2. 南通大学药学院，江苏 南通 226001
2. School of Pharmacy, Nantong University, Nantong Jiangsu 226001, China
溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种慢性复发率高的胃肠道炎性病变，近年来其全球患病率呈现逐年递增态势，但缺乏有效的临床干预手段。该病具有病程迁延、易复发的特点，不仅严重影响患者生活质量，还可增加结肠炎相关肿瘤的发病风险。目前临床治疗UC的常用药物有5-氨基水杨酸类、免疫抑制剂等[1]，但长期用药可能引起耐药、肝肾损伤等副作用，限制了其临床应用。因此，研发兼具高效与低毒特点的抗UC药物是当前亟待解决的重要临床问题。
香连丸始载于唐·李绛《兵部手集方》，由黄连、木香二药等份组成。其中黄连擅清热燥湿，泻火解毒；木香味辛性苦，善于行散大肠滞气，二者合用可增强行气止痛之效，常用于治疗大肠湿热所致的痢疾。此外，多项临床和基础研究表明，香连丸具有良好的治疗UC的作用[2-4]，但其药效物质基础及作用机制尚未明确，值得深入研究。
本研究采用UHPLC-TOF-MS技术联合网络药理学与分子对接技术，预测香连丸发挥治疗UC作用的潜在效应成分、作用靶点与信号通路。在此基础上，采用葡聚糖硫酸钠（dextran sulphate sodium，DSS）建立UC小鼠模型，综合运用HE染色、ELISA、Western blot及免疫荧光等多种技术手段，对香连丸的治疗效果及作用靶点进行实验验证，以期阐明其治疗UC的分子机制，为该方的临床应用及新药研发提供实验依据。
1 材料与方法 1.1 仪器ZenoTOFTM 7600高分辨质谱仪（美国SCIEX公司），配有LC-30A超高效液相色谱仪（日本岛津公司）；SECURA225D-1CN电子天平（德国赛多利斯公司）；WH-2微型旋涡混合仪（上海沪西分析仪器厂）；Allegra C-34R冷冻离心机（美国贝克曼库尔特有限公司）；PowerPacTM Basic基础电泳仪（美国BIO-RAD公司）；KH-BL石蜡包埋机（湖北孝感阔海医疗科技有限公司）；轮转式病理组织石蜡自动切片机（湖北孝感阔海医疗科技有限公司）；MF52-N倒置荧光显微镜（广州市明美光电技术有限公司）；GOKU-B1超纯水机（厦门锐思捷水纯化技术有限公司）。
1.2 试剂与药物香连丸（批号230701，湖北诺得胜制药有限公司）；美沙拉秦肠溶片（批号L23096A，德国Dr. Falk Pharma GmbH）；DSS（货号0216011090，美国MP Biomedicals公司）；RIPA裂解缓冲液（货号P0013B）、IL-17检测试剂盒（货号PI545）、IL-23检测试剂盒（货号PI655）、TGF-β检测试剂盒（货号PT878）及IL-10检测试剂盒（货号PI522）均购于上海碧云天生物技术有限公司；p-JAK2抗体（货号ab32101）、p-STAT3抗体（货号ab76315）、RORγt抗体（货号ab207082）及Foxp3抗体（货号ab215206）均购于英国Abcam公司；JAK2抗体（货号GB11325-100）、STAT3抗体（货号GB11176-100）及GAPDH抗体（货号GB15002-100）均购于武汉赛维尔生物科技有限公司。
1.3 动物C57BL/6J品系雄性小鼠40只，体质量22~26 g，由浙江维通利华实验动物技术有限公司提供[实验动物生产许可证号：SCXK（浙）2019-0001]。所有动物实验方案经南通大学实验动物伦理委员会审查批准并严格按照动物伦理学要求进行操作，伦理号：IACUC20230522-1001。实验前将小鼠适应性饲养1周，饲养环境光照充足，通风良好，温度控制在20~25 ℃，相对湿度保持50%~ 60%。
1.4 香连丸含药肠组织分析 1.4.1 UHPLC-TOF-MS检测条件色谱分离条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC HSS T3（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）；流动相：A相为含0.1% 甲酸的超纯水，B相为甲醇-乙腈混合溶液（体积比1∶1），采用梯度洗脱模式，具体洗脱程序见Tab 1；流速：300 μL·min-1；柱温：35 ℃；进样量：5 μL；进样室温度：4 ℃。
| Time/min | Flow rate/µL·min-1 | A/% | B/% |
| 0 | 300 | 95 | 5 |
| 1 | 300 | 95 | 5 |
| 15 | 300 | 60 | 40 |
| 20 | 300 | 40 | 60 |
| 25 | 300 | 5 | 95 |
| 28 | 300 | 5 | 95 |
| 28.1 | 300 | 95 | 5 |
| 32 | 300 | 95 | 5 |
质谱检测条件：采用电喷雾离子源（ESI），分别在正、负离子模式下进行数据采集；一级质谱扫描范围：m/z 50~1200；离子源温度：550 ℃；雾化气压力：55 psi；辅助加热气压力：55 psi；气帘气压力：35 psi；去簇电压：80 V；碰撞能量：10 eV；喷雾电压：5 500 V（正离子模式）、-4 500 V（负离子模式）。二级质谱扫描范围：m/z 50~1 200；碰撞能量：（35±15）eV。
1.4.2 结肠组织前处理分别取香连丸含药肠组织或空白肠组织（具体制备方法见“1.7.2”项），精密称定后按照1：10（g：mL）加入预冷纯水，于冰水浴中匀浆。精密吸取匀浆液100 μL，加入预冷甲醇400 μL，涡旋振荡3 min，于4 ℃、12 000 r·min-1条件下离心10 min，转移上清液400 μL至1.5 mL离心管中，30 ℃氮气吹干，残渣用100 μL 50% 乙腈溶液复溶，取上清液50 μL进样分析。
1.4.3 化合物分析库的建立和数据分析系统检索TCMSP在线数据库及相关文献资料，全面收集黄连、木香两味药材中的化学成分信息。利用中国科学院化学数据库、PubChem等在线数据库获取化合物的分子式、精确分子量等理化参数。同时，查阅相关文献资料，整理各成分的分子离子峰（正离子与负离子）与二级碎片离子信息，建立香连丸化学成分分析数据库，用于未知化合物的定性分析。
1.5 网络药理学分析 1.5.1 香连丸入肠成分靶点与UC疾病相关靶点筛选将所需化合物上传至SwissTargetPredicton数据库；同时，利用TCMSP数据库检索化合物作用靶点，接着导入String数据库转化为标准基因名，合并去重上述结果，即获得香连丸入肠成分的作用靶点。此外，分别在GeneCards、DisGeNET和OMIM数据库中以“ulcerative colitis”为检索词收集疾病相关作用靶点，经合并去重后获得UC疾病相关靶点。
1.5.2 蛋白相互作用（protein-protein Interaction，PPI）网络构建与分析将香连丸入肠成分靶点与UC疾病相关靶点取交集，所得共同靶点导入String数据库，物种设置为“homo sapiens”，获取蛋白相互作用关系数据。分析结果导入Cytoscape 3.7.2软件进行网络可视化及拓扑学分析，利用CentiScape 2.2插件计算各靶点的度值、中介中心度和接近中心度，筛选三项参数均高于平均值的靶点作为香连丸治疗UC的核心靶点。
1.5.3 GO和KEGG通路富集分析将核心靶点导入至DAVID数据库，进行GO功能注释与KEGG通路富集分析，以P < 0.05为显著性富集的判定标准，获取核心靶点的生物学功能信息。
1.5.4 “化合物-靶点-通路”网络的构建运用Cytoscape 3.7.2软件，将香连丸肠组织分布活性成分、核心靶点及显著富集的KEGG信号通路进行关联整合，构建“化合物-靶点-通路”多维可视化网络模型，直观展示香连丸多成分、多靶点、多通路协同治疗UC的网络调控特征。
1.6 香连丸中主要活性成分与关键靶点分子对接研究利用AutoDock Vina对香连丸中主要活性成分和关键靶点进行分子对接，并用PyMOL软件可视化对接结果。对接得分小于-20.9 kJ·mol-1代表模拟对接成功，对接分数越小，表明对接结果越好。
1.7 动物实验验证 1.7.1 造模、分组与给药将40只C57BL/6J小鼠随机分为5组（n=8）：正常组（Control）、模型组（Model）、香连丸低剂量组（XLP-L，1 g·kg-1）、香连丸高剂量组（XLP-H，4 g·kg-1）以及阳性药美沙拉嗪组（5-ASA，0.4 g·kg-1）。正常组小鼠自由饮用灭菌超纯水；其余各组小鼠自由饮用3% DSS溶液以诱导急性UC模型，造模期间各给药组小鼠每日定时灌胃相应药物1次，连续给药7天。
1.7.2 样品的采集及处理末次给药2 h后，各组小鼠摘眼球取血，血样在4 ℃条件下放置1 h，3500 r·min-1离心15 min后将血清保存于-80 ℃冰箱。取血后，颈椎脱臼处死小鼠，打开腹腔，摘取结肠肠段，预冷生理盐水反复冲洗肠内容物。部分结肠组织置于4% 多聚甲醛溶液中固定，用于后续HE、免疫荧光染色及免疫组织化学染色；其余组织经液氮速冻后转入-80 ℃保存，用于后续Western blot检测。此外，分别切取Control组与XLP-H组小鼠新鲜结肠组织，同组样本合并后用于UHPLC-TOF-MS分析。
1.7.3 小鼠一般情况与疾病活动指数（disease activity index，DAI）每日记录各组小鼠体质量变化、粪便性状及便血情况等。参照评分标准计算DAI。DAI=（体质量下降评分+粪便性状评分+便血评分）/3，评分标准详见Tab 2。
| Score | Weight loss/% | Stool property | Hematochezia |
| 0 | 0 | Normal | Occult blood（-） |
| 1 | 1~5 | ||
| 2 | 6~10 | Loose stool | Occult blood（+） |
| 3 | 11~20 | ||
| 4 | > 20 | Diluted stool | Gross blood |
将结肠组织置于4% 多聚甲醛溶液中充分固定，依次经乙醇梯度脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后制备连续组织切片（厚度5 μm），切片经二甲苯脱蜡、梯度乙醇复水后进行HE染色，中性树胶封片，光学显微镜下观察结肠组织病理学改变。
1.7.5 免疫荧光染色检测结肠组织中相关蛋白表达结肠组织石蜡切片经脱蜡、水化、抗原修复后，3% BSA封闭30 min，滴加p-JAK2（1∶1 000）、p-STAT3（1∶500）一抗，4 ℃孵育过夜。滴加荧光二抗，室温避光孵育1 h。滴加DAPI染液，室温孵育5 min，PBS润洗切片5 min×3次，抗荧光淬灭封片剂封片，荧光显微镜下观察并拍照。
1.7.6 免疫组织化学染色检测结肠组织中相关蛋白表达结肠组织石蜡切片经脱蜡、水化、抗原修复后，3%BSA封闭30 min。肠组织切片使用RORγt（1∶3 000）、Foxp3（1∶100）一抗，4 ℃孵育过夜。PBS洗涤后滴加HRP标记的山羊抗兔IgG二抗（1∶100），室温孵育2 h。PBS缓冲液洗涤3次后，采用DAB显色试剂盒进行显色反应。使用苏木精复染细胞核并清洗，经快速脱水透明后封片。使用光学显微镜观察肠组织切片。
1.7.7 Western blot检测结肠组织中相关蛋白表达采用RIPA裂解液提取小鼠结肠组织总蛋白，BCA法测定蛋白浓度，电泳，转膜，室温封闭2 h后分别加入JAK2（1∶1 000）、p-JAK2（1∶1 000）、STAT3（1∶1000）、p-STAT3（1∶2000）、RORγt（1∶2 000）、Foxp3（1∶1 000）、GAPDH（1∶3 000）抗体，4 ℃孵育过夜。TBST洗涤膜后，加入相应二抗室温孵育1 h，ECL曝光，利用化学发光成像系统扫描拍照。
1.7.8 ELISA测定小鼠血清中炎性因子水平根据ELISA试剂盒说明书操作，测定各组小鼠血清中IL-17、IL-23、TGF-β及IL-10的含量。
1.8 统计学方法采用SPSS 22.0统计软件和GraphPad Prism 9.5.1软件进行数据分析。计量资料以 x±s表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA）。检验水准α=0.05。
2 结果 2.1 香连丸入肠成分识别Fig 1显示了香连丸含药肠组织的总离子流色谱图（total ion chromatogram，TIC），采用PeakView 2.2软件（美国SCIEX公司）进行质谱解析，结果表明，含药肠组织中共鉴定得到25个化学成分，其中生物碱类为主要类型，同时包括酚酸类与黄酮类成分。上述入肠成分可能是香连丸治疗UC的活性物质。香连丸入肠成分定性分析结果见中国知网本文增强出版附件1。
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| Fig 1 TIC diagram of Xianglian pills containing medicated intestinal tissues |
利用SwissTargetPredicton与TCMSP数据库对上述25个入肠成分进行靶点预测，共获得850个成分相关靶点。同时，通过疾病数据库获取UC相关疾病靶点共计5 784个。将成分靶点与疾病靶点取交集，获得495个共有靶点，见Fig 2。
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| Fig 2 Venn diagram of active ingredients targets and UC disease targets |
将495个共有靶点导入STRING数据库，利用Cytoscape 3.7.2软件进行网络分析，筛选出核心靶点95个，进而构建核心靶点PPI网络图（Fig 3A）。在PPI网络中，JAK2-STAT3信号通路在该网络中呈现富集状态（Fig 3B）。该富集模块包含PPI网络中的几个关键基因，包括STAT3、JAK2、STAT1及BCL2。UC发病机制涉及遗传、免疫、菌群失衡等多种因素，其中肠黏膜组织的持续炎症以及肠道屏障功能的破坏是UC发生、发展的重要病理机制[5]。同时，在上述富集模块中JAK2、STAT3、STAT1均与免疫炎症密切相关。因此，JAK2-STAT3信号通路可能是香连丸治疗UC的关键通路。
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| Fig 3 PPI network diagram of core target(A)and JAK-STAT signaling pathway(B) |
利用DAVID平台对上述获取的95个核心靶点进行GO分析，Fig 4A显示了主要的GO二级注释，上述核心靶点主要参与炎症反应、T细胞受体信号通路、T细胞分化、调节炎症反应等825个生物学过程（biological process）；主要定位于核质、细胞质、线粒体等77个细胞组分（cell component）；主要涉及NF-κB结合、Hsp90蛋白结合、STAT家族蛋白结合等137个分子功能（molecular function）。此外，上述核心靶点共富集到187条KEGG通路，Fig 4B显示了20条典型的信号通路，其中主要涉及HIF-1、IL-17、Th17细胞分化、NF-κB和JAK-STAT等信号通路。结合上述GO和KEGG分析结果，提示香连丸治疗UC可能与调控JAK-STAT、Th17细胞分化、IL-17、HIF-1等炎症信号通路有关。
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| 图 4 Enrichment analysis diagram of GO（A）and KEGG pathway（B） |
为了进一步探究香连丸治疗UC的作用机制和多成分协同效应，运用Cytoscape 3.7.2软件构建“化合物-靶点-通路”网络图。如Fig 5A所示，25个香连丸入肠成分中有24个成分参与网络调控。根据Degree排名，结果显示，排名前六位的化合物分别是槲皮素、芦丁、咖啡酸、异鼠李素、表小檗碱以及黄连碱，提示上述成分可能是香连丸治疗UC的主要活性成分。为了进一步探讨上述网络的内在联系，我们将Th17细胞分化信号通路分离出来并结合KEGG通路注释分析，如Fig 5B所示，Th17细胞分化、JAK2-STAT3、HIF-1以及IL-17信号通路均参与了网络调控，并且JAK2、STAT3、HSP90和HIF-1是该网络中的关键节点蛋白，可能是香连丸治疗UC的关键靶点。
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| 图 5 Active ingredients-core targets-pathway network（A）and signaling pathway of Th17 cell differentiation（B） |
将上述Degree排名前6位的化合物咖啡酸、黄连碱、表小檗碱、异鼠李素、槲皮素以及芦丁分别与通路图中的关键靶点蛋白HIF1α、HSP90AB1、JAK2和STAT3进行分子对接。如Fig 6所示，对接得分均小于-20.9 kJ·mol-1，提示香连丸主要活性成分与关键靶点具有较稳定的结合构象。
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| Fig 6 Molecular docking analysis of six major active ingredients in Xianglian pills to HIF1A, HSP90AB1, JAK2 and STAT3 |
随着造模时间延长，与正常组相比，模型组小鼠出现不同程度的腹泻，继而部分出现血便、脱肛，精神萎靡，体质量明显降低，DAI评分明显升高；与模型组相比，香连丸高剂量组及阳性药组小鼠腹泻、便血情况逐渐缓解，体质量回升，精神状态明显改善，DAI评分明显下降，见Fig 7A。此外，除正常组小鼠，其余各组小鼠结肠组织均出现不同程度的糜烂、水肿、肠壁变厚变硬等现象。与正常组相比，模型组小鼠结肠长度明显缩短，香连丸高剂量及美沙拉嗪均可延长UC模型小鼠结肠长度（Fig 7B）。
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| Fig 7 Effect of Xianglian pills on DAI score(A)and colon tissue phenotype(B)of UC model mice(x±s, n = 8) ##P < 0.01 vs Control group; **P < 0.01 vs Model group. |
HE染色结果显示，正常组小鼠结肠黏膜上皮结构完整，隐窝形态规则，杯状细胞数量丰富，未见明显炎性细胞浸润。模型组小鼠结肠黏膜上皮完整性破坏，隐窝腺体结构紊乱，杯状细胞数量显著减少，可见大量中性粒细胞、淋巴细胞等炎性细胞弥漫性浸润。经香连丸高剂量及美沙拉嗪治疗后，UC模型小鼠结肠组织损伤明显改善且无明显病理改变，但香连丸低剂量组小鼠结肠隐窝结构仍存在一定程度破坏，少量炎性细胞浸润，见Fig 8。上述结果提示，香连丸可改善UC模型小鼠病理损伤。其中，图中黑色双箭头指示黏膜层；红色双箭头指示黏膜下层；绿色双箭头指示肌层；此外，黑色大括号指示结肠隐窝；黑色三角指示炎性细胞浸润、水肿等；蓝色箭头指示白色的杯状细胞。
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| Fig 8 Effect of Xianglian pills on pathological morphology of colon tissue in UC model mice |
与正常组比较，模型组小鼠血清IL-17、IL-23水平明显升高，IL-10、TGF-β水平明显降低；与模型组比较，香连丸低、高剂量组小鼠血清中IL-17、IL-23水平明显降低，IL-10、TGF-β水平明显升高，见Fig 9。上述结果提示，香连丸具有良好的改善肠道炎症的作用。
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| Fig 9 Effect of Xianglian pills on serum levels of inflammatory factors in UC model mice(x±s, n = 8) ##P < 0.01 vs Control group; *P < 0.05, **P < 0.01 vs Model group. |
采用Western blot对各组小鼠结肠组织中Th17/Tregs细胞水平进行检测。如Fig 10A所示，与正常组相比，模型组小鼠结肠组织中Foxp3蛋白水平明显降低，RORγt蛋白水平明显升高；与模型组相比，香连丸组小鼠结肠组织中Foxp3蛋白水平明显升高，RORγt蛋白水平明显降低。同样地，如Fig 10B所示，各组小鼠结肠组织中Foxp3与RORγt的免疫组织化学染色结果显示了与Western blot结果相一致的变化。上述结果提示，香连丸可调节UC模型小鼠结肠Th17/Tregs细胞水平。
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| 图 10 Western blot（A）and immunohistochemistry（B）on effect of Xianglian pills on Th17/Tregs cell levels in UC model mice（x±s，n = 3） ##P < 0.01 vs Control group; *P < 0.05, **P < 0.01 vs Model group |
如Fig 11A所示，与正常组相比，模型组小鼠结肠组织中p-JAK2/JAK2与p-STAT3/STAT3蛋白水平明显升高；与模型组相比，香连丸各剂量组小鼠结肠组织中p-JAK2/JAK2与p-STAT3/STAT3蛋白水平显著降低。同样地，如Fig 11B所示，各组小鼠结肠组织中p-JAK2与p-STAT3的免疫组织荧光染色结果显示了与Western blot结果相一致的变化。上述结果提示，香连丸可调节UC模型小鼠结肠组织中JAK2-STAT3信号通路。
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| Fig 11 Western blot(A)and immunofluorescence(B)on effect of Xianglian pills on JAK2-STAT3 signaling pathway in UC model mice (x±s, n = 3) ##P < 0.01 vs Control group; *P < 0.05, **P < 0.01 vs Model group. |
近年来，网络药理学研究日益增多，其整体性、系统性的特点与中医的整体观及其辨证论治理念相一致，为中药复方药效物质基础及作用机制研究提供了新策略[6]。目前，大多数网络药理学研究往往依赖于少数数据库（如TCMSP数据库）。然而，由于中药饮片的来源、提取工艺、浓度及生物利用度等原因，中药在体内的成分往往会发生变化，这将导致预测结果的不准确。因此，应将GC-MS和LC-MS等现代分析技术作为重要补充工具，以获取更准确的中药成分结果，从而使得网络药理学成为一种更加准确的研究手段。
研究表明，黄连总生物碱能够降低UC模型小鼠结肠组织中炎症因子水平并修复肠黏膜屏障[7]。同时，绿原酸等酚酸类成分能够减轻UC模型小鼠的结肠黏膜损伤，推测其可能通过抑制IL-6/STAT3信号通路，恢复Th17/Treg细胞平衡发挥治疗UC作用[8]。此外，芦丁等黄酮类成分也被证明可明显改善UC模型小鼠的症状并抑制黏膜炎症[9]。上述结果提示，25个香连丸入肠成分中多数化合物具有良好的治疗UC的活性。
Th17细胞分化介导的炎症反应被认为与UC发病机制密切相关。Th17细胞可通过促进IL-17、IL-23等促炎因子分泌，募集中性粒细胞，加剧肠道炎症反应[10]。值得注意的是，Th17细胞分化和IL-17信号通路是本研究中KEGG富集分析筛选出的重要信号通路。此外，Treg细胞具有免疫抑制功能，可通过分泌抑炎因子TGF-β和IL-35维持免疫稳态[11]。研究表明，抑制Treg细胞分化功能，可导致体内抑炎因子IL-10、TGF-β水平降低，促进UC疾病的进展[12]。因此，Th17/Treg免疫失衡可促进UC的发生、发展，对Th17/Treg的调控可能成为治疗UC的重要靶点。研究证实，Foxp3是控制Treg细胞发育和功能的关键转录因子之一，而Th17细胞可通过促进RORγt表达诱导促炎机制。因此，RORγt与Foxp3水平可反映Th17细胞和Treg细胞分化情况。本研究发现，UC模型小鼠血清中IL-17、IL-23水平明显升高，IL-10、TGF-β水平明显降低；同时，结肠组织中Foxp3蛋白水平明显降低，RORγt蛋白水平明显升高。上述结果提示，UC模型小鼠发生Th17/Treg免疫失衡，而香连丸干预后可改善Th17/Treg失衡现象，表明香连丸治疗UC可能与改善Th17/Treg免疫失衡密切相关。
JAK2-STAT3信号通路参与细胞增殖、分化、凋亡以及免疫调控等多种生物学过程，是免疫炎症调控的中心通信节点[13]。研究表明，激活的JAK2可诱导STAT3发生酪氨酸磷酸化，并促使RORγt表达增加，导致CD4+T细胞向Th17方向分化[14]，同时下调Foxp3表达进而抑制Treg细胞分化[15]，上调Th17/Treg比例，并进一步释放IL-17、IL-21等炎症因子，加重肠道炎症[16]。本研究结果显示，与正常组比较，UC模型组小鼠结肠组织中p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3水平显著增加，而香连丸可明显降低上述蛋白的表达。上述结果提示，香连丸可能通过抑制JAK2-STAT3信号通路，进而改善Th17/Treg免疫失衡，从而发挥治疗UC的作用。此外，HIF-1α是巨噬细胞的关键调节因子，而HSP90AB1是热休克蛋白家族成员之一，上述蛋白均与JAK2-STAT3信号通路密切相关。本研究结果表明，香连丸中主要活性成分与HIF-1α、HSP90AB1蛋白均具有较为稳定的结合构象。
综上所述，本研究基于UHPLC-TOF-MS、网络药理学与分子对接技术，探讨香连丸入肠成分、靶点、通路之间相互作用的关系，进一步结合动物实验验证上述预测结果，发现香连丸可改善UC模型小鼠体内Th17/Treg免疫失衡，恢复UC免疫紊乱状态以发挥治疗UC作用，上述机制可能与调控JAK2-STAT3信号通路有关。本研究结果为香连丸临床治疗UC提供科学依据，并为其新药开发提供实验数据。
（该文附加材料请到中国知网增强出版或本刊官网 http://www.zgylxtb.cn该文章“附录”栏下载。）
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