2. 郑州大学基础医学院药理学教研室，河南 郑州 450001
2. Dept of Pharmacology, Basic Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China
辛伐他汀(simvastatin)主要用于降血脂及预防心脑血管疾病。辛伐他汀口服后体内转化为辛伐他汀酸，而80%以上的辛伐他汀酸由肝微粒体中CYP3A4/5代谢。有研究表明[1-2]，辛伐他汀在体内作用受到CYP3A5基因的影响。因此，研究CYP3A5基因变异对辛伐他汀的药动学和药效学的影响，具有重要的临床意义。
1 材料与方法 1.1 仪器Eppendorf PCR仪；BioSpectrum凝胶成像仪(美国UVP)；岛津LC-10AVP高效液相色谱仪。
1.2 研究对象选择符合选取标准的高脂血症患者115例，均为2010年8月~2013年8月本院住院及门诊患者，平均年龄(54.2±7.3) 岁，其中男性61例，女性54例。本实验获得本医院伦理委员会批准, 所有患者均签署知情同意书。
1.3 血样采集、基因型检测、血脂及血药浓度的测定高脂血症患者均给予每日20 mg的辛伐他汀治疗4周，给药前及给药4周后，分别抽取空腹外周静脉血适量，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析检测CYP3A5*3基因位点，全自动生化分析仪测定血脂，高效液相色谱法测定血中辛伐他汀浓度。
1.4 统计学分析数据以x±s表示，采用SPSS13.0软件对数据进行分析。
2 结果 2.1 高脂血症患者中CYP3A5*3基因分布情况酶切产物电泳进行基因分型，经Hardy-Weinberg检验分析，P＞0.05(χ2=3.06，P=0.08)，符合Hardy-Weinberg遗传平衡，研究资料具有群体代表性。115例高脂血症患者PCR酶切产物中CYP3A5*1/*1型16例，CYP3A5*1/*3型42例，CYP3A5*3/*3型57例，等位基因突变率为67.83%。
2.2 CYP3A5*3基因多态性对辛伐他汀稳态血药浓度及降脂疗效的影响CYP3A5*1/*1组、CYP3A5*1/*3组和CYP3A5*3/*3组之间辛伐他汀稳态血药浓度及降脂疗效均有明显统计学意义(P＜0.01)。稳态血药浓度、血清脂质变化率均为CYP3A5*3/*3组＞CYP3A5*1/*3组＞CYP3A5*1/*1组，结果见Tab 1、2。
| CYP3A5*1/*1(n=16) | CYP3A5*1/*3(n=42) | CYP3A4*3/*3(n=57) | |
| Steady plasma-drug concentration of simvastatin/μg·L-1 | 4.34±0.13 | 4.78±0.31** | 5.08±0.34**## |
| **P＜0.01 vs CYP3A5*1/*1;##P＜0.01 vs CYP3A5*1/*3 | |||
| Index /mmol·L-1 | CYP3A5*1/*1(n=16) | CYP3A5*1/*3(n=42) | CYP3A5*3/*3(n=57) | ||||||
| Before simvastatin | After simvastatin | Change /% | Before simvastatin | After simvastatin | Change /% | Before simvastatin | After simvastatin | Change /% | |
| TG | 1.84±0.12 | 1.48±0.07 | 19.39±1.77 | 1.88±0.07 | 1.43±0.06 | 24.00±1.15** | 1.90±0.07 | 1.38±0.06 | 27.59±1.90**## |
| TC | 6.51±0.20 | 6.26±0.23 | 3.73±1.62 | 7.16±0.47 | 6.10±0.38 | 14.70±3.71** | 7.62±0.51 | 5.48±0.32 | 27.84±5.49**## |
| LDL | 3.35±0.16 | 2.63±0.08 | 21.55±2.53 | 3.54±0.09 | 2.63±0.08 | 25.71±0.94** | 3.64±0.12 | 2.59±0.07 | 28.85±1.38**## |
| HDL | 1.53±0.02 | 1.46±0.05 | -4.10±3.56 | 1.52±0.02 | 1.60±0.02 | 5.08±0.85** | 1.51±0.02 | 1.65±0.04 | 9.21±2.44**## |
| **P＜0.01 vs CYP3A5*1/*1;##P＜0.01 vs CYP3A5*1/*3 | |||||||||
临床上60%的药物经CYP3A代谢[3]，其中CYP3A4和CYP3A5参与了临床中50%以上常用药物的体内代谢。CYP3A5为多态性表达，等位基因出现频率在种族间差异很大，白种人、亚洲人、黑种人的突变概率分别为85%~95%、60%~75%、27%~50%[4]。本研究测定了高脂血症患者的CYP3A5*3的等位基因频率为67.83%，与文献报道一致。
辛伐他汀主要活性代谢产物辛伐他汀酸由CYP3A4/5所代谢，且在CYP3A4酶功能低下的患者中，CYP3A5在代谢中起到重要作用[5]。目前研究证实，CYP3A5基因第3号内含子的6986密码子是决定CYP3A5表达及其活性的最关键因素，CYP3A5参与他汀类药物等外源性物质的代谢及多种与血脂代谢相关的内源性物质的转化。本研究中有突变型基因的个体的稳态血药浓度较高，且降脂疗效较野生型强，证实了CYP3A5基因多态性对辛伐他汀的代谢及降脂疗效有较大影响。
( 致谢: 本实验在郑州大学基础医学院药理学教研室分子实验室、河南省三门峡市中心医院药学部实验室完成。)
| [1] | Kolovou G, Ragia G, Kolovou V, et al. Impact of CYP3A5 Gene Polymorphism on Efficacy of Simvastatin[J]. TOCMJ, 2014, 8(1): 12-7. doi:10.2174/1874192401408010012 |
| [2] | Kitzmiller J P, Luzum J A, Baldassarre D, et al. CYP3A4*22 and CYP3A5*3 are associated with increased levels of plasma simvastatin concentrations in the cholesterol and pharmacogenetics study cohort[J]. Pharmacogenet Genomics, 2014, 24(10): 486-91. doi:10.1097/FPC.0000000000000079 |
| [3] | 马增春, 梁淼, 赵佳伟, 等. 四物汤及其有效成分对大鼠肝脏主要药物代谢酶的影响[J]. 中国药理学通报, 2015, 31(9): 1319-23. Ma Z C, Liang M, Zhao J W, et al. Effects of Si-wu decoction and its active components on cytochrome p450 in rats[J]. Chin Pharmacol Bull, 2015, 31(9): 1319-23. |
| [4] | 李丹滢, 彭婕, 葛卫红, 等. CYP3A5基因多态性对临床药代动力学影响的研究进展[J]. 中国药学杂志, 2011, 46(20): 1541-5. Li D Y, Peng J, Ge W H, et al. Research progress of CPY3A5 gene polymorphism on clinical pharmacokinetics[J]. Chin Pharm J, 2011, 46(20): 1541-5. |
| [5] | Kitzmiller J P, Sullivan D M, Phelps M A, et al. CYP3A4/5 combined genotype analysis for predicting statin dose requirement for optimal lipid control[J]. Drug Metabol Drug Interact, 2013, 28(1): 59-63. |