2018, Vol. 35 
卢立康唑（luliconazole），商品名为Luzu，化学名为(-)-(E)-4(R)-4-(2, 4-二氯苯基)-1, 3-二硫戊环-2-亚取代（1H-咪唑-1-取代）乙腈（图 1），是由日本农药株式会社研发的一种新型的咪唑类外用抗真菌药物.已上市的1%卢立康唑乳膏主要用于治疗足癣、股癣和体癣[1].目前卢立康唑用于甲癣（灰指甲）的治疗，也已进入Ⅲ期临床研究.
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图 1 卢立康唑的化学结构 Figure 1 The chemical structure of luliconazole |
目前，国内外已有卢立康唑的化学合成、晶型、药效、药动和临床研究的报道[2-7]，但其完整的结构解析确证尚未见报道.本研究采用红外吸收光谱、紫外吸收光谱、核磁共振（nuclear magnetic resonance，NMR）波谱（包含1H NMR、13C NMR、DEPT135、1H-1H COSY、1H-13C HMQC和1H-13C HMBC）、质谱等谱学技术，以及差示扫描量热分析、X-射线粉末衍射和元素分析等方法，对该化合物的结构及NMR数据进行了详细解析[8-10]，并确证了其结构.这些数据为该化合物的定性及纯度分析提供了科学依据，同时为其合成及生产过程的质量控制提供了重要参考信息.
1 实验部分 1.1 仪器与试剂INOVA 600型NMR谱仪（美国瓦里安有限公司）；Vertex 70傅里叶红外光谱仪（德国布鲁克公司）；UV 2550紫外-可见分光光度计（日本岛津制作所）；6520 Accurate-Mass Q-TOF液相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦科技有限公司）.
氘代二甲基亚砜（DMSO-d6，美国剑桥同位素实验室公司）；甲醇（色谱纯，德国默克公司）；其他试剂均为分析纯；实验用水为超纯水（电阻率为18 MΩ·cm）.
1.2 样品卢立康唑（批号：1502001）为齐鲁制药有限公司提供.利用高效液相色谱（HPLC）测定样品纯度为99.78%，符合结构鉴定所需的纯度.差示扫描量热分析显示152 ℃的吸热峰为其熔融峰温；X-射线粉末衍射显示样品为结晶态；元素分析显示样品含C：47.24%，H：2.62%，N：11.75%，符合卢立康唑分子式C14H9Cl2N3S2.
1.3 NMR实验样品溶于DMSO-d6，1D和2D NMR实验均在配备PFG Switchable Broadband探头的Varian INOVA 600型NMR谱仪上完成，采用直径为5mm的NMR样品管.以四甲基硅烷（TMS）为内标（δH 0.00，δC 0.0）.1H NMR和13C NMR的工作频率分别为599.78 MHz和150.81 MHz，谱宽分别为6 400.0 Hz和37 700.3 Hz.DEPT135的工作频率为150.83 MHz，谱宽为37 700.3 Hz.2D谱包括2D梯度场1H-1H COSY、1H-13C HMQC和1H-13C HMBC谱，均采用标准脉冲程序.1H-1H COSY的F2（1H）和F1（1H）维谱宽均为6 400.0 Hz，采样数据点阵t2×t1 = 1 024×512，累加次数为8；HMQC的F2（1H）和F1（13C）维谱宽分别为6 400.0 Hz和37 700.3 Hz，采样数据点阵t2×t1= 1 024×512，累加次数为16；HMBC的F2（1H）和F1（13C）维谱宽分别为6 400.0 Hz和37 700.3 Hz，采样数据点阵t2×t1 = 1 024×512，累加次数32.
2 结果与讨论 2.1 紫外吸收光谱分析卢立康唑甲醇溶液的紫外吸收光谱中，λmax = 296 nm处的吸收峰为取代苯环的B带跃迁吸收峰，这与卢立康唑的化学结构相符.
2.2 红外吸收光谱分析采用溴化钾压片法制备样片，进行红外光谱测试.样品的红外光谱数据分析与归属见表 1. 3 040 cm-1为苯环中=C-H的伸缩振动吸收，1 586 cm-1、1 556 cm-1为苯环骨架伸缩振动吸收，829 cm-1、817 cm-1为苯环中=C-H的弯曲振动吸收，说明存在苯环结构.2 201 cm-1为不饱和氰中C≡N的伸缩振动吸收，说明存在不饱和氰结构.由此说明，样品的红外光谱吸收特征与卢立康唑包含基团一致.
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表 1 卢立康唑的红外吸收光谱数据 Table 1 Infrared absorption spectrum data of luliconazole |
高分辨质谱（图 2）测得该样品的准分子离子峰[M+H]+的质荷比（m/z）为353.970 6，与卢立康唑（精确分子量为352.961 5）一致.
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图 2 卢立康唑的高分辨质谱 Figure 2 High resolution mass spectrum of luliconazole |
卢立康唑的1H NMR谱（图 3）显示有8组质子信号.综合分析1H-1H COSY谱（图 4）、1H-13C HMQC谱（图 5）和1H-13C HMBC谱（图 6）显示，δH 4.14（1H, dd, J=12.6/5.4 Hz）和δH 4.05（1H, dd, J=12.6/5.4 Hz）分别归属为H-4a和H-4b.在HMQC谱中，δC 43.9同时与H-4a和H-4b相关，被归属为C-4.在COSY谱中，δH 5.81（1H, dd, J=5.4/4.8 Hz）与H-4a和H-4b相关，因此被归属为H-5.在HMQC谱中，δC 55.1与H-5相关，被归属为C-5.在HMBC谱中，H-5与C-4、δC 130.2、δC 133.9、δC 134.5和δC 167.2远程相关；DEPT135谱和13C NMR谱（图 7）显示δC 130.2为叔碳，δC 133.9、δC 134.5和δC 167.2为季碳，因此δC 130.2为C-11.在HMQC谱中，δH 7.78（1H, d, J=8.4 Hz）与C-11相关，被归属为H-11.在COSY谱中，δH 7.53（1H, dd, J=8.4/2.4 Hz）与H-11相关，因此被归属为H-10.在HMQC谱中，δC 128.3与H-10相关，被归属为C-10.在HMBC谱中，H-10与C-11、δC 129.8、δC 133.9和δC 134.2远程相关；DEPT135谱和13C NMR谱显示δC 129.8和C-11为叔碳，δC 133.9和δC 134.2为季碳，因此δC 129.8为C-8.在HMQC谱中，δH 7.75（1H, d, J=2.4）与C-8相关，被归属为H-8.在HMBC谱中，季碳δC 133.9与H-4a、H-4b、H-5、H-10、H-8和H-11远程相关，归属为C-6；季碳δC 134.5与H-5、H-8和H-11远程相关，归属为C-7.在HMBC谱中，δC 134.2与H-10、H-8和H-11远程相关；DEPT谱中显示δC 134.2为季碳，因此δC 134.2为C-9.
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图 3 卢立康唑的1H NMR谱 Figure 3 1H NMR spectra of luliconazole |
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图 4 卢立康唑的1H-1H COSY谱 Figure 4 1H-1H COSY spectrum of luliconazole |
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图 5 卢立康唑的1H-13C HMQC谱 Figure 5 1H-13C HMQC spectrum of luliconazole |
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图 6 卢立康唑的1H-13C HMBC谱. (a)全谱；(b)为(a)中方框所示部分放大图 Figure 6 1H-13C HMBC spectra of luliconazole. (a) Full spectrum; (b) Local amplified spectra in the box of (a) |
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图 7 卢立康唑的DEPT135和13C NMR谱 Figure 7 DEPT135 and 13C NMR spectra of luliconazole |
化合物的13C NMR谱（图 7）显示14个信号峰，结合DEPT谱（图 7），显示化合物结构中存在6个季碳、7个叔碳和1个仲碳.其中，上文已归属了C-4、C-5、C-6、C-7、C-8、C-9、C-10和C-11.在HMBC谱中，季碳δC 167.2与H-4a、H-4b和H-5远程相关，归属为C-2.根据DEPT谱得知，剩余两个季碳δC 92.6和δC 115.8没有归属；在HMBC谱中，δC 92.6与δH 7.42（1H, t, J=1.2 Hz）远程相关，δC 115.8无相关峰；因此δC 92.6归属为C-12，δC 115.8归属为C-13.
至此，还剩余δH 7.11（1H, dd, J=1.2/1.2 Hz）、δH 7.42（1H, dd, J=1.2/1.2 Hz）和δH 7.92（1H, dd, J=1.2/1.2 Hz），以及叔碳δC 120.4、δC 130.0和δC 138.1没有归属.在HMQC谱中，δH 7.42与δC 120.4相关；δH 7.11与δC 130.0相关；δH 7.92与δC 138.1相关.
由于H-15处于两个氮原子之间，受去屏蔽效应的影响，化学位移较H-17和H-18移向低场，所以将δH 7.92（1H, dd, J=1.2/1.2 Hz）归属为H-15，因此δC 138.1归属为C-15.在HMBC谱中，δH 7.42（1H, dd, J=1.2/1.2 Hz）与C-12远程相关，我们判断δH 7.42为H-18，因此δC 120.4归属为C-18.在HMBC谱中，叔碳δC 130.0与H-18和H-15远程相关，归属为C-17，因此δH 7.11（1H, dd, J=1.2/1.2 Hz）归属为H-17.
具体的1H NMR和13C NMR数据及归属见表 2，均与卢立康唑结构一致.
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表 2 卢立康唑的1H NMR和13C NMR数据 Table 2 1H NMR and 13C NMR data of luliconazole |
综上所述，紫外吸收光谱、红外吸收光谱、高分辨质谱，以及1D和2D NMR谱图测试结果表明，所测样品与卢立康唑分子结构式一致.该结果为该药物的合成、生产中的质量控制以及同类化合物的解析提供了参考依据.
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