马铃薯作为世界第四大粮食作物，具有良好的营养价值和经济价值，广泛应用于食品工业、淀粉工业、饲料工业和医药工业^[1]。马铃薯块茎作为繁殖器官和营养器官，其贮藏是马铃薯产业链中最重要的环节之一，种薯的质量影响着马铃薯播种后的生长状况及产量的形成，而商品薯的质量则直接关乎经济效益^{[2, 3]}。收获后的马铃薯在贮藏过程中由于休眠程度不一，会出现块茎发芽不规律、缩水等现象，造成块茎营养成分流失，营养品质、加工品质及栽培品质下降^[4]。在实际生产中，为满足不同播期的需要及保证种薯播种后的出苗率、出苗整齐度和生长势，需要适时适度打破或延长种薯的休眠，以调整种薯的休眠期及出芽的整齐度^[5]，而当马铃薯作为加工和粮饲用材料时，为了延长块茎的保鲜时间，又需要延长其休眠期。因此，马铃薯块茎休眠调控技术对实际生产具有重要意义。目前，关于马铃薯休眠调控的研究主要包括物理措施和植物生长调节剂处理2方面，前者要求高成本的人力和物力，且所耗时间长；后者则有方便、直接、节约成本等特点^[6]。赤霉素(gibberellin A₃，GA₃)被认为是打破马铃薯块茎休眠最有效的生长调节剂，但对种类、级别、大小等不同的马铃薯块茎其适宜的使用剂量和处理方法与前人的研究结果不尽一致^{[7, 8]}。氯苯胺灵(chlorpropham，CIPC)是一种应用广泛的高效马铃薯抑芽剂，关于其抑芽效果有广泛的报道^{[9, 10]}。脱落酸(abscisic acid，ABA)被认为是诱导休眠的正调节因子，可能参与休眠的保持^[11]，目前在洋葱等作物上已有过其延长休眠的研究^[12]，但将其作为马铃薯抑芽剂的研究报道甚少，同时亦鲜见ABA、GA₃和CIPC对马铃薯块茎休眠影响效应的对比研究。本试验以西南地区主栽马铃薯品种“川芋117”为试验材料，深入比较抑芽剂CIPC和ABA与促芽剂GA₃对马铃薯贮藏期间芽的萌发生长动态和块茎碳氮代谢的影响，探寻其休眠的调控技术及其物质基础，以期为马铃薯块茎的科学贮藏与处理提供理论依据。

供试马铃薯品种为西南地区主推品种“川芋117”；供试试剂GA₃、ABA购自成都市科龙化工试剂厂，氯苯胺灵乳油(CIPC含量为30%)为甘肃省农业科学院农产品贮藏加工研究所研制。

马铃薯于2014年4月底收获后，挑选出外观完好、无机械损伤、无病害、质量为50 g左右的块茎，将挑选出的马铃薯块茎洗净平铺置于通风避光处晾干后平均分成4份，放置15 d后分别用质量浓度15 mg/L的GA₃、稀释200倍的CIPC乳油(CIPC质量浓度为1.5 g/L)、质量浓度4 mg/L的ABA浸泡30 min后取出避光晾干、贮藏，以清水浸泡为对照。每处理6个重复，每重复60个薯块，将处理好的薯块装盒放在阴凉通风处(贮藏温度为18~24 ℃，相对湿度为85%~98%)。固定3个重复在处理后每天观察出芽并记录，另外，3个重复在处理后0、14、28、42、56、70和84 d进行取样测定碳氮代谢动态变化，105 ℃杀青整薯30 min，80 ℃烘干至恒 量后粉碎过100目筛后备用于碳氮代谢物质含量的测定。

参考蒲建刚等^{[13, 14]}的方法，测定各处理马铃薯块茎的出芽动态，计算相关指标。

发芽率:以块茎第一个芽长达2 mm为发芽标准，用游标卡尺测量芽长及芽粗，发芽率/%=$\frac{发芽块茎数}{块茎总数}$×100；

萌发期:块茎从收获到发芽率为10%的时间，d；

休眠期:将50%马铃薯发芽的日期定为该处理的发芽期，休眠期为从收获到发芽期的时间，d；

休眠强度:块茎从收获到发芽率为90%的时间，d；

休眠幅度:发芽率从10%~90%所需的时间，d.

可溶性糖和淀粉含量采用硫酸-蒽酮法^[15]测定，粗蛋白质含量采用凯氏定氮法测定，可溶性蛋白质含量采用考马斯亮蓝G-250法测定，块茎碳氮比(C/N)=可溶性糖含量/可溶性蛋白质含量^[16]。

试验数据用Excel 2007、SPSS 20和Sigma Plot 10.0进行作图和分析。

不同生长调节剂处理对马铃薯贮藏过程中出芽动态的影响列于表1，从表中可以看出，GA₃有明显的打破休眠的作用，处理后的块茎萌发期较对照提前13 d，休眠期提前20 d，而休眠强度缩短20 d，休眠幅度缩短11 d。表明GA₃可以打破休眠，缩短休眠期，并在一定程度上提高发芽的集中度和整齐度。与GA₃相反，ABA有一定延长休眠的作用，萌发期和休眠期分别较对照推迟约15 d和4 d，休眠强度延长6 d，但休眠幅度较对照则缩短11 d，表明ABA具有显著的抑芽效果，可适当地延长马铃薯的休眠，且可较大幅度提高发芽的整齐度。而CIPC的抑芽效果更显著，处理后的块茎70 d才开始发芽，处理84 d发芽率仍不足5%，萌发期较对照至少延迟40 d以上。

表1(Table 1)

表1 不同生长调节剂对“川芋117”出芽动态的影响Table 1 Effects of different growth regulators on germination dynamics of “Chuanyu-117”

表1 不同生长调节剂对“川芋117”出芽动态的影响Table 1 Effects of different growth regulators on germination dynamics of “Chuanyu-117” 测定指标 Determined index 生长调节剂 Growth regulator GA3 CK CIPC ABA 萌发期 Germination period/d 43c 56b — 71a 休眠期 Dormancy period/d 54b 74a — 78a 休眠强度 Dormancy intensity/d 68b 85a — 91a 休眠幅度 Dormancy amplitude/d 20b 31a — 20b  同行数据后的不同小写字母表示在P<0.05水平差异有统计学意义(邓肯法检验)。  Values within a row followed by different lowercase letters show significantly differences at the 0.05 probability level (Duncan's test).

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3种生长调节剂处理对马铃薯块茎的萌发过程亦有显著影响，从图1可以看出，GA₃和CK处理的马铃薯块茎萌芽进程为慢—快—慢，符合逻辑斯蒂函数，发芽率(y)与处理后时间(x，以观察到开始发芽的前1次观察时间为起点)的回归方程分别为y_GA3=97.67/(1+e^{-0.199 3x+8.520})(R²=0.995 8^**)和y_CK=118.22/(1+e^{-0.092 9x+6.048})(R²=0.979 1^**)，而ABA处理芽的萌发进程则更符合线性关系，回归方程为y_ABA=3.547 6x-193.66(R²=0.979 4^**)。

图1(Figure 1)

图1 生长调节剂处理后马铃薯发芽率动态变化 Fig.1 Germination percentage of potato after treated with different growth regulators

由图2可看出马铃薯萌芽即开始迅速生长，萌芽块茎的平均芽长(y)与处理后时间(x，以观察到开始发芽的前1次观察时间为起点)之间呈二次函数关系，GA₃、CK和ABA处理的回归方程分别为y_GA3=0.002 8x²-0.091x+0.51(R²=0.996 3^**)、y_CK=0.002 8x²-0.210x+3.83(R²=0.989 1^**) 和y_ABA=0.004 3x²-0.440x+11.14(R²=0.986 8^*)。GA₃、CIPC和ABA不仅影响块茎的萌芽动态，还显著影响芽的生长。 GA₃和ABA处理各发芽阶段芽长的平均增长率均高于对照，发芽率从10%~50%、50%~90%和90%~100%的3个阶段芽长平均增长率，GA₃处理分别为0.122 mm/d、0.188 mm/d和0.288 mm/d，CK分别为0.089 mm/d、0.183 mm/d和0.255 mm/d，ABA分别为0.120 mm/d、0.207 mm/d和0.272 mm/d。虽然GA₃和ABA处理的芽长平均增长率均高于CK，但由于GA₃处理发芽率从10%~90%和ABA处理发芽率从10%~100%阶段的发芽时间较对照短，因此这2个处理该期间的平均芽长约低于对照，而GA₃处理发芽率从90%~100%阶段的发芽时间较对照长，因此至100%发芽时其芽长比对照长3 mm左右。

图2(Figure 2)

图2 生长调节剂处理后马铃薯芽长动态变化 Fig.2 Shoot length of potato after treated with different growth regulators

芽粗生长与芽长的生长不同(图3)，块茎发芽后芽粗呈直线生长，GA₃、CK和ABA处理块茎的平均芽粗(y)与处理后时间(x，以观察到开始发芽的前1次观察时间为起点)之间的回归方程分别为y_GA3=0.057 4x-1.63(R²=0.988 5^**)、y_CK=0.050 3x-1.35(R²=0.950 1^**)和y_ABA=0.098 9x-5.38(R²=0.980 5^**)，GA₃、CK和ABA处理的芽粗平均增长率分别为0.057 4 mm/d、0.050 3 mm/d和0.098 9 mm/d，GA₃处理和CK差异不大，而ABA芽粗增长较快，但由于其出芽速度迅速，因此至100%发芽时其芽粗仍小于CK和GA₃处理。

图3(Figure 3)

图3 生长调节剂处理后马铃薯芽粗动态变化 Fig.3 Shoot diameter of potato after treated with different growth regulators

由图4可见，各处理块茎贮藏期淀粉含量以萌发期为界限总体呈先增加后减少的趋势。GA₃、CIPC和ABA处理的块茎淀粉含量分别在处理后14 d、56 d和28 d左右升至最高，分别比刚处理时高4.6%、5.1%和2.3%。此后开始下降，各处理降低的幅度不同，GA₃、CIPC和ABA处理的块茎淀粉含量在处理84 d后分别比刚处理时低13.36%、5.93%和11.30%。在贮藏前期，各处理间块茎淀粉含量差异不显著，在处理42 d后才开始出现显著差异;在贮藏后期，GA₃处理和对照处理间以及CIPC处理和ABA处理间的差异均不显著，但GA₃和对照处理的块茎淀粉含量显著低于CIPC和ABA处理。各处理块茎可溶性糖含量在贮藏期的变化规律不同(图5)，GA₃、CIPC和对照处理呈逐渐减少的趋势，而ABA处理呈先降低后升高再降低的变化趋势。各处理块茎可溶性糖含量的降低幅度也不同，在处理84 d后，GA₃、CK、CIPC和ABA处理的可溶性糖含量，分别比刚处理时降低48.3%、57.5%、58.9%和59.1%。

图4(Figure 4)

柱状图上不同小写字母表示同一贮藏时间不同处理的淀粉含量在P＜0.05水平下差异有统计学意义。 Different lowercase letters above the columns show significant differences of starch content among treatments under the same storage period at the 0.05 probability level. 图4 各处理块茎贮藏期淀粉含量的变化 Fig.4 Change of starch content of different treatments during storage

图5(Figure 5)

柱状图上不同小写字母表示同一贮藏时间不同处理的可溶性糖含量在P＜0.05水平下差异有统计学意义。 Different lowercase letters above the columns show significant differences of soluble sugar content among treatments under the same storage period at the 0.05 probability level. 图5 各处理块茎贮藏期可溶性糖含量的变化 Fig.5 Change of soluble sugar content of different treatments during storage

如图6所示，在整个贮藏期各处理的马铃薯块茎可溶性蛋白质含量均呈现先升高后降低的变化趋势，同一时期各处理之间的差异不显著，但促芽剂处理的含量较抑芽剂处理的提前降低，在萌发期左右时含量达到最大值。在贮藏前期，促芽剂GA₃处理块茎的可溶性蛋白质含量整体处于较高水平，升高幅度小;抑芽剂CIPC和ABA处理块茎的可溶性蛋白质含量一直处于较低水平，ABA处理升高幅度大于CIPC处理。各处理的可溶性蛋白质含量的升高幅度表现为ABA(39.68%)＞CK(35.58%)＞CIPC(31.32%)＞GA₃(25.73%)。在贮藏后期含量降低幅度表现为ABA(33.22%)＞CK(32.72%)＞GA₃(19.17%)＞CIPC(17.74%)。

图6(Figure 6)

柱状图上不同小写字母表示同一贮藏时间不同处理的可溶性蛋白质含量在P＜0.05水平下差异有统计学意义。 Different lowercase letters above the columns show significant differences of soluble protein content among treatments under the same storage period at the 0.05 probability level. 图6 各处理块茎贮藏期可溶性蛋白质含量的变化 Fig.6 Change of soluble protein content of different treatments during storage

处理后的马铃薯块茎在贮藏期粗蛋白质含量的变化规律与可溶性蛋白质相似，亦均呈现先升高后降低的趋势，但其含量变化幅度较小(图7)。各处理块茎的粗蛋白质含量在萌发期(处理后28 d左右)升至最高，在生理休眠期CIPC处理粗蛋白质含量升高最多，含量显著高于其他处理。处理14 d后促芽剂处理与抑芽剂处理差异达显著水平，但抑芽剂处理之间差异不显著。此后随着贮藏时间的延长，GA₃处理与ABA处理差异不显著，但与CIPC处理差异显著。在贮藏前期各处理粗蛋白质含量的升高幅度表现为CIPC(12.8%)＞ABA(12.5%)＞CK(8.2%)＞GA₃(4.77%);在贮藏后期含量降低幅度表现为ABA(18.02%)＞CK(12.5%)＞GA₃(11.37%)＞CIPC(8.71%)。表明在整个贮藏期，CIPC处理块茎积累的粗蛋白质含量高，GA₃和ABA 处理萌发后粗蛋白质含量降低。

图7(Figure 7)

柱状图上不同小写字母表示同一贮藏时间不同处理的粗蛋白质含量在P＜0.05水平下差异有统计学意义。 Different lowercase letters above the columns show significant differences of crude protein content among treatments under the same storage period at the 0.05 probability level. 图7 各处理块茎贮藏期粗蛋白质含量的变化 Fig.7 Change of crude protein content of different treatments during storage

不同生长调节剂处理的马铃薯块茎在贮藏过程中，其碳氮比除ABA处理在处理后42 d左右有所上升随后逐渐降低外，其余均呈现逐渐降低的变化趋势(图8)。不同生长调节剂处理对马铃薯块茎的碳氮比影响不一致，在整个贮藏过程中GA₃处理的块茎碳氮比整体水平较高，而抑芽剂处理的块茎碳氮比较低，在整个贮藏期各处理块茎碳氮比降低幅度表现为CIPC(60.44%)＞CK(58.40%)＞ABA(55.31%)＞GA₃(48.99%)。但ABA处理在萌发期左右块茎的碳氮比突然增加，而发芽后碳氮比降低幅度低导致在贮藏后期碳氮比较CIPC处理和CK高，从而导致ABA处理的块茎碳氮比整体降低幅度小。

图8(Figure 8)

图8 各处理块茎贮藏期碳氮比变化 Fig.8 Change of carbon-nitrogen ratio of different treatments during storage

马铃薯块茎在收获后不能立即发芽，需要经历一段时间的后熟和生理休眠期^[17]。现普遍认为马铃薯块茎的休眠开始于块茎形成期，内源激素一直参与了休眠过程的调控^{[18, 19]}，适宜的植物生长调节剂可以调控马铃薯块茎的休眠。本试验结果表明GA₃有明显的打破休眠促进萌发的作用，休眠期和休眠强度分别较对照缩短20 d和17 d，而且芽在萌发后生长迅速，但幼芽(苗)比较纤细，芽长和芽粗的比值较大。因此，在实际生产应用中应注意炼苗，并及时播种，适当增加底肥用量以培育壮苗。与GA₃的作用相反，ABA则有一定延长休眠的作用，处理后马铃薯块茎的休眠期和休眠强度分别较对照增加4 d和6 d，但发芽比较集中，发芽的整齐度较高，同时芽长与芽粗的比值较小，幼芽(苗)比较粗壮，有利于培育壮苗。虽然CIPC处理后的块茎在试验时间内有萌发，但无明显芽生长迹象，表明CIPC具有强烈抑制块茎发芽的作用。CORSINI等^[20]的研究表明由于处理后CIPC挥发或分解等因素，块茎表皮中的CIPC含量会逐渐降低，当含量低于20 mg/L时马铃薯就会发芽，如果在CIPC含量低于20 mg/L之前重新用CIPC处理，块茎将继续保持休眠状态。KIM等^[21]通过将不同浓度CIPC处理后的马铃薯块茎进行播种，发现播种后的块茎都有不同程度的发芽，而相同处理不进行栽种的块茎则不发芽，且CIPC处理浓度越高，处理后的块茎田间出苗越缓慢，出苗率也低，但最终都有萌发，表明不同质量浓度的CIPC处理马铃薯块茎最终均能发芽。因此在实际生产中，生产者应该根据自身需要合理选择相应剂量的CIPC处理薯块。

马铃薯块茎休眠和萌芽期间内部的生理活动和物质转化会发生一系列变化。收获后的马铃薯块茎会先木栓化，阻止病菌的入侵及减少氧气的进入，此时块茎作为“库”其生理活动主要表现为可溶性营养物质如小分子糖类和氨基酸由于合成作用转变为不溶状态的淀粉和蛋白质。大分子的营养物质可以起到脱水保护剂的作用，结合束缚水以有利于薯块顺利度过休眠期^[22]。休眠解除后，块茎转化为“源”，各种代谢活动开始加强^[23]，淀粉和蛋白质开始分解为可溶性糖和可溶性蛋白质，前者为主要的供能物质，同时也是重要的渗透调节物质和信号传递物质^[24];后者为一些代谢酶的组分，同时因其亲水性强，可增强细胞的持水力^[25]。因此，块茎的非结构性碳氮化合物是重要的代谢和能源物质，块茎的碳氮比可衡量生理活动的强弱及协调程度^{[26, 27]}。本试验中，供试品种“川芋117”块茎的淀粉、粗蛋白质和可溶蛋白质含量均呈先增加后减少的变化趋势，在处理后14~56 d含量达到最大，但出现最大值的时间因处理不同而异。GA₃处理后块茎的生理活性增强，淀粉开始分解的时间早，降解速度快，可溶糖含量高，碳氮比值大。而ABA处理则有相反趋势，淀粉、蛋白质开始分解的时间较晚，贮藏前期碳氮比较低。杨建昌^[28]的研究表明:GA₃诱导产生或激活α-淀粉酶等水解酶不利于淀粉和蛋白质的合成和累积，而ABA则可调节或抑制一些水解酶的活性而有利于淀粉和蛋白质的合成。本试验结果与他们的研究结果相一致，表明碳氮是GA₃和ABA打破或延长块茎休眠、促进或延迟萌发的物质基础。因此GA₃和ABA处理的块茎发芽后应及时栽种，避免营养物质消耗过多造成种薯老化，栽培质量降低。CIPC处理后块茎的生理活性一直处于较低状态，淀粉、蛋白质等营养物质含量比较稳定，消耗比较少，因此可以作为商品薯的贮藏保鲜剂使用。