2. 太极集团重庆涪陵制药厂有限公司科研所，重庆 408000;
3. 重庆市药效评价工程技术研究中心，重庆 400715
2. Research Institute of Chongqing Fuling Drug Manufactory Limited Company of Taiji Bloc, Chongqing 408000, China;
3. Chongqing Engineering Research Center for Pharmacological Evaluation, Chongqing 400715, China
梓葛冻干粉针 (lyophilized powder of catalpol and puerarin，C-P) 为西南大学中药研究所自主研发的用于治疗脑缺血卒中的一种新型中药单体复方制剂，其主要成分为梓醇和葛根素。研究表明[1-2]，C-P能通过血脑屏障，可明显减少缺血性脑中风模型小鼠大脑梗死体积百分比[3]，还能抑制血小板聚集，促进血凝块溶解[4]，保护神经细胞，改善神经细胞损伤后的生长形态[5-6]。该课题组已经开展了C-P的质量标准研究[7]和部分安全性评价研究[8]。为了更全面地掌握C-P用药后对机体基本生命活动的影响，本文对其安全性药理学进行了研究。
1 材料 1.1 试剂与动物C-P (西南大学中药研究所提供，批号20120613)；戊巴比妥钠 (Merck公司，批号：100411)。昆明 (KM) 小鼠和SD大鼠，SPF级，均由重庆医科大学实验动物中心提供。
1.2 仪器转棒疲劳仪 (济南益延科技发展有限公司，YLS-4C型)；小鼠自主活动测试仪 (成都泰盟科技有限公司，ZZ-6型)；生物机能实验系统 (成都泰盟科技有限公司，BL-420F型)
1.3 剂量依据西南大学分子药理实验室对C-P的前期主要药效学实验结果，即SD大鼠有效剂量为32.7 mg·kg-1，KM小鼠有效剂量为52.3 mg·kg-1[9]，设立本研究中的高、中、低剂量。
2 方法 2.1 对中枢神经系统的影响实验取KM小鼠40只，♀♂各半，随机分为4组，分别为C-P低 (52.3 mg·kg-1)、中 (104.6 mg·kg-1)、高 (209.2 mg·kg-1) 剂量组和生理盐水对照组，每组10只，行尾静脉注射。参考文献方法[10]，分别观察给药后药物对小鼠一般行为表现、自主活动、协调机能和戊巴比妥钠阈下催眠剂量诱发入睡的影响，记录给药前后小鼠自主活动次数、给药后从转棒上跌落的小鼠数量、给药后戊巴比妥钠阈下催眠剂量下30 min内翻正反射消失1 min以上的小鼠数量，比较各用药组与对照组间的差异性。
2.2 对呼吸系统功能和心血管系统的影响实验取SD大鼠40只，♀♂各半，随机分为4组，分别为C-P低 (32.7 mg·kg-1)、中 (65.4 mg·kg-1)、高 (130.8 mg·kg-1) 剂量组和生理盐水对照组，每组10只，尾静脉注射。参考文献方法[11]，采用BL-420F生物机能信号采集系统，分别观察戊巴比妥钠腹腔注射麻醉状态下，大鼠给药前后其呼吸频率、呼吸幅度、血压、心律、心电等的变化，比较各用药组与对照组间各项指标的差异性。
2.3 统计学处理实验数据统计分析软件为SPSS18.0。计数数据以x±s表示，采用单因素方差分析ANOVA的LSD-t检验分析；计量数据以发生概率 (%) 表示，采用χ2检验进行统计学处理。
3 结果 3.1 C-P对中枢神经系统无明显影响C-P组给药后，小鼠的一般行为表现、自主活动、协调机能和戊巴比妥钠阈下催眠剂量诱发入睡率与对照组比较均无差异 (P＞0.05)。
3.2 C-P对呼吸系统功能和心血管系统无明显影响与同时间对照组相比，C-P给药后对SD大鼠呼吸频率、呼吸幅度、心电、心率、收缩压、舒张压等指标差异均无统计学意义 (P＞0.05)。
4 讨论本实验研究了C-P对KM小鼠中枢神经系统、SD大鼠呼吸系统和心血管系统的影响。结果表明，C-P在治疗剂量范围对中枢神经系统、呼吸系统和心血管系统均无明显影响。
( 致谢: 感谢西南大学药学院分子药理实验室各位老师和同学的支持和帮助！ )
| [1] | Qin W, Mao X, Chen W, et al. HPLC-APCI-MS/MS method for the determination of catalpol in rat plasma and cerebrospinal fluid: aplication to an in vivo pharmacokinetic study[J]. J Pharm Biomed Anal, 2012, 70(21): 337-43. |
| [2] | 王琴, 邢茂, 唐勤, 等. 梓葛冻干粉针中葛根素在正常大鼠和脑缺血大鼠的药代动力学比较研究[J]. 中国药学杂志, 2014, 49(7): 583-7. Wang Q, Xing M, Tang Q, et al. Pharmacokinetic study of puerarin of Zige freeze-dried powder in cerebral ischemia rats and normal rats[J]. Chin Pharm J, 2014, 49(7): 583-7. |
| [3] | Liu Y, Xue Q, Li X, et al. Amelioration of stroke-induced neurological deficiency by lyophilized powder catapol and puerarin[J]. Int J Biol Sci, 2014, 10(4): 448-56. doi:10.7150/ijbs.8571 |
| [4] | 杨盛, 张飞燕, 何然, 等. 梓葛冻干粉针抗血栓作用实验研究[J]. 中国药理学通报, 2016, 32(5): 737-8. Yang S, Zhang F Y, He R, et al. Effect of lyophilized powder of catalpol and puerarin on antithrombosis[J]. Chin Pharmacol Bull, 2016, 32(5): 737-8. |
| [5] | 薛强, 肖亚平, 陈玉宝, 等. 梓葛冻干粉针抗脑血管单元炎症及氧化损伤[J]. 中国药理学通报, 2016, 32(3): 442-3. Xue Q, Xiao Y P, Chen Y B, et al. Lyophilized powder of catalpol and puerarin reduce stroke inflammation and oxidative stress[J]. Chin Pharmacol Bull, 2016, 32(3): 442-3. |
| [6] | 薛强, 王红玉, 孙文威, 等. 梓葛冻干粉针抗脑缺血"神经血管单元"多细胞凋亡的机制[J]. 中华中医药杂志, 2016, 31(5): 1716-22. Xue Q, Wang H Y, Sun W W, et al. Anti-apoptotic mechanisms of lyophilized powder of catapol and puerarin against brain ischemia damage on neurovascular unit cells[J]. Chin J Tradit Chin Med Pharm, 2016, 31(5): 1716-22. |
| [7] | 原欢欢, 张继芬, 王琴, 等. RP-HPLC法测定梓葛冻干粉针中的药物含量及有关物质[J]. 中国药学杂志, 2011, 46(16): 1276-9. Yuan H H, Zhang J F, Wang Q, et al. Determination of catalpol and puerarin contents and their related substances in Zige freeze-dried powder for injection by RP-HPLC[J]. Chin Pharm J, 2011, 46(16): 1276-9. |
| [8] | 原欢欢, 张继芬, 王琴, 等. 梓葛冻干粉针的局部刺激性、过敏性、溶血性和急性毒性研究[J]. 中国药理学通报, 2013, 29(6): 880-1. Yuan H H, Zhang J F, Wang Q, et al. Focal irritant, allergia, haemolyticus and acute toxicity of catalpol and puerarin for injection[J]. Chin Pharmacol Bull, 2013, 29(6): 880-1. |
| [9] | 徐叔云, 卞如濂, 陈修. 药理实验方法学 (第三版)[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2001: 203. Xu S Y, Bian R L, Chen X. Experimental Methodology of Pharmacology, 3rd edition[M]. Beijing: People's Medical Publishing House, 2001: 203. |
| [10] | 艾国, 王德文, 黄正明, 等. 金丝桃苷的一般药理学研究[J]. 药物评价研究, 2016, 39(2): 202-6. Ai G, Wang D W, Huang Z M, et al. General pharmacological study of hyperoside[J]. Drug Eval Res, 2016, 39(2): 202-6. |
| [11] | 陈俞材, 张惠芳, 林溢煌, 等. 新型Rho激酶抑制剂DL0805-2的一般药理学研究[J]. 中国新药杂志, 2015, 24(18): 2065-72. Chen Y C, Zhang H F, Lin Y H, et al. General pharmacology of the new Rho kinase inhibitor DL0805-2[J]. Chin J New Drugs, 2015, 24(18): 2065-72. |