具有强烈的收缩血管的效应。CF6由76个氨基酸组成,是线粒体ATP合成酶的一个基团,当其由VEC释放入血时与VEC胞膜的ATP合成酶β亚基连接,导致胞内酸化,从而引起VEC受损。有研究报道CF6以循环激素样方式产生血管张力调节等广泛的生物学效应,通过抑制血浆PGI2及其前体物质花生四烯酸的生成,参与VEC功能紊乱为中心的多种病理生理过程[ 8 ]。经研究高血压时血浆中存在的唯一内源性PGI2生成抑制物就是CF6[ 9 ]。CF6释放入血液循环后抑制磷脂酶A2的活性,减少质膜花生四烯酸的释放,从而影响PGI2的合成,具有强烈的血管收缩效应[ 2 ]。Osanai等[ 10 ]报道CF6是6-酮-前列腺素F1α (6-ketoprostaglandin F1α,6-keto-PGF1α)唯一的内源性抑制因子,可能参与了肺动脉高压的形成过程。本实验结果发现,ASD未合并肺动脉高压患儿与ASD合并肺动脉高压但未达到重度肺动脉高压患儿血浆中CF6的含量差异无统计学意义(P>0.05),而ASD合并重度肺动脉高压患儿血浆中CF6含量明显增加(P<0.01)。另外Tanaka等[ 11 ]发现,CF6通过改变基因表达方式导致细胞内内源性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂生成增多,降解减少,在细胞内堆积,进而抑制内皮细胞一氧化氮(NO)合成。国内最近有研究报道血小板活化因子NOS与肺动脉高压的形成呈负相关关系[ 12 ]。本研究发现ASD合并重度肺动脉高压组患儿血浆中CF6的含量与不同程度肺动脉高压之间呈正相关关系(r=0.781),提示CF6可能也是肺动脉高压形成的重要因素之一。

4 利益冲突

所有作者声明本文不涉及任何利益冲突。

参考文献
[1] Vapaatalo H, Mervaala E.Clinically important factors influencing endothelial function[J].Med Sci Monit, 2001, 7:1075-1085.
[2] Osanai T, Okada S, Sirato K, Nakano T, Saitoh M, Maqota K, et al.Mitochondrial coupling factor 6 is present on the surface of human vascular endothelial cells and is released by shear stress[J].Circulation, 2001, 104:3132-3136.
[3] 中华医学会心血管病学分会, 中华心血管病杂志编辑委员会.肺动脉高压筛查诊断与治疗专家共识[J].中华心血管病杂志, 2007, 35:979-987.
[4] 杨盛春, 李维光, 刘 威, 夏圆生, 张国强, 陶建平.婴儿先天性心脏病合并肺动脉高压围手术期处理[J].中华胸心血管外科杂志, 2003, 19:304-305.
[5] 胡盛寿, 朱晓东, 郭加强, 吴学军, 薛淦兴.先天性心脏病合并重度肺动脉高压的临床分级再讨论——314 例远期疗效的随访研究[J].中国循环杂志, 1995, 10:151-154.
[6] Fischer G, Kramer H H, Stieh J, Harding P, Jung O.Transcatheter closure of secundum atrial septal defects with the new selfcentering amplatzer septal occluder[J].Eur Heart J, 1999, 20:541-549.
[7] Berger F, Ewert P, Abdul-khaliq H, Nürnberg J H, Lange P E.Percutaneous closure of large atrial septal defects with the amplatzer septal occluder: technical overkill or recommendable treatment?[J].Interv Cardiol, 2001, 14:63-67.
[8] Osanai T, Nakamura M, Sasaki S, Tomita H, Saitoh M, Osawa H, et al.Plasma concentration of coupling factor 6 and cardiovascular events in patients with end-stage renal disease[J].Kidney Int, 2003, 64:2291-2297.
[9] Higuti T, Osaka F, Yoshihara Y, Tsurumi C, Kawamura Y, Tani I, et al.cDNA cloning and sequencing for the import precursor of coupling factor 6 in H(+)-ATP synthase from rat liver mitochondria[J].Biochem Biophys Res Commun, 1990, 171:1079-1086.
[10] Osanai T, Magota K, Tanaka M, Shimada M, Murakami R, Sasaki S, et al.Intracellular signaling for vasoconstrictor coupling factor 6: novel function of beta-subunit of ATP synthase as receptor[J].Hypertension, 2005, 46:1140-1146.
[11] Tanaka M, Osanai T, Murakami R, Sasaki S, Tomita H, Maeda N, et al.Effect of vasoconstrictor coupling factor 6 on gene expression profile in human vascular endothelial cells: enhanced release of asymmetric dimethylarginine[J].J Hypertens, 2006, 24:489-497.
[12] 林祥晓, 张 成.血小板活化因子一氧化氮合酶与肺动脉高压的发生关系[J].黑龙江医学, 2012, 36:85-87.